Invitrogen™

带 BL21 Star™ (DE3) One Shot™ 化学感受态大肠杆菌的 Champion™ pET200 定向 TOPO™ 表达试剂盒

货号: K20001
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带 BL21 Star™ (DE3) One Shot™ 化学感受态大肠杆菌的 Champion™ pET200 定向 TOPO™ 表达试剂盒

货号: K20001
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K20001
又称 K200-01
单位规格
20 reactions
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Champion™ pET 表达系统可在大肠杆菌中产生最高水平的蛋白产率。在表达过程中,目的蛋白可能达到超过 50% 总细胞蛋白的水平。基于最初由 Studier 及其同事 (1-3) 开发的 T7 表达载体,由于 T7 RNA 聚合酶比天然大肠杆菌 RNA 聚合酶合成能力更强且专用于目的基因转录,可实现高水平表达。表达株 BL21 Star ™大肠杆菌可进一步提高系统中的蛋白产率,可显著提高 mRNA 转录物的稳定性并将蛋白表达增加十倍。

简化且高效的定向 TOPO™ 克隆可快速进入 Champion™ pET 表达载体。这些试剂盒具有线性化、拓扑异构酶 I 活化 Champion™ pET 表达载体,可实现 5 分钟定向克隆。定向 TOPO™ 克隆技术可促进基因表达,因为:

•校正性酶用于 PCR,使得克隆化基因中错误较少
•超过 90% 的克隆可以获得正确的基因表达方向,从而减少了菌落筛选所花费的时间

7 种 Champion™ pET 定向 TOPO™ 表达载体可供选择(图 1 和表 1):每个载体携带一个 T7lac 启动子,可实现高水平表达。提供简化蛋白检测、裂解纯化标记、选择携带质粒的克隆和/或提高蛋白产率的灵活选择。
借助 Champion™ pET 定向 TOPO™ 载体,您可以获得最高水平的蛋白产率。图 2 显示了 Champion™ pET 定向 TOPO™ 载体中 lacZ 基因的表达。图 3 显示了使用 TEV 蛋白酶对 pET151/D-TOPO™ 表达的 β-半乳糖苷酶融合蛋白的 N 端标签进行高效的切割。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

规格

构成或诱导系统
诱导
诱导剂
IPTG:
促进剂
T7, lacO
产品类型
TOPO 表达试剂盒
选择试剂(真核生物)
耐抗生素细菌
卡那霉素 (KanR)
细菌或酵母菌株
BL21 Star™(DE3)
切割
EK(肠激酶)识别位点
表达系统
大肠杆菌
表达机制
基于细胞的表达
蛋白标记
His 标签 (6x)、Xpress 抗原决定簇标签, Xpress Epitope Tag
克隆方法
定向 TOPO™
载体
pET
产品线
One Shot™

内容与储存

每种 Champion™ pET 定向 TOPO™ 表达试剂盒均作为完整的表达系统提供。定向 TOPO™ 表达盒含有 200 ng 线性化、拓扑异构酶 I 活化 Champion™ pET 载体;无菌水;dNTP;10X PCR 缓冲液;盐溶液;对照模板和引物;测序或 PCR 筛选用引物以及表达对照品。在 -20°C 下储存。One Shot™ TOP10 盒含有 21 份 50 µL 化学感受态大肠杆菌等份试液、S.O.C. 培养基和一份对照质粒。在 -80°C 下储存。One Shot™ BL21 Star™(DE3) 盒含有 21 份 50 µL 化学感受态大肠杆菌等份试液、S.O.C. 培养基和一份对照质粒。在 -80°C 下储存。采用 Lumio™ 技术的试剂盒包括 20 份 µL Lumio™ 检测试剂。在 -20°C 下储存。妥善储存时,可保证稳定储存 6 个月。

图表

文件和下载

证书

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    引用和文献

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