细胞裂解缓冲液
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细胞裂解缓冲液
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细胞裂解缓冲液

细胞裂解缓冲液是一种用于 ELISA 和 Western 印迹应用的即用型裂解缓冲液,用于从哺乳动物细胞中提取总蛋白。该缓冲液使用基于去污剂的裂解方式,无需机械性细胞破碎,在从细胞培养物中分离蛋白时提供更温和且更简便的替代方法。该制剂有助于保留酶检测或免疫检测所需的蛋白结构和功能。缓冲液配方:10 mM Tris了解更多信息
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FNN0011100 ml
货号 FNN0011
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细胞裂解缓冲液是一种用于 ELISA 和 Western 印迹应用的即用型裂解缓冲液,用于从哺乳动物细胞中提取总蛋白。该缓冲液使用基于去污剂的裂解方式,无需机械性细胞破碎,在从细胞培养物中分离蛋白时提供更温和且更简便的替代方法。该制剂有助于保留酶检测或免疫检测所需的蛋白结构和功能。

缓冲液配方:10 mM Tris(pH 值 7.4)、100 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM EGTA、1 mM NaF、20 mM Na4P2O7
2 mM Na3VO4、1% Triton X-100、10% 甘油、0.1% SDS、0.5% 去氧胆酸盐

该细胞提取缓冲液不含蛋白酶抑制剂,应在即将使用前补充 1 mM PMSF 和蛋白酶抑制剂混合物

查看所有可用的 ELISA 裂解缓冲液和试剂
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)Western 印迹、ELISA 用样品制备
产品类型细胞提取缓冲液
数量100 ml
运输条件干冰
Unit SizeEach
内容与储存
在冰箱(-5 至 -30°C)中储存。

常见问题解答 (FAQ)

在我的 ProcartaPlex 检测数据分析过程中,我收到一条警告消息,指出存在高度聚集的珠子。我应该怎么办?

以下是此问题的可能原因和解决方案:
o 检查协议设置(确保选择正确的 DD 设置)。
o 检查鞘液液位并清空废液。
o 在获取板之前,在 Luminex 仪器上运行校准和验证珠。

在我的 ProcartaPlex 检测数据分析期间,珠子落在珠子图上珠子区域的下方或左下方。为什么是这样?

以下是可能的原因和问题的解决方案:

•这通常表明微珠已经光漂白。这个问题也可能由于将微珠暴露于有机溶剂中引起。不幸的是,必须重复该检测,因为微珠不能恢复。必须保护珠子免受光和有机溶剂的影响。
•或者,仪器可能在其测量中关闭,或者可能存在校准问题。致电制造商进行服务预约。

在我的 ProcartaPlex 检测数据分析期间,珠子没有出现在门控区域中。发生了什么?

这表示最后一步使用了不正确的缓冲液。必须使用试剂盒中提供的洗涤液洗涤微珠并在微珠上样至Luminex仪器之前将其重悬。溶液的渗透压将影响微珠的尺寸,而微珠尺寸的任何变化都将改变仪器的检测。

我所有的 ProcartaPlex 检测孔的珠数都不稳定。什么地方出了错?

以下是一些建议:
o 在获取板之前,在 Luminex 仪器上运行校准和验证珠。
o 查看仪器设置并确保它们适合正在运行的检测(调整针高,确保选择正确的珠门和正确的 DD 设置)。
o 在仪器上采集前摇动板以重新悬浮珠子。
o 将珠子涡旋 30 秒,然后再将它们添加到板中。
o 清洗:在清空板之前,不要忘记将板放在手持式磁性洗板机上约 2 分钟。

我的 ProcartaPlex 检测标准曲线的微珠计数正确且规则,但对于我的样品,微珠计数不稳定,我收到一条警告消息,提示“采集中至少有一个区域未达到最大计数”。我应该怎么办?

这种模式表明样本基质效应。以下是一些建议:
o 确认样品已澄清且不含碎片和脂质(建议离心 5-10 分钟)。
o 确认血清、血浆样品的样品与测定稀释剂的比例至少为 1:1。对于细胞裂解物或组织匀浆,确认样品已在测定缓冲液中适当稀释,以将裂解缓冲液中的去污剂浓度降低至≤0.01%。对于其他样品类型,可能需要进一步的样品优化。

引用和文献 (6)

引用和文献
Abstract
Imaging EGFR phosphorylation in intact human pancreatic carcinoma cells.
Authors:Magdeburg R, Kessler M, Boenninghoff R, Keese M,
Journal:In Vivo
PubMed ID:22773576
'Carcinoma of the pancreatic duct is a highly malignant tumor characterized by aggressive and early metastastatic growth. A high rate of tumor recurrence after surgical resection and the lack of effective chemotherapeutic approaches result in low 5-year survival rates. Overexpression of epidermal growth factor (EGF) and its receptor have been ... More
Induction of apoptosis pathways in several cell lines following exposure to the marine algal toxin azaspiracid.
Authors:Twiner MJ, Hanagriff JC, Butler S, Madhkoor AK, Doucette GJ,
Journal:Chem Res Toxicol
PubMed ID:22725096
'Azaspiracids (AZAs) are polyether marine dinoflagellate toxins that accumulate in shellfish and represent an emerging human health risk. Although there have been no deaths associated with the AZA toxins, humans exposed to AZAs experience severe gastrointestinal symptoms. This toxin class has been shown to be highly cytotoxic, a teratogen to ... More
Subtoxic levels hydrogen peroxide-induced production of interleukin-6 by retinal pigment epithelial cells.
Authors:Wu WC, Hu DN, Gao HX, Chen M, Wang D, Rosen R, McCormick SA
Journal:Mol Vis
PubMed ID:21031020
To study the effect of subtoxic levels of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) on the expression and release of interleukin-6 (IL-6) by cultured retinal pigment epithelial (RPE) cells and to explore the relevant signal pathways. ... More
Interleukin-1beta increases baseline expression and secretion of interleukin-6 by human uveal melanocytes in vitro via the p38 MAPK/NF-kappaB pathway.
Authors:Hu DN, Chen M, Zhang DY, Ye F, McCormick SA, Chan CC
Journal:Invest Ophthalmol Vis Sci
PubMed ID:21398280
Melanocyte is the major cell component in the uvea. Interleukin (IL)-6 is a proinflammatory cytokine. The authors studied the expression of IL-6 in cultured human uveal melanocytes (UMs) and their modulation by IL-1ß and explored the relevant signal pathways. ... More
Twist modulates human trophoblastic cell invasion via regulation of N-cadherin.
Authors:Ng YH, Zhu H, Leung PC
Journal:Endocrinology
PubMed ID:22166980
The invasion of extravillous cytotrophoblasts (EVT) into the underlying maternal tissues and vasculature is a key step in human placentation. The molecular mechanisms involved in the development of the invasive phenotype of EVT include many that were first discovered for their role in cancer cell metastasis. Previous studies have demonstrated ... More