PVDF/滤纸三明治，0.2 μm，8.3 x 7.3 cm

最可能导致旋涡状图案的原因是膜在染色液中绕圈移动。使用定轨摇床会产生这种效果。为了避免出现这种背景图案，我们建议使用摇臂式摇床或结合摇臂和往复动作的摇床，以确保膜在染色液中均匀晃动。

以下是可能原因和解决方案：

- 转印前对膜的处理不当：应确保使用甲醇或乙醇等极性有机溶剂润湿膜。
- 凝胶与膜的接触不良：应确保用转膜缓冲液浸透滤纸和海绵垫，小心除去组装膜三明治时的所有气泡。凝胶/膜三明治必须牢固装在两部分印迹模块之间。可尝试多加一个海绵垫或将失去弹性的海绵垫换成新的。
- 过度挤压凝胶：过度挤压的一个明显表现是凝胶过于扁平。在三明治被过度挤压的情况下，应适当移除海绵垫，降低对凝胶和膜施加的过多压力然后关闭转印仪。

可以，我们的PVDF和硝化纤维素膜均可用于Li-COR仪器。

我们的PVDF膜可以耐受乙腈，但硝化纤维素膜不能耐受。

PVDF膜需要更为严格的封闭步骤。这可通过将封闭剂的浓度增加2-5倍、延长封闭时间并在37℃封闭来实现。封闭剂与无蛋白质结合的位置结合，可防止背景染色，并封闭与膜结合的蛋白质，以减少其与一抗发生非特异性相互作。封闭剂可使用脱脂奶粉、BSA和酪蛋白。