BigDye Terminator循环测序试剂盒

BigDye Terminator Plus与BigDye Terminator v3.1试剂盒均使用相同的荧光染料（Z 染料组 v3.1）连接在双脱氧核糖核苷酸上，并且两者具有相似的dNTP/ddNTP比值。

相比之下，BigDye Terminator v1.1循环测序试剂盒使用了不同的染料组（E 染料组 v1.1），且与 BigDye Terminator Plus和BigDye Terminator v3.1试剂盒相比，其dNTP/ddNTP比值也不同。

从性能角度来看，BigDye Terminator v1.1 试剂盒通常用于提高靠近引物区域（5′ 端）的序列分辨率，尤其是在配合POP-6聚合物使用时效果更佳。

BigDye Terminator Plus和 BigDye Terminator v3.1试剂盒通常更适合较大的模板，能够提供更好的5′ 端至 3′端信号均衡性和更长的读长。

此外，当BigDye Terminator Plus试剂盒与POP-7聚合物以及 BigDye Hi-Res M13引物配合使用时，能够在 M13引发位点下游的最初几个碱基范围内提供卓越的5′端分辨率及高质量的碱基识别。

BigDye Terminator Plus旨在提供高质量的测序结果，同时保持与标准Sanger测序工作流程的一致性。直接升级，无需更改实验方案、仪器或分析方法。

当需要在多种模板类型（包括富含GC的序列或具有二级结构的模板等具有挑战性的区域）上获得高质量测序结果时，BigDye Terminator Plus是理想之选。它既保持了标准Sanger测序通常所能达到的长读长，又能在困难的序列环境中提供更稳健的性能。

BigDye Terminator Plus支持灵活的反应设置，包括在适当情况下采用减少的反应体积，同时保持稳定的测序性能。

在适当情况下，它还可用于针对速度进行优化的循环测序方案，包括采用更短的延伸时间。

HiRes引物与标准M13引物具有相同的核苷酸序列，但包含一种可提高5′端分辨率的化学修饰。这种修饰能够提升引物结合位点下游最初几个碱基的碱基识别质量，而标准引物在这些区域通常分辨率会降低。该修饰为专有技术。

标准M13引物仍与 BigDye Terminator Plus完全兼容，并能为大多数应用提供可靠的性能。当需要改善5′端序列分辨率时，则使用HiRes引物。

使用BigDye M13 HiRes引物时，推荐使用BDTv3direct.mob迁移率文件（例如KB_3600_SeqStudioFlex_POP7_BDTv3direct.mob，具体取决于仪器和设置）。此迁移率文件专门针对 HiRes 引物进行了优化。

虽然标准的 BDTv3.mob文件也兼容，但使用 BDTv3direct.mob文件可提供改善的峰间距和更准确的碱基比对，尤其是在序列起始端。这将增强引物后起始几个碱基的分辨率，并提高整体数据质量。

无需对测序工作流程进行任何更改。用户可继续沿用标准条件，只需在孔板设置或数据分析过程中选择相应的迁移率文件即可获得最佳结果。