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所有Coomassie蛋白质染色剂试剂都会形成染色剂-染色剂聚集物,Imperial蛋白质染色剂含有可减慢聚集物形成速度的添加剂。如果不加以干涉,试剂会形成可见的聚集物并在瓶中沉淀;但是,轻轻混合可使这些聚集物完全散开。为了确保使用均匀分散的样品,应在倒出或配制试剂前将其轻轻混合。
以下是可能原因和解决方案: - 样品中无蛋白质:使用一个已知含量的纯蛋白质作为对照 - 样品中的蛋白质含量不足:增加总蛋白上样量 - 未将SDS从凝胶上完全去除:开始染色前,更彻底地洗涤凝胶
这最有可能是因为SDS的干扰。我们建议在开始染色前,彻底洗涤凝胶。
兼容,点击这里查看如何处理经Imperial染料染色的凝胶以用于质谱分析。
使用增强实验方案, Imperial蛋白质染料可在3小时内检测出少于3ng的蛋白条带。