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细胞凋亡的形态学和生物化学特征均与由损伤导致的细胞死亡 (坏死) 截然不同。 由于无法通过任何单一参数来准确界定细胞彻底死亡；因此，在研究凋亡事件及其时间关系时，多参数的方法往往很有优势。 两种Molecular Probes Vybrant凋亡分析试剂盒提供的试剂可利用紫色激光将凋亡细胞群与坏死细胞群区分开来。
凋亡是一种精细调控的细胞死亡过程，它是正常发育的一部分。 可以通过特征性的形态学和生物化学变化将其与坏死或偶然细胞死亡区分开来。 Vybrant凋亡分析试剂盒采用紫色可激发染料作为双色分析的一部分，用于检测细胞凋亡。
Pacific Blue™–膜联蛋白结合物可检测凋亡细胞膜不对称性的变化。 除膜不对称性变化外，还可利用染料 (如
PO-PRO™-1——亦包含在
Vybrant凋亡分析试剂盒#13 PO-PRO™-1/7-氨基放线菌素D内) 渗透性的轻微变化识别凋亡细胞。 与膜联蛋白结合物不同，PO-PRO™-1可对胰蛋白酶消化细胞和悬浮细胞进行高效染色。
- 利用紫色激光检测多个凋亡参数
- 提高了多重分析能力
- 可作为单独的试剂或者易于使用的试剂盒提供
紫色激光激发DNA染料用于凋亡检测。 使用10 μM喜树碱处理Jurkat细胞4小时，然后用Vybrant凋亡分析试剂盒#13 PO-PRO™-1/7-氨基放线菌素D中的试剂进行染色。在流式细胞仪上用405 nm和488 nm激发光对细胞进行分析。 Apoptotic cells (A) are clearly distinguished from live cells (L) and dead cells (D).
| 产品 | |
|---|---|
| 膜联蛋白V，Pacific Blue™标记物 | 产品详情 |
| Vybrant凋亡分析试剂盒#13 PO-PRO™-1/7-氨基放线菌素D | 产品详情 |
| Vybrant凋亡分析试剂盒#14 膜联蛋白V-Pacific Blue™ | 产品详情 |
CountBright™绝对计数微珠是经校准的微球悬液，能够在各种激发和发射波长下发出亮荧光 (紫外光至635 nm激发和385nm发射波长)。 将CountBright™绝对计数微珠与细胞样本混合，利用流式细胞仪进行分析。 通过比较微珠与细胞数量的比值，计算样本中的绝对细胞数。 由于是将CountBright™微珠加入检测样品，因此利用单平台法进行绝对细胞计数较多平台检测更简单且更准确。 CountBright™绝对计数微珠可用于多种细胞类型，包括未洗涤的裂解全血样品。
活细胞、死细胞和绝对细胞数量测定
采用530/30 nm带通滤光片采集的钙黄绿素荧光值与采用610/20 nm带通滤光片采集的乙啶同型二聚体-1荧光值的图上可以清楚地分辩出活细胞和死细胞以及计数微珠 (C36950)。 A mixture of live and heat-killed Jurkat cells (human T-cell leukemia) was treated with the reagents in the LIVE/DEAD Viability /Cytotoxicity Kit, counting beads were added, and the sample was analyzed by flow cytometry using 488 nm excitation.
紫色膜不对称性比率探针/死细胞凋亡检测试剂盒提供了一种利用紫色激光流式细胞仪简单高效地检测细胞凋亡的方法。 它用于贴壁细胞和悬浮细胞均可获得极佳的性能，且可与其他凋亡指示剂 (如caspase检测和线粒体膜电位改变) 相关联。
它含有紫色不对称性比率探针F2N12S，通过两种染料的发射光谱的相对强度变化，监测凋亡时膜不对称性的变化。 与膜联蛋白不同，该分析方法无需特殊的缓冲液或冲洗步骤，而且在对贴壁细胞分析时，它不易出现物理或化学清除步骤中常见的细胞膜损伤，从而可以提供更佳的数据质量。
它含有紫色不对称性比率探针F2N12S，通过两种染料的发射光谱的相对强度变化，监测凋亡时膜不对称性的变化。 与膜联蛋白不同，该分析方法无需特殊的缓冲液或冲洗步骤，而且在对贴壁细胞分析时，它不易出现物理或化学清除步骤中常见的细胞膜损伤，从而可以提供更佳的数据质量。
- 对胰蛋白酶消化细胞的准确凋亡分析
- 简单的5分钟染色实验方案
- 与其他蓝光激发凋亡染料可同时使用
| 紫色膜不对称性比率探针用于凋亡检测。 Jurkat细胞 (人T细胞白血病细胞) 用10 μM喜树碱处理4小时 (图B和图D) 或不处理 (图A和图C) 用作对照。 按照实验方案进行细胞染色。 在流式细胞仪上用405 nm激光激发，对F2N12S用585 nm和530 nm的滤光片过滤，对SYTOX AADvanced™死细胞染料用488 nm激发，用695 nm的滤光片过滤。 在图A和图B中，可通过F2N12S两种发射光的相对强度把活细胞从死细胞或凋亡细胞中区分开来。 图C和图D部分是SYTOX AADvanced™死细胞荧光染色对F2N12S的两种发射光 (585/530 nm) 的比值作图。 A = 凋亡细胞，L = 活细胞，D = 死细胞。 |
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