Vivid Colors™ pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Expressionskontrollvektor

Katalognummer	Menge
V37006	20 μg

Katalognummer V37006

Preis (EUR)

1.786,00

20 µg

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Menge:

20 μg

Preis (EUR)

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Der Vivy Colors™ pLentiV6.3⁄V5-GW⁄EmGFP-Expressions-Kontrollvektor ist ein ViraPower™ HiPerform™ lentiviraler Vektor für die Positivkontrolle, der smaragdgrün fluoreszierendes Protein (EmGFP) enthält. Er wurde zur Verwendung mit den ViraPower™ HiPerform™ lentiviralen Expressionssystemen als Positivkontrolle entwickelt, um den Nachweis höherer EmGFP-Fluoreszenzwerte nach Transfektion in 293FT-Zellen zu ermöglichen, als Titerkontrolle zur Herstellung eines EmGFP-exprimierenden Lentivirus-Bestands und als Transduktionskontrolle nach Transduktion sowohl in teilenden als auch in nicht teilenden Säugetierzellen. Der Vektor besitzt den CMV-Promoter für die Förderung der konstitutiven Expression von EmGFP und den SV40-Promoter für die treibende Expression des Blasticidin-stabilen Selektionsmarkers. Der Vektor ist mit zwei wichtigen genetischen Elementen ausgestattet, die ihn zu einem HiPerform™ Vektor machen: dem Woodchuck Posttranscriptional Regulatory Element (WPRE) und der zentralen Polypurin Tract (cPPT)-Sequenz aus dem HIV-1-Integrase-Gen. Im Vergleich zu Vektoren ohne diese Elemente wird eine mindestens 4-fach höhere Proteinexpression erreicht. Dieser Kontrollvektor ist nicht für die Erzeugung von EmGFP-Fusionsproteinen vorgesehen und exprimiert das V5-Epitop nicht.

Vorteile
• Lentivirus-basierte Expression von EmGFP in teilenden und nicht teilenden Säugetierzellen
• Dient als schnelle Positivkontrolle für Transfektion und lentivirale Produktion
• Dient als schnelle Titerkontrolle für den Nachweis des Lentivirus-Titer

Wichtige Merkmale
• Konstitutive Expression mit CMV-Promotor
• High-Level-Expression von EmGFP ohne V5-Epitop
• WPRE- Und CPPT-Sequenzen erzeugen im Vergleich zu anderen Lenti-Vektoren ohne diese Elemente eine mindestens 4-fache Zunahme der EmGFP-Expression
• Blasticidin-Selektionsmarker für stabile Selektions-Kits

Enthält
• pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP-Expressionskontrollvektor

Verwandte SKUs
• ViraPower™ HiPerform™ lentivirales TOPO™-Expressionskit (K531000)
• ViraPower™ HiPerform™ lentivirales Gateway™-Expressionskit (K533000)
• ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™-Expressionssystem (A11141)
• ViraPower™ HiPerform™ Promoterless Gateway™-Expressionssystem (A11145)

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke vorgesehen.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

Konstitutives oder induktives SystemKonstitutiv

LiefertypLentiviral

Zur Verwendung mit (Anwendung)Reporter-Assays, virale Expression

ProdukttypLentivirus-Expressionsvektor

Menge20 μg

Reporter-GenGFP (EmGFP)

Selektionsmittel (eukaryotisch)Blasticidin

VektorpLenti

KlonierungsmethodeGateway™

ProduktlinieViraPower, Vivid Colors

PromoterCMV

ProteinmarkierungV5-Epitop-Tag

Unit Size20 µg

Inhalt und Lagerung

pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP-Vektor: 20 µg (40 µl 0,5 µg⁄µl Vektor im TE-Puffer, pH 8,0), bei —20 °C lagern

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. What should I do?

This can happen due to excess blasticidin used during selection. Determine the antibiotic sensitivity of your cell line by performing a kill curve. Use the minimum antibiotic concentration required to kill your untransduced cell line.

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got no expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. Can you please help?

This could happen due to promoter silencing or using the incorrect filter/detection parameters for flow cytometry. Screen multiple antibiotc-resistant clones and select the one with the highest expression level. Check the filter you are using as well as the FITC detection parameters.

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after transient transduction into my cell line. Can you please help?

Please check the following:

- Tranduction occurred in presence of Polybrene reagent
- Use a higher MOI
- Harvest cells at least 48-72 hrs after tranduction

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got no EmGFP-positive cells after titering. What could have happened?

Possible causes include: incorrect filter set/incorrect detection parameters for flow cytometer, viral stocks stored incorrectly, Polybrene reagent not included during transduction, or it may be too soon to see EmGFP expression.