在分子生物学实验中,核酸的稳定性和完整性至关重要。无论是 DNA 还是 RNA,它们都极易受到环境因素(如 pH 值、金属离子和核酸酶)的影响,从而导致降解或失活。为了确保核酸样品在储存和操作过程中的稳定性,研究人员广泛使用 TE 缓冲液(Tris-EDTA 缓冲液),这是一种专为核酸重悬和长期保存而设计的缓冲体系。

赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)提供高质量的 TE 缓冲液(pH 8.0, RNase-free),以满足科研人员对核酸保护的高标准需求。我们的TE缓冲液产品不仅具有出色的稳定性和兼容性,还经过严格的质量控制,确保无 RNase 污染,适用于从基础研究到高通量测序等多种应用场景。

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TE缓冲液是什么?

TE缓冲液是一种分子生物学中极其常用的缓冲溶液,其主要成分是Tris(提供弱碱性环境)和EDTA(用于螯合金属离子)。它的核心作用是溶解、稀释和稳定储存DNA。其中的弱碱性环境有利于维持DNA的稳定性,而EDTA则通过结合溶液中的二价金属离子(特别是镁离子),有效抑制DNA降解酶(DNase)的活性,从而保护DNA不被降解。因此,TE缓冲液是保存核酸样本和进行后续分子生物学实验(如酶切、PCR、测序等)的理想溶剂,能最大程度地保护DNA的完整性,比单纯用水更安全可靠。


TE缓冲液配制方法及作用

TE缓冲液配制方法

要配制TE缓冲液,通常是将特定量的Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)溶解在水中,然后使用盐酸(HCl) 调节溶液的pH值至弱碱性范围。接着加入所需的EDTA(乙二胺四乙酸二钠盐),并确保其完全溶解。最后,用纯水将溶液定容到目标体积。配制好的TE缓冲液一般需要经过高温高压灭菌处理,以消除可能存在的DNA降解酶(DNase),确保其适合储存核酸。

TE缓冲液作用

TE缓冲液的核心作用是为溶解、稀释和长期稳定储存DNA提供理想的环境。其中,Tris成分维持溶液的弱碱性状态,这最有利于保持DNA的结构稳定性和溶解性。而EDTA成分则通过强力螯合溶液中的二价金属离子(尤其是镁离子Mg²⁺),有效抑制依赖这些离子发挥活性的DNA降解酶(DNase) ,从而防止DNA被酶解破坏。因此,TE缓冲液是分子生物学实验中保存核酸样本(如质粒DNA、基因组DNA、PCR产物等)以及进行后续操作(如酶切、PCR、测序等)的常用溶剂,能最大程度地保护DNA的完整性。


为什么选择 TE 缓冲液?

1. 稳定核酸结构

TE 缓冲液由 Tris-HCl(pH 8.0) 和 EDTA(乙二胺四乙酸) 组成:

  • Tris 提供稳定的 pH 环境,防止核酸因酸碱变化而发生水解。
  • EDTA 是一种强效的金属离子螯合剂,能有效抑制依赖于 Mg²⁺ 的核酸酶活性,从而防止 DNA 或 RNA 被降解。
  • TE缓冲液的配制方法,试剂量:1M Tris-Cl(pH 8.0)1 mL 10mM、0.5M EDTA(pH 8.0)0.2 mL 1mM、蒸馏水98.8 mL。
  • TE缓冲液配置过程:
    1. 量取1 mL 1M Tris-Cl(pH 8.0)并加至100 mL Duran瓶中。
    2. 量取0.2 mL 0.5M EDTA(pH 8.0)并加至Duran瓶中。
    3. 通过添加98.8 mL蒸馏水将溶液加至100 mL。
    4. 将盖子盖在瓶子上,翻转几次以混合。
    5. 要灭菌,请在液体循环中高压灭菌溶液(在15 psi下20分钟)。
    6. 将TE缓冲液保存在室温下(+ 15℃ – + 25℃)。

    2. 广泛的应用场景

    TE 缓冲液广泛用于以下实验流程:

    • 核酸提取后的重悬
    • 长期储存 DNA/RNA
    • PCR、qPCR、NGS 文库构建等下游分析前的样品准备

    3. 安全与纯净

    赛默飞提供的 TE 缓冲液经过严格的灭菌处理,并确保无 RNase、DNase 活性污染,避免外源性核酸酶对样品造成破坏。


    赛默飞 TE 缓冲液产品介绍

    TE缓冲液, pH 8.0, RNase-free

    • 货号:AM9849
    • 规格:500 mL
    • pH 值:8.0
    • 成分:10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
    • 适用对象:DNA 和 RNA
    • 特点:
      1. 即用型溶液,无需额外配制
      2. 无 RNase/DNase 污染
      3. 适用于自动化核酸提取系统(如 Thermo Scientific KingFisher 系列)
      4. 可用于 Sanger 测序、实时荧光定量 PCR(qPCR)、二代测序(NGS)等高灵敏度实验

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    TE缓冲液, pH 8.0, 无菌过滤

    • 货号:AM9858
    • 规格:1 L
    • pH 值:8.0
    • 成分:10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA
    • 特点:
      1. o通过 0.2 μm 滤膜过滤除菌
      2. o适合大规模实验和自动化平台使用
      3. o保证批次间一致性,减少实验变量干扰

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    如何正确使用 TE 缓冲液进行核酸保存?

    推荐操作步骤:

    1. 核酸洗脱:将提取后的 DNA 或 RNA 溶解于适量 TE 缓冲液中(通常 50–100 μL)。
    2. 储存条件
      • 短期保存(几天至一周):4°C
      • 长期保存(数月以上):-20°C
    3. 避免反复冻融:建议分装使用,减少温度波动对核酸结构的影响。

    ⚠️ 注意事项:对于某些下游应用(如限制性内切酶反应),需注意 EDTA 可能影响酶活性,必要时可使用不含 EDTA 的缓冲液(如 Tris-HCl)进行洗脱。


      使用TE缓冲液进行核酸保存成功案例支持

      在多个研究中,TE 缓冲液被证实是核酸保存的理想选择。例如,在 RAPD(随机扩增多态性 DNA)实验中,TE 缓冲液的浓度和 pH 值对扩增结果有显著影响,证明其在维持 DNA 结构完整性方面的重要性(参考文献)。

      此外,赛默飞 TE 缓冲液已被广泛应用于基因组学、转录组学和表观遗传学研究中,包括:

      • qPCR 实验:确保模板 DNA 的稳定性,提高扩增效率
      • NGS 文库构建:作为文库稀释和保存的标准缓冲液
      • CRISPR-Cas9 基因编辑:用于 sgRNA 和 Cas9 蛋白复合物的稀释与保存

      为何选择赛默飞?

      作为全球领先的科学服务供应商,赛默飞始终致力于为生命科学研究提供可靠、高效的解决方案。我们的 TE 缓冲液具备以下优势:

      • 高品质保障:严格质控,确保无核酸酶污染
      • 即用型配方:节省实验时间,提升工作效率
      • 广泛兼容性:适用于多种核酸提取与分析平台
      • 技术支持:专业的售前售后团队提供定制化建议和服务

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      仅供科研使用,不可用于诊断目的。