ChromaTide™ Texas Red™-12-dUTP
ChromaTide™ Texas Red™-12-dUTP
Invitrogen™

ChromaTide™ Texas Red™-12-dUTP

Molecular Probes™ ChromaTide™ 染料标记 dUTP、OBEA-dCTP 和 UTP 核苷酸可用于合成标记的 DNA了解更多信息
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货号数量
C763125 μL
货号 C7631
价格(CNY)
8,705.00
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数量:
25 μL
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Molecular Probes™ ChromaTide™ 染料标记 dUTP、OBEA-dCTP 和 UTP 核苷酸可用于合成标记的 DNA 探针,而无需使用危险而昂贵的放射性同位素标记的核苷酸。这些核苷酸可采用标准分子生物学技术掺入,然后可以在原位杂交、微阵列或印迹方案中使用标记探针。ChromaTide™ 染料标记核苷酸可提供不同的荧光颜色,以方便进行多色分析。

ChromaTide™ 标记核苷酸规格:
• 染料的 Ex/Em:Texas Red™-12-dUTP (595/615 nm)
• 炔基氨基连接子的长度:12 个原子


将 ChromaTide™ 核苷酸掺入探针的方法
• 切口平移
• 随机引物标记
• 末端脱氧核苷转移酶的末端标记
• 逆转录
• PCR 扩增


参见酶促掺入 ChromaTide™ dUTP 的方法了解其中每个方法的特定指南。

Alexa Fluor™ 和 BODIPY™ 荧光染料可制备优质探针
使用标记核苷酸制备的探针可以用于多色技术,如原位杂交和阵列杂交。我们专有的 BODIPY™ 和 Alexa Fluor™ 染料偶联物非常明亮、具有光稳定性且对 pH 几乎不敏感。BODIPY™ 染料的窄发射谱有助于确保极小的光谱重叠。Alexa Fluor™ 染料水溶性高,由此制备的 DNA 探针也一样,使其成为荧光原位杂交的首选标记。

长连接子可以提高性能
通过独特的炔基氨基连接体在尿苷的 C-5 位点处的 ChromaTide™ dUTP 和 UTP 核苷酸进行修饰,这可以在核苷酸与染料之间提供间隔,减少两者之间的相互作用。产品名称中的数字,例如荧光素-12-dUTP 中的 “12”,表示原子中间隔的净长度。这些间隔可产生更明亮的偶联物,并且提高二级检测试剂的半抗原可及性。

关于 ChromaTide™ 试剂的完整列表:Molecular Probes ChromaTide™ 和 aha 标记核苷酸—表 8.5
有关这些标记试剂的更多信息,请阅读 Molecular™ Probes 手册中的标记寡核苷酸与核酸—第 8.2 节

仅供科研使用。不得用于人或动物的治疗或诊断用途。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
标记方法直接标记
标签或染料Texas Red™
数量25 μL
运输条件湿冰
最大浓度1 mM
产品线ChromaTide™, Texas Red™
Unit SizeEach
内容与储存
在冰箱(-5 至 -30°C)中避光储存。

常见问题解答 (FAQ)

使用ChromaTide核苷酸标记后的背景很高。你们有什么建议吗?

你可以尝试使用合适的基于离心柱的方法纯化ChromaTide标记的探针以去除未掺入的ChromaTide核苷酸。乙醇沉淀可能不能有效的去除未掺入的ChromaTide核苷酸,因此需要使用离心柱进行纯化。

使用ChromaTide核苷酸标记后的核酸探针没有荧光。你们有什么建议吗?

•检查碱基和染料的比例,确定ChromaTide核苷酸掺入水平。由于荧光检测可能受标记不足、过度标记、仪器灵敏度或其它因素影响,所以碱基与染料的比例是更好的检测掺入效率的指标。
•ChromaTide核苷酸在酶促标记反应时可能没有很好的掺入。确保所使用的酶促方法与特定的荧光ChromaTide核苷酸兼容,因为一些方法可能并不是对所有应用都适合。您可能还需要进一步优化酶促掺入方法,如优化酶浓度、孵育时间、浓度及标记核苷酸与未标记核苷酸的比例。对于PCR,保真度低一些的聚合酶可以得到更高的掺入率;当然,使用PCR时,掺入率通常都较低。
•检查检测所用荧光滤光片,确保其与染料相兼容。你也可以在所用滤光片下检测一小滴没有稀释的染料,确保在没有与寡核苷酸结合前你能对染料单独成像。Alexa Fluor 647的发射荧光肉眼不可见,因此需要远红外成像系统进行检测。

ChromaTide核苷酸可以用于在活细胞内标记核酸吗?

不能,它们不是细胞通透的所以它们仅适用于体外掺入方法。荧光染料和磷酸基团电荷太高因而不能穿透完整细胞膜。不带磷酸基团的非荧光染料例如EdU, EU, 或BrdU可以用于活细胞核酸掺入研究。

使用酶促掺入方法时,我如何才能确定ChromaTide标记核苷酸的掺入效率?

碱基-染料比例可以通过测定核酸在260 nm的吸光值和染料在其最大吸收峰的吸光值而确定。使用相应染料和核酸的消光系数,您就可以通过Beer-Lambert定律计算出被标记核酸的碱基-染料比例。详细的说明可以在下列产品说明中找到:

酶促方法掺入ChromaTide dUTP (http://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/td07604.pdf)
酶促方法掺入ChromaTide UTP(http://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/td07605.pdf).

使用酶促法掺入ChromaTide核苷酸时的平均掺入率是多少?

平均掺入率是大约每100-150碱基掺入一个染料分子,所以ChromaTide荧光标记核苷酸通常是我们提供的核酸标记方法里标记率最低的。