LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒,用于 488 nm 激发
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LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒,用于 488 nm 激发
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LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒,用于 488 nm 激发

在细胞内抗体染色所需的固定和透化前,或者在使用甲醛固定消除生物危害性物质前,使用 LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒测定细胞活力。本试剂盒经过优化和验证,可与蓝色激光流式细胞仪配合使用。•稳定—染料在单独小瓶中冷冻干燥,以维持稳定性•稳健—染色模式在固定前后相同•明亮信号—能够以单通道轻松分辨活/死细胞查看用于流式细胞分析的所有可固定活力染料的选择指南。稳定与以溶液形式销售的产品不同,LIVE/DEAD™ 可固定绿色染色剂以 40 次测试瓶便利包装,有助于确保染料随时间推移的稳定性和性能。溶液中的胺反应性染料在短时间内会失去其有效性,因此建议在再水化后完全使用小瓶了解更多信息
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货号 L23101
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在细胞内抗体染色所需的固定和透化前,或者在使用甲醛固定消除生物危害性物质前,使用 LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒测定细胞活力。本试剂盒经过优化和验证,可与蓝色激光流式细胞仪配合使用。

•稳定—染料在单独小瓶中冷冻干燥,以维持稳定性

•稳健—染色模式在固定前后相同

•明亮信号—能够以单通道轻松分辨活/死细胞

查看用于流式细胞分析的所有可固定活力染料的选择指南

稳定
与以溶液形式销售的产品不同,LIVE/DEAD™ 可固定绿色染色剂以 40 次测试瓶便利包装,有助于确保染料随时间推移的稳定性和性能。溶液中的胺反应性染料在短时间内会失去其有效性,因此建议在再水化后完全使用小瓶。如果无法做到这一点,将小瓶以小体积等分,并储存在 -80°C 下,避免冻融循环。

稳健
死细胞鉴别染色剂可在固定剂(如细胞内磷酸化研究所需的甲醛或基于乙醇的固定方法)处理后失去敏感性。LIVE/DEAD™ 可固定绿色染色剂是一种与细胞内和细胞外胺共价结合的胺反应性染料,在甲醛固定后保留染色模式。

极佳亮度
LIVE/DEAD™ 可固定绿色染色剂根据其在使用蓝色 488 nm 激光激发时提供明亮信号的荧光特性所选择。绿色荧光反应性染料的最大激发波长为 ∼495 nm,使其适用于与蓝色激光器配合使用,发射波长为 ∼520 nm,可在 FITC 通道中进行采集。因为可以使用流式细胞仪的单色染料和单通道来区分活细胞和死细胞、所以它是多色实验的理想选择。

工作原理
在细胞膜受损的细胞中,染料可与细胞内部和细胞表面的游离胺基反应,产生强烈的荧光染色。在活细胞中,染料的反应活性仅限于细胞表面的胺,从而导致更少的荧光强度。活细胞与死细胞之间的强度差异通常大于 50 倍,可轻松分辨。

提供多种颜色
LIVE/DEAD™ 可固定死细胞染色剂有多种颜色可供选择,以满足您的多色检测组合需求。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
细胞渗透性不透过
细胞类型真核细胞
描述LIVE/DEAD™ 可固定绿色死细胞染色剂试剂盒,用于 488 nm 激发
检测方法荧光
染料类型其他标记或染料
形式实心
产品规格
数量200 次检测
运输条件室温
溶解度DMSO(二甲亚砜)
颜色绿色
发射520 nm
Excitation Wavelength Range495 nm
适用于(应用)活力测定试剂盒
适用于(设备)流式细胞仪
产品线LIVE/DEAD
产品类型染色剂
Unit SizeEach
内容与储存
包含5小瓶 LIVE/DEAD™ 可固定死细胞染色剂以及 500 μL DMSO。

在 -20°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

我如何为LIVE/DEAD细胞活力实验准备死细胞对照?

有两种简单的方法。一种是通过60°C放置20分钟热灭活细胞。第二种是将细胞放入70%乙醇。乙醇固定的细胞可以在冰箱中无限期储存直到使用,可达好几年。

1.离心细胞、使细胞沉淀并去除上清
2.固定细胞:在15mL含有细胞团的试管中加入10 mL70%冰乙醇,先开始逐滴加入后震荡,混合均匀。
3.在冰箱中储存直到使用。
4.快使用时,水洗两次且在选择的缓冲液中重悬。

哪一种细胞活力试剂盒兼容固定?

•用于流式细胞仪分析的LIVE/DEAD可固定试剂盒适用于固定。这些试剂盒使用胺基反应细胞-非渗透染料对活细胞细胞表面和死细胞胞质染色——活细胞暗淡死细胞明亮。因为染料共价结合到细胞,固定后保留。不幸的是,此方法对基于成像的实验效果不好,由于所有细胞都被染色,很难通过显微镜从暗淡的活细胞中分辨出明亮的死细胞。

•Image-IT DEAD绿色活性染料(货号I10291),用于成像和高通量扫描(HCS)分析的,是一种活细胞非透过型DNA结合染料,固定且透过后可保留长达48小时。

•我们同时推出用于成像分析的LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability试剂盒(货号L7013),其含有两种DNA结合染料,SYTO 10和Dead Red,可以有效染色且通过4%戊二醛固定后快速分析。

注:总的来说,DNA结合的染料和钙黄绿素AM不适用于固定,由于这些染料不能共价地结合到细胞组分上,因此会在固定后缓慢扩散出细胞,逐渐地将所有细胞都染色。

为什么我要在实验中纳入活性染色?

许多抗体和染色剂会标记死细胞。如果您不把死细胞从分析中排除,相关数据将受到干扰。当然,如果你标记的是固定细胞,由于其本身已经死亡,就不再需要添加活性染色剂。但是,如果你们在固定前标记细胞,就需要使用LIVE/DEAD 固定死细胞染色剂。

我能用Attune NxT声波聚焦流式细胞仪检测的大小下限是多少?

Attune NxT声波聚焦流式细胞仪检测的下限是0.5 µm。

Attune NxT自动进样器有何作用?

Attune NxT自动进样器是Attune NxT声波聚焦流式细胞仪的可选附件,能够快速分析至多384份样品。对于不同形式平板——无论96孔还是384孔板——它都具有广泛的兼容性。内置智能探针,最大限度避免堵塞和截留(<0.5%),防止损坏仪器。该仪器通过通气而不是振荡混合,确保样品的均质性,同时维持细胞的活性。它还可作为Attune NxT流式细胞仪关机程序的一个步骤来执行自动清洗。无论采用何种取样方法(试管或平板)和数据采集速率,它都能提供一致的数据。

引用和文献 (8)

引用和文献
Abstract
Techniques to improve the direct ex vivo detection of low frequency antigen-specific CD8+ T cells with peptide-major histocompatibility complex class I tetramers.
Authors:Chattopadhyay PK, Melenhorst JJ, Ladell K, Gostick E, Scheinberg P, Barrett AJ, Wooldridge L, Roederer M, Sewell AK, Price DA,
Journal:Cytometry A
PubMed ID:18836993
'The ability to quantify and characterize antigen-specific CD8+ T cells irrespective of functional readouts using fluorochrome-conjugated peptide-major histocompatibility complex class I (pMHCI) tetramers in conjunction with flow cytometry has transformed our understanding of cellular immune responses over the past decade. In the case of prevalent CD8+ T cell populations that ... More
Amine reactive dyes: an effective tool to discriminate live and dead cells in polychromatic flow cytometry.
Authors:Perfetto SP, Chattopadhyay PK, Lamoreaux L, Nguyen R, Ambrozak D, Koup RA, Roederer M,
Journal:J Immunol Methods
PubMed ID:16756987
'Membrane-damaged cells caused by either mechanical trauma or through normal biological processes can produce artifacts in immunophenotyping analysis by flow cytometry. Dead cells can nonspecifically bind monoclonal antibody conjugates, potentially leading to erroneous conclusions, particularly when cell frequencies are low. To date, DNA intercalating dyes (Ethidium monoazaide (EMA), Propidium Iodide, ... More
Phenotypic Screening with Human iPS Cell-Derived Cardiomyocytes: HTS-Compatible Assays for Interrogating Cardiac Hypertrophy.
Authors:Carlson C, Koonce C, Aoyama N, Einhorn S, Fiene S, Thompson A, Swanson B, Anson B, Kattman S,
Journal:
PubMed ID:24071917
'A major hurdle for cardiovascular disease researchers has been the lack of robust and physiologically relevant cell-based assays for drug discovery. Derivation of cardiomyocytes from human-induced pluripotent stem (iPS) cells at high purity, quality, and quantity enables the development of relevant models of human cardiac disease with source material that ... More
Anakinra treatment in patients with refractory inflammatory myopathies and possible predictive response biomarkers: a mechanistic study with 12 months follow-up.
Authors:Zong M, Dorph C, Dastmalchi M, Alexanderson H, Pieper J, Amoudruz P, Barbasso Helmers S, Nennesmo I, Malmström V, Lundberg IE,
Journal:Ann Rheum Dis
PubMed ID:23625983
'OBJECTIVE: To perform a mechanistic study on the effect of interleukin (IL)-1 blockade by anakinra in patients with refractory myositis and to explore possible predictive biomarkers. METHODS: Fifteen patients with refractory myositis were treated with anakinra for 12 months. Clinical response was assessed by the six-item core set measures of ... More
Blocking angiotensin-converting enzyme induces potent regulatory T cells and modulates TH1- and TH17-mediated autoimmunity.
Authors:Platten M, Youssef S, Hur EM, Ho PP, Han MH, Lanz TV, Phillips LK, Goldstein MJ, Bhat R, Raine CS, Sobel RA, Steinman L,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19706421
The renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) is a major regulator of blood pressure. The octapeptide angiotensin II (AII) is proteolytically processed from the decapeptide AI by angiotensin-converting enzyme (ACE), and then acts via angiotensin type 1 and type 2 receptors (AT1R and AT2R). Inhibitors of ACE and antagonists of the AT1R are ... More