CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 检测试剂
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CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 检测试剂
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CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 检测试剂

CellEvent 半胱天冬酶-3/7 检测试剂是永远检测细胞凋亡的新型荧光底物。这些底物可检测活细胞中活化的半胱天冬酶-3/7,这些活细胞可通过抗体检测工作流程进行固定和多通路检测。
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货号数量颜色激发/发射dimFormat
C104321 小瓶绿色∼502/530 nm
C104301 小瓶红色∼590/610 nm
C104315 小瓶红色∼590/610 nm
C104335 小瓶绿色∼502/530 nm
C104342小瓶(1小瓶为绿色,1小瓶为红色)红色,绿色∼590/610 nm,∼502/530 nm
C104231 x 100 μL 样品瓶绿色∼502/530 nm
C107231 x 25 µL 样品瓶绿色∼502/530 nm
货号 C10432
价格(CNY)
3,065.00
Each
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数量:
1 小瓶
颜色:
绿色
激发/发射:
∼502/530 nm
价格(CNY)
3,065.00
Each
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CellEvent 半胱天冬酶-3/7 绿色和 CellEvent 半胱天冬酶-3/7 红色检测试剂是适用于活细胞中活化的半胱天冬酶-3/7 的新型荧光底物,这些活细胞可通过免疫荧光 (IF) 和免疫细胞化学 (ICC) 等抗体检测工作流程进行固定和多通路检测。半胱天冬酶-3 的激活是细胞凋亡过程中的重要事件,使得这些优化试剂可用于分析凋亡细胞。CellEvent 半胱天冬酶-3/7 红色检测试剂也可用于检测 GFP 表达细胞中的细胞凋亡。
这些指示剂的特点包括:
•用于细胞凋亡分析的经优化半胱天冬酶-3/7 底物
• 易于使用—只需加入和读取;无需细胞裂解
• 用于时程测量;易于选择目标时间点
• 与活细胞荧光成像和甲醛固定法兼容
• 支持多通道检测—与其他荧光试剂结合,证实同一细胞或细胞群中的细胞凋亡

CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 绿色检测试剂:最大吸收/发射波长 ∼502/530 nm。可使用 FITC/GFP 传统滤光片组进行检测。

CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 红色检测试剂:最大吸收/发射波长 ∼590/610 nm。可使用传统 Texas 红色滤光片组进行检测。

CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 红色检测试剂和 CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 绿色检测试剂以干粉形式提供。仅需向干粉中加入 100µL PBS 即可制备 100X 储备液。用完全培养基按 1:100 的比例稀释该 100X 储备液,染色细胞 30-60 分钟,然后用荧光显微镜分析。

CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 红色检测试剂也以即用型 DMSO 溶液形式提供。DMSO 溶液为 400X 即用型储备液。仅需用生长培养基按 1:400 的比例稀释该储备液,然后染色细胞 30-60 分钟。

为了防止凋亡细胞被洗掉,染色结束时无需洗涤。染色细胞可进行活分析或用 4% 多聚甲醛溶液固定,例如含 Image-IT™ 多聚甲醛 4% 的 0.1M 磷酸盐缓冲液 (pH 7.4)(货号:I28800)。这些固定细胞可以进一步处理,以用于 ICC 工作流程。

底物特异性
CellEvent 半胱天冬酶-3/7 检测试剂是与核酸结合染料偶联的四氨基酸肽 (DEVD)。DEVD 肽序列是半胱天冬酶-3/7 的切割位点,并且偶联的染料不发出荧光,直到从肽上断裂并与 DNA 结合为止。

作用机制
由于 DEVD 肽可抑制染料与 DNA 结合的能力,CellEvent 半胱天冬酶-3/7 绿色检测试剂本身不发出荧光。然而,凋亡细胞中半胱天冬酶-3/7 激活后,DEVD 肽断裂,使染料能够结合到 DNA 上并反应产生明亮的荧光。

简易的三步方案
使用 CellEvent 半胱天冬酶 3/7 检测试剂,只需将其添加到细胞中,孵育 30–60 分钟,即可进行观察。含已激活半胱天冬酶-3/7 的凋亡细胞具有明亮的绿色或红色细胞核,而不含已激活半胱天冬酶 3/7 的细胞只发出微弱的荧光信号。

测定的多功能性可实现对活细胞进行检测和固定
该稳健的测定使研究人员能够对活细胞中半胱天冬酶-3/7 的激活进行检查。此外,由于清洗步骤不是检测所必需的,通常在清洗步骤丢失的脆弱的凋亡细胞会被保存。重要的是,CellEvent 半胱天冬酶 3/7 检测试剂发出的荧光信号可在固定和透化过程中保存下来。这允许灵活地进行终点测定,并使用免疫细胞化学方法探测其他关注的蛋白质。

规格
颜色绿色
激发/发射∼502/530 nm
形式粉末
数量1 小瓶
偶联物细胞核染料
检测方法荧光
Unit SizeEach

常见问题解答 (FAQ)

How long can I measure the Cell Event Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10432, C10433, C10434, C10423, C10723, R37111) signal for the kinetic assay?

We have tested Caspase 3/7 Green Detection Reagents (Cat. Nos. C10432, C10433, C10434, C10423, C10723, R37111) for up to 48 hours and observed no toxicity or stability issues with the reagent. If the samples are fixed at the end of the time course the signal will be retained for days. For live cells, apoptotic cells will round up and float away before the loss of fluorescence signal from CellEvent.

The following reference reports a visible signal for up to 72 hrs:

Sambi M, Samuel V, Qorri B, Haq S, Burov SV, Markvicheva E, Harless W, Szewczuk MR. A Triple Combination of Metformin, Acetylsalicylic Acid, and Oseltamivir Phosphate Impacts Tumour Spheroid Viability and Upends Chemoresistance in Triple-Negative Breast Cancer. Drug Des Devel Ther. 2020 May 25;14:1995-2019. doi: 10.2147/DDDT.S242514. PMID: 32546966; PMCID: PMC7260544.

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Can I use other nucleic acid stains with CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434)?

We do not recommend using other nucleic acid stains with CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434). The application of other nucleic acid stains may result in inadequate detection of the caspase-cleaved reagent. Other nucleic acid stains might limit binding of the CellEvent Caspase-3/7 Green or Red Detection Reagent (competition) or spectrally interact with the reagents (quenching, FRET, etc.).

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Upon cleavage by caspases, can the CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434) also stain RNA in the cytoplasm?

It is possible for CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434) to stain RNA in the cytoplasm upon cleavage by caspases, but the extent of RNA staining should be minimal.

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What are the nucleic acids-binding dyes attached to the DEVD peptide of the CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434)?

The identity of the nucleic acid dyes attached to the DEVD peptide of the CellEvent Caspase-3/7 Detection Reagents (Cat. Nos. C10430, C10431, C10432, C10433, C10434) are proprietary.

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