赛默飞 TRIzol™ 试剂：RNA 提取的黄金标准。

高效、可靠，适用于多种生物样本的 RNA 提取解决方案

在分子生物学研究中，高质量 RNA 的提取是许多实验成功的关键。无论是基因表达分析、qPCR、Northern blot 还是 RNA 测序，都需要稳定且无降解的 RNA 样本。赛默飞世尔科技（Thermo Fisher Scientific）推出的 TRIzol™ 试剂（货号：15596018CN），作为全球科研人员广泛使用的 RNA 提取试剂，凭借其卓越的裂解能力和高效的 RNA 回收率，已成为 RNA 提取领域的“黄金标准”。

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科研挑战：RNA 提取为何如此重要？

RNA 是一种极其敏感的分子，极易受到 RNase 的降解。传统的 RNA 提取方法往往需要多个步骤，包括细胞裂解、去蛋白化、RNA 沉淀和洗涤等，每一步都可能影响最终 RNA 的质量和完整性。此外，不同类型的样本（如组织、血液、植物材料等）对裂解条件和纯化流程的要求也各不相同，增加了操作难度。

因此，研究人员亟需一种能够从各种复杂样本中快速、高效提取高质量 RNA 的解决方案。

TRIzol法提取RNA的原理

TRIzol（或类似试剂如TRI Reagent）是一种常用的酚-胍-异硫氰酸胍（phenol-guanidine isothiocyanate）混合物，用于从细胞或组织中高效提取总RNA，同时也可分离DNA和蛋白质。

TRIzol提取RNA的原理

细胞裂解与变性

异硫氰酸胍（Guanidine Isothiocyanate）：强烈变性剂，破坏细胞膜和核膜，释放RNA。

抑制RNase（RNA酶），防止RNA降解。

苯酚（Phenol）：使蛋白质变性并沉淀，同时溶解脂质。在酸性条件下（pH 4.5），RNA进入水相，DNA和蛋白质进入有机相或界面层。

相分离（氯仿作用）

加入氯仿或者BCP后，溶液分为3层：

  • 上层（水相）：含RNA（溶于水）。
  • 中间层（界面）：含DNA和变性蛋白质。
  • 下层（有机相）：含脂质、蛋白质和苯酚。

RNA沉淀（异丙醇作用）

异丙醇使RNA从水相中沉淀出来（RNA不溶于高浓度醇）。离心后RNA形成白色沉淀。

RNA洗涤（乙醇作用）

75%乙醇去除残留盐分和杂质，提高RNA纯度。

RNA溶解（DEPC水或RNase-free水）

最终溶解RNA，避免RNase污染。

TRIzol法提取RNA的步骤

TRIzol提取RNA的详细步骤

实验前准备

试剂：TRIzol、氯仿、异丙醇、75%乙醇（DEPC水配制）、RNase-free水。

耗材：无RNase的EP管、枪头、离心机、冰盒。

样本：细胞（1×10⁶~1×10⁷）或组织（50~100 mg）。

操作步骤

  1. 样本裂解

    2. 细胞：离心收集细胞，直接加1 mL TRIzol，吹打混匀。

    组织：每50-100 mg组织液氮研磨后加1 mL TRIzol，匀浆（冰上操作）。

    静置5 min（充分裂解）。

  2. 加入氯仿或BCP（相分离）

    3. 每1 mL TRIzol加 0.2 mL 氯仿或BCP，剧烈震荡15 sec（乳白色混匀）。

    冰上静置5 min，然后 4℃ 12,000g 离心15 min。

  3. 分离水相（RNA层）

    离心后分3层：

    • 上层（无色水相）：RNA（小心吸取，避免触碰中间层）。
    • 中间层（白色）：DNA和蛋白质（弃去）。
    • 下层（红色有机相）：脂质、蛋白（弃去）。
  4. RNA沉淀

    5. 取上清（约400 μL），加入等体积异丙醇（0.5 mL），混匀。

    -20℃ 静置10 min（或室温5 min），然后 4℃ 12,000g 离心10 min。

    弃上清，可见管底 白色RNA沉淀。

  5. RNA洗涤

    6. 加 1 mL 75%乙醇（DEPC水配制），轻轻颠倒洗涤。

    4℃ 7,500g 离心5 min，弃上清。

    短暂离心，吸尽残留乙醇，室温晾干（5-10 min，勿过干）。

  6. RNA溶解

    7. 加 20-50 μL RNase-free水，轻弹溶解。

    测浓度（Nanodrop），-80℃保存。

赛默飞 TRIzol™ 试剂：一站式TRIzol法提取RNA解决方案

TRIzol™ 试剂产品概述

TRIzol™ 试剂是一种即用型单相溶液，能够在短短一小时内从人、动物、植物、酵母菌或细菌等多种来源的细胞和组织样本中同时分离 RNA、DNA 和蛋白质。其核心成分包含苯酚和异硫氰酸胍，可有效裂解细胞并抑制 RNase 活性，从而确保 RNA 的完整性。

为什么选择 TRIzol™ 试剂？

TRIzol™ 试剂三大核心优势

  1. 广泛的样本适用性

    TRIzol™ 试剂已针对多种样本类型进行了配方优化，包括：

    • 动物组织（如肝脏、脑组织、心脏）
    • 植物材料（如叶片、根茎）
    • 微生物（如大肠杆菌、酵母）
    • 血液、血清、病毒样本
    • 培养细胞（贴壁或悬浮）

    即使是难以处理的高脂、高蛋白或富含多糖的样本（如脂肪组织、植物根系），TRIzol™ 也能提供稳定的 RNA 提取效果。

  2. 高效裂解与 RNA 保护

    苯酚与异硫氰酸胍协同作用，迅速裂解细胞膜并释放 RNA，同时抑制 RNase 活性，防止 RNA 降解。均质化后加入氯仿，样本会分层为透明水相（含 RNA）、中间相（DNA）和有机相（蛋白质），便于后续分别沉淀回收。

  3. 灵活的下游应用兼容性

    使用 TRIzol™ 提取的 RNA 可直接用于以下实验：

    • 实时荧光定量 PCR (qPCR)
    • 逆转录 PCR (RT-PCR)
    • Northern blot
    • RNA 测序 (RNA-seq)
    • cDNA 文库构建
    • 核酸酶保护测定

TRIzol™ 试剂的技术亮点

特性描述
样本量范围组织 ≤1 g，细胞 ≤1×10⁷
纯化时间<1 小时
RNA 质量A₂₆₀/A₂₈₀ ≥1.8，A₂₆₀/A₂₃₀ ≥2.0
储存条件室温（15–30°C）
运输条件常温运输
包装规格200 mL（15596018CN）或 100 mL（15596026CN）

TRIzol法提取RNA成功案例与文献支持

TRIzol™ 试剂已被广泛应用于各类科研领域，并被众多高水平期刊引用，以下是几个代表性研究案例：

  1. 小鼠脑组织 RNA 提取

    在《BIO-PROTOCOL》发表的研究中，研究人员使用 TRIzol™ 法从小鼠脑组织中提取 RNA，获得了高质量的 RNA 样本，适用于 qPCR 和 RNA-seq 分析。

  2. 植物 RNA 提取比较研究

    云南大学的研究团队对比了四种榕树 RNA 提取方法，发现 TRIzol™ 法在提取效率和 RNA 完整性方面表现最优，尤其适用于富含多糖的植物组织。

  3. 病毒 RNA 提取

    在一项关于伪狂犬病病毒的研究中，研究人员使用 TRIzol™ 试剂成功提取病毒 RNA，用于后续的 RT-qPCR 分析，验证了其在病毒检测中的可靠性。

如何正确使用 TRIzol™ 试剂？

完整的操作流程如下（详细步骤请参考用户指南）：

  1. 样本裂解：将组织或细胞加入 TRIzol™ 试剂中，充分匀浆。
  2. 相分离：加入氯仿，剧烈震荡后离心，形成三层。
  3. RNA 沉淀：取上层水相，加入异丙醇沉淀 RNA。
  4. 洗涤与重悬：75% 乙醇洗涤 RNA 沉淀，晾干后溶解于 RNase-free 水中。

赛默飞提供的完整 RNA 研究解决方案

除了 TRIzol™ 试剂，赛默飞还提供一系列配套产品和服务，助力您的 RNA 研究：

让 TRIzol™ 成为您 RNA 提取的首选工具

TRIzol™ 试剂凭借其强大的裂解能力、广泛的样本适应性和优异的 RNA 质量，已成为全球科研实验室的标准工具。无论您是从事基础研究、临床诊断还是农业生物技术开发，TRIzol™ 都能为您提供稳定可靠的 RNA 提取保障。

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仅供科研使用，不可用于诊断目的。