Thermo Scientific 二氧化硅珠 DNA 凝胶提取试剂盒是从琼脂糖凝胶和反应混合物中提取 DNA 的简单且高效的系统。该试剂盒利用 Vogelstein 和 Gillespie 的改良方案,采用琼脂糖凝胶增溶作用并在高盐浓度下在专门制备的二氧化硅颗粒上进行核酸选择性吸附。清洗与 DNA 结合的硅胶颗粒,以去除污染物,纯化 DNA 用 TE 缓冲液或水洗脱。
该方法需要的操作步骤很少,并且比其他基于有机物的提取方法更快速、更容易。与基于柱的凝胶提取试剂盒相比,DNA 凝胶提取试剂盒可以灵活地扩大或缩小反应和洗脱体积。纯化 DNA 适用于所有常见的分子生物学程序,包括限制性酶切、克隆、测序等
产品优势•
灵活—易于按比例放大或缩小反应规模和洗脱体积
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高效—DNA 回收率超过 80%
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快速—纯化仅需15至20分钟
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有效—适合短至 100 bp 的 DNA 片段
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安全—不涉及苯酚提取
应用• 从使用
TAE 或
TBE 缓冲液制备的琼脂糖凝胶中纯化 DNA 片段
• 浓缩 DNA 样品,以便脱盐或置换缓冲液
• 在 PCR、限制性酶切、去磷酸化或标记反应后去除酶
• 去除未结合的核苷酸、引物和引物二聚体
• 在连接后去除连接子
• 去除残留的盐、苯酚、氯仿或溴化乙锭
• 纯化无 RNA 的质粒 DNA
包括硅粉悬浮液、结合缓冲液、浓缩洗涤缓冲液、TBE 转化缓冲液、详细方案
注在将凝胶纯化的 DNA 片段用于下游克隆反应时,应注意避免紫外光破坏 DNA。切下凝胶切片时,请务必使用长波长紫外光 (360 nm) 光源。如果只有短波长紫外光(254 至 312 nm)光源可用,则应尽量将紫外光暴露时间缩短至数秒钟,或将凝胶放置在玻璃或塑料板上。或者,可在标准琼脂糖凝胶中加入肉眼可见的染料,以便在环境光线下观察 DNA 条带 (2,3)。