TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒，双启动子，含 pCR™II-TOPO™ 载体和 One Shot™ Mach1™ T1 耐噬菌体化学感受态大肠杆菌

TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒，双启动子，含 pCR™II-TOPO™ 载体和 One Shot™ Mach1™ T1 耐噬菌体化学感受态<i>大肠杆菌</i>

引用和文献 (1)

Invitrogen™

TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒，双启动子，含 pCR™II-TOPO™ 载体和 One Shot™ Mach1™ T1 耐噬菌体化学感受态大肠杆菌

TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒设计用于仅在 5 分钟内即可从 PCR 反应中直接克隆 PCR 产物了解更多信息

货号	数量
K461020	25 次反应

货号 K461020

价格（CNY)

4,275.00

Ends: 31-Dec-2026

8,549.00

共减 4,274.00 (50%)

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25 次反应

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TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒设计用于仅在 5 分钟内即可从 PCR 反应中直接克隆 PCR 产物 (1)。它们使用含共价结合拓扑异构酶 I 的 pCR™-TOPO™ 载体进行快速克隆和重组。pCR™-TOPO™ 载体包括：

•3´-T 突出端，用于直接连接 Taq 扩增 PCR 产物
• 可选择 T7 (pCR™2.1-TOPO™) 或 T7 和 SP6 (pCR™II-TOPO™) 启动子，用于体外 RNA 转录和测序。每个载体还包含 M13 正向和反向引物位点，用于测序。
•位于 PCR 产物插入位点侧翼的 EcoR I 位点，可方便地切除插入片段
• 卡那霉素和氨苄青霉素抗性基因，用于在大肠杆菌
中进行选择• 简便的蓝/白斑菌落筛选，用于选择重组体

TOPO™ TA Cloning ™ 试剂盒也可通过与 PureLink™ 快速质粒小提试剂盒（50 次制备）结合的组合试剂盒提供，用于对您的 TOPO™ 克隆插入片段进行快速质粒纯化以进行下游分析。

仅供科研使用。不可用于诊断程序。

细菌或酵母菌株Mach1™

细胞类型化学感受态

克隆方法TOPO™-TA

适用于（应用）染色质生物学

产品线One Shot

产品类型克隆试剂盒

促进剂T7, SP6

数量25 次反应

载体TOPO-TA 克隆载体

产品规格试剂盒

Unit SizeEach

内容与储存

盒 1：
• 拓扑异构酶 I 活化 pCR™II-TOPO™ 载体
• PCR 缓冲液
• 盐溶液
• dNTP
• 对照模板
• M13 正向和反向引物
• 对照 PCR 引物
• 无菌水

在 -5 至 -30°C 下储存。
妥善储存时，所有试剂均可稳定储存 6 个月。

盒 2：
• One Shot™ 化学感受态或 Electrocomp™ 大肠杆菌
• S.O.C. 培养基
• 超螺旋 pUC19 对照质粒。

在 -68 至 -85°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

我可将感受态细胞存储在液氮中吗？

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中，因为极端温度会损害细胞。另外，装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度，从而发生破裂。

我应该如何存储我的感受态E. Coli？

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度，即使存储时间很短，也会显著降低其转化效率。

对TOPO TA克隆来说最佳的插入片段：载体比例是多少？是否有公式来计算用量？

我们建议起始摩尔比为1:1(插入片段：载体)，范围为0.5：1到2：1(插入片段：载体)。对TOPO克隆来说，2kb大小的 PCR产物的ng值应在5- 10ng之间。

计算公式：< br / > 插入片段长度（bp）/ 载体长度（bp）x 载体用量（ng）= 插入片段：载体比为1：1时所需的插入片段的用量（ng）。

插入片段：载体的最佳比例是多少？是否有公式可以进行计算？

您可能需要尝试不同的插入片段:载体比例，范围从1:1至15:1。

公式：
length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio (插入片段长度 (bp) X 载体重量(ng) ) / 载体长度 (bp) = 插入片段:载体比例为1:1时所需的插入片段重量(ng)

Platinum Taq DNA高保真聚合酶混合物是否会在PCR产物中留下3′ A尾，从而可用于之后的TOPO TA 或普通TA 载体克隆？

是的，该酶混合物会使一部分PCR产物留下3′端 A尾。然而相对于单独采用Taq聚合酶，克隆效率会大幅度下降。建议在PCR产物添加3′端 A尾后再进行TA克隆。

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引用和文献 (1)

引用和文献

Abstract

Virus-specific cytotoxic T-lymphocyte responses select for amino-acid variation in simian immunodeficiency virus Env and Nef.

Authors:Evans DT, O'Connor DH, Jing P, Dzuris JL, Sidney J, da Silva J, Allen TM, Horton H, Venham JE, Rudersdorf RA,Vogel T, Pauza CD, Bontrop RE, DeMars R, Sette A, Hughes AL, Watkins DI

Journal:Nature Medicine

PubMed ID:10545993

Cytotoxic T-lymphocyte (CTL) responses to human immunodeficiency virus arise early after infection, but ultimately fail to prevent progression to AIDS. Human immunodeficiency virus may evade the CTL response by accumulating amino-acid replacements within CTL epitopes. We studied 10 CTL epitopes during the course of simian immunodeficiency virus disease progression in ... More