Ambion™ 大肠杆菌核糖核酸酶 III (RNase III; EC 3.1.24) 是双链 RNA (dsRNA) 特异性核酸外切酶。在大肠杆菌中，RNase III 在 rRNA 的成熟过程中切割核糖体 RNA (rRNA) 前体。该酶将 dsRNA 裂解成 12–15 bp dsRNA 片段，具有 2-3 个核苷酸 3' 突出端、5' 磷酸和 3' 羟基末端。因此，RNase III 切割产物的末端和突出端与真核 RNAi 通路中 Dicer 生成的产物相同。可使用 RNase III 裂解产物转染来诱导哺乳动物细胞中的 RNAi（正在申请专利）。

单位定义：
一单位被定义为在 60 min 内于 37°C 下将 1 µg 的 500 bp dsRNA 底物催化切割为约 12–30 bp 片段所需的酶量。