HPLC-CAD 响应因子

CAD 反应中产生高背景电流的常见原因可能来自用于流动相制备的水中的杂质。

• MΩ ASTM D1193 定义的 1 型超纯水，可在 25 °C 下使用主要规格 18.2 M Ω -cm 或更高的电阻率，上限使用 50 ppb 总有机碳， 1 ppb 钠， 1 ppb 氯化物和 3 ppb 总二氧化硅。
  
  
• 如果您无法获得 1 级超纯水，则我们建议使用建议使用含低杂质的优质瓶装水，如 UHPLC-MS 级水。请记住，使用瓶装水通常比新鲜超纯水产生更高的背景电流和噪声水平。
  
  
• 另一种方法是不使用纯水，而是使用低比例有机溶剂 (如甲醇或乙腈) 的水，但请确保根据这一变化调整梯度曲线。

您的实验室玻璃器皿是非挥发性污染物的常见来源，包括随时间推移从玻璃中浸出的化学品，先前使用的遗留残留物或清洁剂中的化学品。

• 仅使用专用于 CAD 的玻璃器皿，包括流动相储液槽，烧杯，烧瓶和刻度量筒。
  
  
• CAD 是分析去污剂和表面活性剂的绝佳工具，因此我们推荐无去污剂的清洁剂，手动清洗 CAD 专用玻璃器皿或在清洗后或使用前特别注意冲洗玻璃器皿。
  
  
• 始终使用合适的溶剂冲洗您的玻璃器皿，然后用高纯度去离子水三重冲洗，然后在流动相溶剂含有溶剂混合物时使用流动相溶剂冲洗或较弱洗脱流动相溶剂冲洗。
  
  
• 在清洁后让玻璃器皿风干 (避免使用纸巾) ，并覆盖任何未使用的开放式玻璃器皿以防止灰尘进入。

当调整流动相溶液的 pH 值时，请记住 pH 电极储存在氯化钾浓缩溶液中。电极表面残留液滴可能会给流动相带来可测量量的非挥发性盐，并可能通过提高背景噪声对 CAD 性能产生不利影响。

• 使用超纯水彻底冲洗电极表面。
  
  
• 避免将 pH 电极浸入流动相，使用小等份试液测量 pH 值并在 pH 调节完成后丢弃。

EvapT 的变化可以提高探测器性能 (更高的 EvapT 可以降低噪声) ，并使半挥发性的响应更像非挥发性，从而改善响应 (更低的 EvapT)。

您还可以更改 EvapT ，以查看    在进行杂质和质量平衡研究时，哪些化合物行为是半挥发性物质，以及决定何时将标准自由定量方法用于替代标准品。

特定色谱分析方法的标准品质量会影响结果的准确性，并影响 CAD 的噪声和背景电流。商业标准品的纯度水平通常由一种可能会遗漏某些杂质的影响的分析技术确定。

• 检查标签或参阅检验报告，以了解有关纯度测定所用分析方法的更多信息。

标准品可吸收大气中的水分 (吸湿性) 或吸收大气中的水分，然后溶解形成液体 (潮解性)。制备用于校准研究的标准品时，这两种问题都存在。其他化合物在暴露于大气中时可能不稳定，或在溶解于溶剂中时降解。要解决这些问题：

• 购买少量标准品，最好装在一次性密封样品瓶中，或使用预称重的密封安瓿瓶进行标准制备。
  
  
• 将标准品存储在活性干燥剂上，并在必要时更换。
  
  
• 在日志中记录您购买标准品的日期，打开时和每次使用后。
  
  
• 设置适当的到期日期，并在过期时更换。

当前版本的 CAD 与高达 2.0 mL/min 的流速和所有常用分析柱格式兼容。您应选择稳定的色谱柱，不含与方法温度和在水相条件附近的 pH 值要求兼容的流失。柱流失可引入半挥发性和非挥发性杂质，并可能提供更高的噪声和背景电流。

• 众所周知，某些色谱柱像硅胶，硅胶基质氨基和氰基；在可能时避免这些模式。
  
  
• 使用可提供良好分离度的最低色谱柱温度，有助于防止色谱柱流失。