CorrectASE™ 酶
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CorrectASE™ 酶
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CorrectASE™ 酶

CorrectASE™ 酶可去除由寡核苷酸合成错误引起的错配,从而使您的合成基因或片段中突变减少至原来的 1/3 – 1/10。通过将 CorrectASE™ 酶引入由您自己操作的基因合成工作流程,您可以实现:•减少您的合成基因或片段中的突变数量• 通过仅筛选每个合成构建体的 2–4了解更多信息
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CorrectASE™ 酶可去除由寡核苷酸合成错误引起的错配,从而使您的合成基因或片段中突变减少至原来的 1/3 – 1/10。通过将 CorrectASE™ 酶引入由您自己操作的基因合成工作流程,您可以实现:

•减少您的合成基因或片段中的突变数量
• 通过仅筛选每个合成构建体的 2–4 个克隆而非 10-16 个克隆,从而减少了您的劳动时间
• 通过仅测序 2–4 个克隆而非测序 10–16 个合成基因,从而减少了您的成本

防止不需要的突变
在合成过程中,市售合成寡核苷酸具有较高的错误率,根据来源不同,每 300–1000 碱基有最少一个错误。这些错误导致基因合成过程中出现移码(缺失和插入)和错配突变。用 CorrectASE™ 酶进行孵育可去除两种类型的突变。

在进行寡核苷酸初始 PCR 组装后,引入使用 CorrectASE™ 酶进行的孵育步骤。对 PCR 产物进行变性和再退火将导致所有突变不可匹配。CorrectASE™ 酶与产生的错配结合,并使错误的 DNA 双链 3’ 产生缺口。酶的 3’ 至 5’ 核酸外切酶活性可消除错误。然后,使用校正聚合酶进行的最终 PCR 组装正确片段,从而增加使用正确序列分离克隆的可能性。根据得到的寡核苷酸质量,相较于工作流程中不包括校正步骤的 10–16 个克隆,仅需筛选 2–4 个克隆。在您的基因合成工作流程中加入 CorrectASE™ 酶可减少劳动时间和测序成本。

仅供研究使用。不可用于动物或人类治疗或诊断用途。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
兼容缓冲液反应缓冲液
外切核酸酶活性3' - 5'
产品类型CorrectASE™ 酶
纯度>95%,SDS-PAGE
数量200 reactions
CorrectASE™
Unit SizeEach
内容与储存
4管 CorrectASE,每管50 rxns
1管 10X CorrectASE Rxn 缓冲液

常见问题解答 (FAQ)

什么是校正酶(CorrectASE)?它的功能是什么?

CorrectASE是一种酶,它可以消除由寡核苷酸合成错误导致的错配,导致合成基因或片段的错配减少3 - 10倍。它作为一个独立的产品出售(货号A14973),或作为GeneArt基因合成试剂盒(货号A14971)的一部分。

我对Do It Yourself 基因合成试剂盒所用的引物浓度有点困惑,请对这个问题做一些说明。

根据实验方案,寡核苷酸储存液应该用1X TE缓冲液配制,其终浓度为100 μM。下一行建议将浓度为10 μM的引物各取5μl加到一起。根据研发同事的反馈,操作手册这样写是因为他们通常将冻干的寡核苷酸配制成浓度为100 μM的储液(由于EP管体积的原因)。但是你做实验时可能会需要用到浓度为0.15 μM的引物pool。这时,你可以将储液稀释到10 μM或者将引物pool按1:10稀释。

使用GeneArt Do-It-Youself基因合成试剂盒时,我没有得到PCR产物,我应该怎么办?

使用CorrectASE酶过度酶切可能会导致DNA模板降解。

确保反应不超过60分钟。同时,确保在PCR步骤前反应物保持冰浴,否则反应物将有可能被CorrectASE酶过度酶切。

我觉得我的序列不准确,应如何处理?

请发送电子邮件到geneartsupport@lifetech.com对有错误的地方进行说明。请同时提供项目编号及载体编号(ID),以便我们将问题反馈给质检部门做进一步调查。

我不能使用Xba1对GeneArt合成的我的感兴趣的基因进行酶切。这是什么原因?

我们在生产过程中会采用不同的菌种,例如Top10或DH5α。一般情况下,我们用dam+菌种进行培养。因此,你可能发现酶切受到抑制,因为Xba1对dam甲基化敏感。