Vivid Colors™ pLenti6.3/V5-GW/EmGFP 表达对照载体
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Invitrogen™

Vivid Colors™ pLenti6.3/V5-GW/EmGFP 表达对照载体

Vivid Colors™ pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP 表达对照载体是一种含有祖母绿荧光蛋白 (EmGFP) 的 ViraPower™ HiPerform™ 阳性对照慢病毒载体。其设计用于与了解更多信息
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货号数量
V3700620 μg
货号 V37006
价格（CNY)
34,557.45
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Ends: 31-Dec-2025
41,266.00
共减 6,708.55 (16%)
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Vivid Colors™ pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP 表达对照载体是一种含有祖母绿荧光蛋白 (EmGFP) 的 ViraPower™ HiPerform™ 阳性对照慢病毒载体。其设计用于与 ViraPower™ HiPerform™ 慢病毒表达系统配合使用作为阳性对照，以便在 293FT 细胞中转染后能够检测更高水平的 EmGFP 荧光，作为产生表达 EmGFP 慢病毒储备液的滴度对照，以及作为在分裂和非分裂哺乳动物细胞中转导后的转导对照。该载体含分裂 EmGFP 组成型表达的 CMV 启动子以及分裂杀稻瘟菌素稳定选择标志物表达的 SV40 启动子。该载体配备有两个关键遗传元件，使其成为 Hiperform™ 载体：来自 HIV-1 整合酶基因的土拨鼠转录后调控元件 (WPRE) 和中心多嘌呤管道 (cPPT) 序列，用于产生至少 4 倍 EmGFP 表达增加（相较于缺乏这些元件的载体）。该对照载体不设计用于生成 EmGFP 融合蛋白，且不表达 V5 抗原决定簇。

优势
•基于慢病毒的 EmGFP 在分裂和非分裂哺乳动物细胞中的表达
•作为转染和慢病毒产生的快速阳性对照
•作为测定慢病毒滴度的快速滴度对照

主要特点
•使用 CMV 启动子进行组成型表达
•高水平表达 EmGFP，不表达 V5 抗原决定簇
• WPRE 和 cPPT 序列可产生至少 4 倍 EmGFP 表达增加（相较于缺乏这些元件的载体）
•杀稻瘟菌素选择标志物以稳定选择

试剂盒包括
• pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP 表达对照载体

相关 SKU
• ViraPower™ HiPerform™ 慢病毒 TOPO™ 表达试剂盒 (K531000)
• ViraPower™ HiPerform™ 慢病毒 Gateway™ 表达试剂盒 (K533000)
• ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ 表达系统 (A11141)
• ViraPower™ HiPerform™ Promoterless Gateway™ 表达系统 (A11145)

仅供研究使用。不得用于治疗或诊断用途。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
构成或诱导系统组成型
输送类型慢病毒
适用于（应用）报告基因试验、病毒表达
产品类型慢病毒表达载体
数量20 μg
报告基因GFP (EmGFP)
选择试剂（真核生物）杀稻瘟菌素
载体pLenti
克隆方法Gateway™
产品线ViraPower™、Vivid Colors™, Vivid Colors™
促进剂CMV
蛋白标记V5 抗原决定簇标签
Unit Size20 µg
内容与储存
pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP 载体：20 µg（40 µL 0.5 µg⁄µL 载体溶于 TE 缓冲液，pH 值 8.0），在 —20°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

我使用了你们的pLenti6.3/V5-GW/EmGFP对照载体稳转我的细胞系，但所得EmGFP的表达水平很低。我该如何处理？

这可能是由于在筛选过程中应用了过量的杀稻瘟素所致。通过开展杀伤曲线分析来确定您所用细胞系的抗生素敏感性。使用能够有效杀灭未转导细胞系的最低抗生素浓度。

我使用了你们的pLenti6.3/V5-GW/EmGFP对照载体，稳定转导我的细胞系，但未发现EmGFP的表达。你们能提供一些帮助吗？

启动子被沉默或在荧光显微镜下使用了错误的滤镜组来观察细胞培养物/流式细胞仪上的检测参数错误可导致稳定转导后看不到EmGFP的表达。应筛选多个耐受抗生素的细胞克隆，并挑选其中表达水平最高的一个。请确保在倒置荧光显微镜上使用FITC或Omega XF100滤镜组或在您的流式细胞仪中准确应用FITC检测参数。

我使用了你们的pLenti6.3/V5-GW/EmGFP对照，瞬时转导我的细胞系，但发现EmGFP的表达水平很低。你们能提供一些帮助吗？

表达量低可能是由于低转导效率，MOI值过低或转导操作后过早收获了细胞。应确保在Polybrene试剂存在的条件下进行细胞转导，检查和/或使用更高的MOI值， 至少在转导后48-72小时后再收获细胞。

我使用了你们提供的pLenti6.3/V5-GW/EmGFP对照载体，但在病毒滴度测定过程中未获得EmGFP阳性细胞。可能发生了什么情况？

这里列举了一些可能的原因与解决方案：

- 在荧光显微镜下使用了错误的滤镜组来观察细胞培养物，或流式细胞仪上的检测参数错误：请确保在倒置荧光显微镜上使用FITC或Omega XF100滤镜组或在您的流式细胞仪中准确应用FITC检测参数。
- 病毒母液未正确储存：分装并将母液保存于–80°C下的冻存管中。请勿将其冻融超过3次。
- 转导过程中未加入Polybrene试剂：在Polybrene试剂存在的条件下向细胞中转导pLenti6.2-GW/EmGFP。
- EmGFP表达时间过短以致难以观察： 如需获得最佳的EmGFP表达水平，请在转导4天后进行观察。

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. What should I do?

This can happen due to excess blasticidin used during selection. Determine the antibiotic sensitivity of your cell line by performing a kill curve. Use the minimum antibiotic concentration required to kill your untransduced cell line.

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