Qubit 2.0 荧光计

下一代核酸和蛋白质定量

准确灵敏的核酸和蛋白质定量要求在分析物特异性测定到分析仪器方面具有较高水平的性能。Qubit 2.0 荧光计是 Life Technologies 的第二代台式荧光计，可与我们的高选择性 Qubit DNA、RNA 和蛋白质测定无缝配合。它们共同构成了 Qubit 荧光定量平台，通过先进且成熟的荧光技术提供了前所未有的准确度和灵敏度。

Qubit 2.0 荧光计的新功能

Qubit 2.0 荧光计（图 1）可提供与原 Qubit (1.0) 荧光计相同的准确度，但速度更快，操作更简便。Qubit 2.0 荧光计的设计经过升级，坚固耐用，配备彩色触摸屏和直观的用户界面（图 2）。用于运行样品、校准标准品和查看结果的导航按钮可在屏幕底部持续访问，无需多个步骤，不会造成混淆。无需再使用“向上”或“向下”箭头逐个滚动选择 — Qubit 2.0 荧光计配有列表滚轮和滚动条，可进行清晰简单的细胞系选择。重要的是，所有功能均经过验证，可方便地与实验室环境中常戴的手套（如乳胶手套、丁腈手套）一起使用。

此外，Qubit 2.0 荧光计包括一项新的图表功能，可显示校准后的标准曲线，最多可显示 10 个数据点。样品数据以 .csv 文件格式自动储存，可随时通过导航至数据屏幕进行访问。存储的数据文件包含所有相关的样品信息，包括时间/日期标记、浓度读数、单位和测定类型，以及用于检测故障排除的原始荧光数据。内置稀释计算器允许用户快速确定样品含量，使用此计算器测定的浓度也会存储在数据文件中。此外，尽管每个 Qubit 测定功能都是预编程的默认单位读数，但 Qubit 2.0 荧光计允许用户根据自己的偏好更改单位输出。

为了更容易识别和分拣，可使用仪器的全字母数字键盘直接重命名数据文件。然后可以通过 USB 驱动器将数据传输至计算机，以进行更全面的分析—无论是仪器操作还是数据传输，都不需要与计算机直接连接。同样，也可以使用 USB 驱动器和从 www.invitrogen.com/qubit 下载的固件轻松进行任何升级。为方便起见，每个 Qubit 2.0 荧光计都配有一个 2 GB USB 驱动器，提供完整的仪器用户手册和所有 Qubit 测定操作程序的 .pdf 文件。

图 2.Qubit 2.0 荧光计的简单工作流程。

Qubit 检测试剂盒的卓越选择性

Qubit 2.0 荧光计结合 Qubit 检测试剂盒，可为常规分析以及罕见或难以获得的样品提供前所未有的准确性、灵敏度和简易性，从而实现分析物特异性定量。每个 Qubit 检测试剂盒的基础都是一种 Molecular Probes 染料，仅在与特定的靶分子结合时才会发出荧光信号，即使标靶浓度较低时也是如此。

Qubit DNA 和 RNA 测定法的最大优势在于其选择性。基于紫外吸光度的分析无法用于定量测定含两者混合物的样品中的 DNA 或 RNA。相比之下，Qubit DNA 和 RNA 检测试剂盒能够分别准确测量同一样品中的 DNA 和 RNA（图 3）。我们发现，使用 Qubit dsDNA BR（宽范围）检测试剂盒，可测量出 DNA 和 RNA 含量相等的样本中的 DNA 浓度，其误差不超过实际浓度的 2%。此外，在 RNA 含量比 DNA 含量多 10 倍的样品中，测量的 DNA 浓度仅比实际浓度高 7%。

同样，Qubit 蛋白测定法与其他基于吸光度和荧光的测定法相比，也具有蛋白质间变异性低、定量迅速、结果准确等优点。Qubit 蛋白测定法对多种常见污染物（包括还原剂、核酸和游离氨基酸）不敏感，最佳检测范围为 0.25–5 μg（样品起始浓度为 12.5 μg/mL–5 mg/mL）。

每个 Qubit 检测试剂盒均提供浓缩检测试剂、稀释缓冲液和预稀释标准品，所有检测试剂均在室温下储存。操作程序非常简单：只需使用提供的缓冲液对试剂进行稀释，加入您的样品（体积在 1 到 20 μL 之间），孵育 2 分钟后，使用 Qubit 2.0 荧光计读取浓度值（蛋白测定需要 15 分钟）。使用 Qubit 2.0 荧光计，所有检测设置和计算均可自动执行，Qubit 检测信号可稳定保持 3 小时。Qubit 检测试剂盒（以前称为 Q计仪和原始 Qubit (1.0) 荧光计兼容。

图 3. Qubit DNA 和 RNA 测定法与紫外光谱法的选择性比较。使用 Qubit DNA BR 和 Qubit RNA BR 检测试剂盒和 Qubit 荧光计，按照试剂盒的操作程序检测含有 lambda DNA (10 ng/μL) 和不同量的大肠杆菌核糖体 RNA (0–100 ng/μL) 的三份样品。随后使用 NanoDrop ND-1000 分光光度计对相同样品进行三份测量，并使用 PerkinElmer® Lambda 35 分光光度计进行单份测量。红色和橙色趋势线分别表示起始样品中 DNA 和 RNA 的实际浓度。数据表明，紫外分析无法区分 DNA 和 RNA。

Qubit 荧光定量平台：集成解决方案

Qubit 荧光定量平台是任何需要高精度下游应用的工作流程的重要组成部分。