HisPur™ Ni-NTA Superflow 琼脂糖
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Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持相,带有二价镍电荷 (Ni+2),可专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。

HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖的特点:

高容量— 在 300 cm/小时线性流速下,每 mL 树脂可结合超过 20 mg His 标签 GFP
高纯度— 用于对裂解物进行纯化时,洗脱组分的纯度可达 80% 以上
通用— 可用于在天然或变性条件下纯化蛋白
稳健— 高度交联的微珠,可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速
兼容— 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性
高性价比— 价格极具竞争力的树脂,经多次清洗和重复利用后仍保持稳定

HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂,在中等规模或大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学剂和 pH 值环境下均保持稳定,适用于常见的原位清洁流程。与固定化金属亲和色谱 (IMAC) 所使用的钴及其他配体相比,镍对 His 标签蛋白具有更高的纯化能力。HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖在一系列的流速下都表现出较高的动态结合容量,因此是大型纯化作业的极佳之选。

应用:
•对多聚组氨酸标签蛋白进行中等规模至大规模 FPLC 纯化

亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。在这类纯化方法中,有一种是将多聚组氨酸标签结合到二价金属阳离子上,此金属阳离子则是由固定在磁珠支持相上的螯合剂进行协调。当对 His 标签蛋白进行固定化金属亲和色谱 (IMAC) 纯化时,微珠、螯合剂以及固定金属的类型将会影响这些纯化操作的纯度、得率以及流速性能。

HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持物,带有二价镍电荷 (Ni+2),专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。若要验证树脂的性能,请在 100 L 反应体系内过度表达 6xHis-GFP,然后分段收集细胞团块。使用 2 L 补充 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂(产品编号:78439)的裂解缓冲液对一部分生物体团块 (240 g) 进行裂解。净化裂解产物,然后将其分为两份。然后,在两个等效的 200 mL 微珠填充柱中,分别使用 HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖以及一种主要竞争者树脂对靶蛋白进行纯化。两种树脂的总得率、回收率以及纯度 (>80%) 均非常接近,在不到 3 个小时的时间内纯化了 4 克以上的靶蛋白。

更多产品数据
HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖的性能表征

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HisPur™ Ni-NTA 树脂
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
色谱柱类型亲和,琼脂糖树脂
产品规格瓶装
数量50 mL
固定相二价镍、金属螯合物
靶标His 标签蛋白
容量(公制)结合 20 mg His 标签 GFP/mL 树脂
形式悬浮液
产品线HisPur™
类型琼脂糖
Unit SizeEach
内容与储存
在 4°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

What is the difference between HisPur Nickel Resin and HisPur Cobalt Resin?

Nickel has a higher affinity for histidines than does cobalt. It binds multiple histidines more tightly than cobalt, and requires more stringent conditions than is necessary for cobalt. The lower affinity of cobalt for multiple histidines typically results in less nonspecific binding of histidine-rich proteins that lack a his-tag compared to nickel resins.

HisPur Ni-NTA resin has a high capacity of up to 60 mg of 6xHis-tagged protein per milliliter. It is a versatile resin that can work under both native and denaturing conditions, and can also be used with a variety of lysis reagents and buffer additives.

HisPur Cobalt resin utilizes proprietary tetradentate chelating resin charged with cobalt. This system recovers highly purified protein with lower imidazole concentrations and has low metal leeching properties.

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