偶联一抗 | Thermo Fisher Scientific

什么是直标一抗？

直标一抗是经过化学修饰的抗体，可以偶联标记物，例如荧光染料或酶。这些直标一抗通过直接与其靶标结合简化检测，从而实现生物样本中特定靶分子的可视化或检测。使用偶联一抗具有多种优势，包括缩短测定时间、提高特异性、减少背景噪音、易于使用、高度多重标记以及在不同样品中使用的便利性。直标一抗可用于多个平台和各种应用，如流式细胞术、免疫组织化学、蛋白质印迹和免疫细胞化学。

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直接检测法与间接检测法

有两种类型的检测方法可用于一抗 — 直接法和间接法。直接检测利用与标记（即荧光标记）结合的一抗“直接”检测靶标，而无需使用二抗。此方法快速且简单。直接检测是一种快速、一步式过程，非常适合高通量和多重测定。间接检测是利用与标记物偶联的二抗与未标记的一抗结合，从而对目标进行“间接”检测（图1 ）。在下表中详细了解直接与间接检测方法。

图1。直接检测法与间接检测法的示意图。 直接检测涉及与一抗偶联的荧光标记，该一抗可结合目标靶标。间接检测涉及使用未偶联的一抗与目标靶标结合来检测靶标，然后再与带有荧光标记的二抗结合来检测目标物。

直接检测法与间接检测的示意图


	直接检测法	间接检测法
介绍	一抗直接与荧光染料结合，无需二抗	使用偶联了荧光染料的二抗与未标记的一抗结合
多重测定	高度多色染色的能力取决于检测系统可以识别的荧光团数量	受限于各个种属的一抗可用性，通常仅限于一个种属
背景	无需使用二抗，显着降低背景噪音	非特异性结合可能会增加二抗交叉反应引起的背景噪音
便利性	无需额外的二抗孵育步骤，从而缩短了测定时间	二抗结合所需的额外时间和步骤

用于 IHC 的直标一抗

荧光标记是一种高度通用的免疫组织化学 (IHC) 方法，能够同时检测大量靶标，并提高了灵敏度和特异性。用于 IHC 的直标一抗提供创新的多重染色技术，简化的工作流程和更省时的组织标记方案。

直标一抗为研究人员提供了了解组织内单个细胞的空间组织、功能和行为的能力，从而改变了空间生物学领域。这种对单细胞的分析可以深入了解：

细胞类型、细胞状态和细胞功能
细胞间相互作用
细胞通信
细胞环境
组织微环境和架构

Thermo Fisher Scientific 为 IHC 和空间生物学提供高质量、易于选择且易于使用的直标一抗，旨在实现详细的细胞分析和组织成像。我们的直标一抗已在各种组织类型中进行了验证，并通过二抗 IHC 标记得到确认。这些直标一抗有多种荧光染料可供选择，包括 Alexa Fluor 和 Alexa Fluor PLUS，可实现便捷的单步标记方法。直标一抗使研究人员能够在一次染色混合物上实现 8-10 个生物靶标的多重标记（图2）。

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图2。用直标一抗染色 FFPE 正常人扁桃体 (A) 和扁桃体淋巴瘤 (B)。 利用这种先进的9重技术，可以看到淋巴瘤组织中 CD138（骨髓瘤、淋巴瘤中的肿瘤标志物）、FoxP3（免疫抑制 T 调节细胞）和其他生物学相关标志物的增强表达，从而可以绘制肿瘤微环境图。

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