pYES2.1 TOPO™ TA 酵母菌表达试剂盒

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中，因为极端温度会损害细胞。另外，装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度，从而发生破裂。

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度，即使存储时间很短，也会显著降低其转化效率。

以下是用于培养Pichia pastoris和S. cerevisia的营养丰富型和基本培养基：

营养丰富型培养基：

适用于S. cerevisiae和Pichia pastoris
•YPD（YEPD）：酵母提取物、蛋白胨和葡聚糖
•YPDS：酵母提取物、蛋白胨、葡聚糖和山梨醇

仅适用于Pichia pastoris
•BMGY：缓冲型甘油复合培养基
•BMMY：缓冲型甲醇复合培养基

基本培养基（又名缺陷型培养基）：

适用于S. cerevisiae
•SC（SD）：完全合成培养基（YNB、葡聚糖（或棉籽糖或半乳糖）以及氨基酸）

适用于Pichia pastoris

•MGY：基本甘油培养基
•MD：基本葡聚糖培养基
•MM：基本甲醇培养基
•BMGH：缓冲型基本甘油培养基
•BMMH：缓冲型基本甲醇培养基

当α因子基因中的P因子被替换为α时，S. pombe不能生成P因子。但是，当P因子基因中的α因子被替换为P时，S. pombe能够生成α因子。有反面证据表明，S. pombe能够加工其自身的交配因子切割位点，但并不是S. cerevisiae α因子的所有切割位点。最好使用一个更通用的信号序列（而不是前导信号序列，如α）。如果必须走前导路线，最好使用S. pombe的P因子前导而不是S. cerevisiae的α前导。

是的，我们提供pYES2.1/V5-His-TOPO载体，它是pYES2.1 TA表达试剂盒（货号K415001）的一部分，可将Taq聚合酶扩增的PCR产物直接克隆到Saccharomyces cerevisiae中并利用半乳糖调控其表达。