pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒,含 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌(仅限供应中心)
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Invitrogen™

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒,含 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌(仅限供应中心)

TOPO™ TA Cloning™试剂盒设计用于在 5 分钟内从 PCR 反应中直接克隆 PCR 产物。TOPO™了解更多信息
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货号数量
K250020SC20 Reactions
货号 K250020SC
价格(CNY)
5,460.00
飞享价
Ends: 31-Dec-2026
7,000.00
共减 1,540.00 (22%)
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TOPO™ TA Cloning™试剂盒设计用于在 5 分钟内从 PCR 反应中直接克隆 PCR 产物。TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒使用含共价结合拓扑异构酶 I 的 pCR™-TOPO™ 载体进行快速克隆和重组。最新的 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒随附一份 Gateway™ (GW) 入门载体、pCR™8/GW/TOPO™(图 1)。该载体具有:

•3´-T 突出端可用于直接连接 Taq- 扩增 PCR 产物
att 位点可用于快速重组至多种 Gateway™ 目标载体
att 区域内的全新 GW 引物位点,位于距 PCR 产物插入位点不到 55 个碱基对的位置处,可用于方便测序
• 壮观霉素抗性基因可用于在大肠杆菌中实现稳健选择
• 位于 PCR 产物插入位点旁侧的 EcoR I 位点可方便地切除插入片段

用于 Gateway™ 技术的选定 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒可通过与 PureLink™ 快速质粒小提试剂盒(50 次制备)结合的套装试剂盒提供,用于对您的 TOPO™ 克隆插入片段进行快速质粒纯化以进行下游分析。


仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
克隆方法带 Gateway™ 的 TOPO™
反应次数20 reactions
产品线One Shot
产品类型TA 克隆试剂盒
数量20 Reactions
运输条件干冰
载体pCR
Unit SizeEach
内容与储存
pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒包含 TOPO™-适应性即用型 pCR™8/GW/TOPO™ 载体、dNTP、盐溶液、无菌水、GW 正向和反向测序引物、对照模板和 PCR 引物、One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌或 One Shot™ Mach1™-T1R 化学感受态大肠杆菌、S.O.C.培养基和 pUC19 对照质粒。PureLink™ 快速质粒小提试剂盒含有重悬缓冲液、RNase A、裂解缓冲液、沉淀缓冲液、洗涤缓冲液、TE 缓冲液、离心柱以及清洗和回收管。PureLink™ 试剂盒的所有组分均在室温下储存。One Shot™ 大肠杆菌在 -80°C 下储存。将所有其他组分储存在 -20°C 下。正确存放时,所有试剂均可保证 6 个月的稳定。

常见问题解答 (FAQ)

我可将感受态细胞存储在液氮中吗?

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中,因为极端温度会损害细胞。另外,装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度,从而发生破裂。

我应该如何存储我的感受态E. Coli?

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度,即使存储时间很短,也会显著降低其转化效率。

Gateway兼容的TOPO载体同时提供一个对照模板和对照引物。可否提供对照模板的序列吗?

对照模板的序列是受专利保护的。

插入片段:载体的最佳比例是多少?是否有公式可以进行计算?

您可能需要尝试不同的插入片段:载体比例,范围从1:1至15:1。

公式:
length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio (插入片段长度 (bp) X 载体重量(ng) ) / 载体长度 (bp) = 插入片段:载体比例为1:1时所需的插入片段重量(ng)

Platinum Taq DNA高保真聚合酶混合物是否会在PCR产物中留下3′ A尾,从而可用于之后的TOPO TA 或普通TA 载体克隆?

是的,该酶混合物会使一部分PCR产物留下3′端 A尾。然而相对于单独采用Taq聚合酶,克隆效率会大幅度下降。建议在PCR产物添加3′端 A尾后再进行TA克隆。