葡聚糖、荧光素,10,000 MW,阴离子,赖氨酸可固定 (Fluoro-Emerald)
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葡聚糖、荧光素,10,000 MW,阴离子,赖氨酸可固定 (Fluoro-Emerald)
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葡聚糖、荧光素,10,000 MW,阴离子,赖氨酸可固定 (Fluoro-Emerald)

标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品。葡聚糖规格:•标记 (Ex/Em):荧光素 (494/521)•大小:10,000 MW•电荷:阴离子•可固定:通过赖氨酸可固定Molecular Probes™ 葡聚糖的高生产标准我们在若干分子量范围内提供超过了解更多信息
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D182025 mg
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标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。

是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品

葡聚糖规格

标记 (Ex/Em):荧光素 (494/521)
大小:10,000 MW
电荷:阴离子
可固定:通过赖氨酸可固定

Molecular Probes™ 葡聚糖的高生产标准
我们在若干分子量范围内提供超过 50 种荧光和生物素化葡聚糖偶联物。葡聚糖是亲水性多糖,特征为具有中等至较高分子量,水溶性良好,毒性较低。它们通常也表现出低免疫原性。由于它们较不常见的聚-(α-D-1,6-葡萄糖) 连接(使它们能够耐受大多数内源性细胞糖苷酶的切割),葡聚糖具有生物惰性。

在大多数情况下,与其他来源的葡聚糖相比,Molecular Probes™ 荧光葡聚糖更明亮且负电荷更高。此外,我们使用严格的方法尽可能去除未偶联的染料,然后通过薄层色谱分析测定葡聚糖偶联物,以确保不存在低分子量污染物。

广泛的取代基和分子量选择范围
Molecular Probes™ 葡聚糖偶联到生物素或各种荧光基团,包括我们的 7 种 Alexa Fluor™ 染料(Molecular Probes 葡聚糖偶联物–表 14.4),提供以下标称分子量 (MW) 进行选择:3,000;10,000;40,000;70,000;500,000;2,000,000 道尔顿。

葡聚糖净电荷和固定能力
我们利用染料与葡聚糖分子的琥珀酰亚胺偶联,这在大多数情况下会产生中性或阴离子葡聚糖。用于产生 Rhodamine Green™ 和 Alexa Fluor 488 葡聚糖的反应可产生中性、阴离子或阳离子最终产物。Alexa Fluor、Cascade Blue、荧光黄、荧光素和 Oregon Green 葡聚糖本质为阴离子,而大多数用两性离子罗丹明 B、四甲基罗丹明和 Texas Red™ 染料标记的葡聚糖基本为中性。为产生更多的高度阴离子葡聚糖,我们利用专利程序向葡聚糖载体添加了负电荷基团;这些产物为指定的 “聚阴离子”葡聚糖。

某些应用需要用甲醛或戊二醛处理葡聚糖示踪剂,以便用于后续分析。对于这些应用,我们提供大多数荧光基团或生物素葡聚糖偶联物的 “赖氨酸可固定” 版本。这些葡聚糖具有共价结合的赖氨酸残基,允许葡聚糖示踪剂通过醛介导的固定与周围生物分子结合,通过免疫组织化学和超微结构技术进行后续检测。我们还证明我们所有的 10,000 MW Alexa Fluor 葡聚糖偶联物均可用醛类固定剂固定。

使用标记的葡聚糖的关键应用
有一系列引用文献描述了标记葡聚糖的用途。一些最常见的用途包括:

活细胞中的神经元示踪(顺行和逆行)
活细胞中细胞谱系的示踪
神经解剖示踪
检查细胞间通讯(例如,间隙连接、伤口愈合过程以及胚胎发育期间)
研究血管可透过性和血脑屏障的完整性
追踪内吞作用
监测酸化(一些葡聚糖–染料偶联物具有 pH 值敏感性)
研究细胞质基质的流体动力学特性

仅供研究使用。不得用于任何动物或人类的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
标签或染料经典染料
产品类型葡聚糖
数量25 mg
运输条件室温
激发/发射494/518 nm
产品线Invitrogen
Unit SizeEach
内容与储存
储存在冰箱(-5 至 -30°C)中并避光。

常见问题解答 (FAQ)

为什么在我用甲醇固定细胞之后,神经元示踪剂信号全部丢失了?

如果您选择的示踪剂是亲脂性染料并且用甲醇固定,脂质会随着甲醇流失。如果您使用甲醇固定,可以选择能够共价结合神经元内的蛋白质的示踪剂。

我用DiI一类的亲脂性花青染料进行细胞染色,但是当我试图继续用抗体标记时信号却丢失了。 这是什么原因所致?

由于这些染料插入脂质膜,任何对膜的破坏都将导致染料流失。这包括用Triton X-100之类的去垢剂或是甲醇之类的有机溶剂通透。通透是胞内抗体标记所必需的,但它会导致染料流失。相反,CFDA SE之类活性染料能够共价连接到细胞组分,因此可以在固定和通透之后更好的保留。

我用DiI标记我的神经元,然后固定和通透,但没有获得信号。 哪个环节出了问题?

DiI是一种亲脂性染料,多数保留在细胞脂质内。当细胞经去垢剂通透或是用乙醇固定时,会去除掉脂质和染料。如果需要通透,可以使用CM-DiI标记,因为CM-DiI会共价结合膜里面的蛋白;部分信号会随着固定/通透丢失,但残留的信号仍足以被检测出。

有没有无需显微注射标记单个神经元的方法?

固体和结晶形式的DiI以及其他相关染料(货号D282,D3911,D7757,和D12731)有时与一个特定的神经元接触,通过膜侧向扩散染上整个细胞。此外,我们的NeuroTrace组织标记糊剂也可挑到针上,置于特定的神经元上。 有关我们的神经元细胞标记方法的比较结果请参阅下表。 产品:标记方式:标记强度:特征 神经元特异性抗体:针对神经细胞表达蛋白的一抗:与蛋白质表达量成比例:唯一的神经元特异性标记方式。 亲脂性神经元示踪剂:疏水性染料掺入到细胞中的脂质:由于细胞中含有大量的脂类,这种标记方式能提供最强的标记:能够跟踪整个样品的神经元。 荧光标记的右旋糖苷:通常右旋糖苷采用显微注射:所有的细胞质可能被标记,标记密度可能会更高:能够标记单个神经元,从而避免了荧光背景干扰。 膜电位指示剂:染料通过水性缓冲液上样到活细胞里:取决于周围电场引起的结构变化,或者去极化引起的染料流入:膜电位的变化在各种生理进程中发挥核心作用,包括神经脉冲波传播,肌肉收缩以及细胞信号传导过程。

你们有哪些神经元示踪产品?

详细信息请查阅此网页(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing.html)。

引用和文献 (51)

引用和文献
Abstract
Biogenesis of multilamellar bodies via autophagy.
Authors:Hariri M, Millane G, Guimond MP, Guay G, Dennis JW, Nabi IR
Journal:Mol Biol Cell
PubMed ID:10637306
'Transfection of Mv1Lu mink lung type II alveolar cells with beta1-6-N-acetylglucosaminyl transferase V is associated with the expression of large lysosomal vacuoles, which are immunofluorescently labeled for the lysosomal glycoprotein lysosomal-associated membrane protein-2 and the beta1-6-branched N-glycan-specific lectin phaseolis vulgaris leucoagglutinin. By electron microscopy, the vacuoles present the morphology of ... More
Gap junctional communication in the early Xenopus embryo.
Authors:Landesman Y, Goodenough DA, Paul DL
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:10953017
'In the Xenopus embryo, blastomeres are joined by gap junctions that allow the movement of small molecules between neighboring cells. Previous studies using Lucifer yellow (LY) have reported asymmetries in the patterns of junctional communication suggesting involvement in dorso-ventral patterning. To explore that relationship, we systematically compared the transfer of ... More
Temporary disruption of the plasma membrane is required for c-fos expression in response to mechanical stress.
Authors:Grembowicz KP, Sprague D, McNeil PL
Journal:Mol Biol Cell
PubMed ID:10198070
'Mechanically stressed cells display increased levels of fos message and protein. Although the intracellular signaling pathways responsible for FOS induction have been extensively characterized, we still do not understand the nature of the primary cell mechanotransduction event responsible for converting an externally acting mechanical stressor into an intracellular signal cascade. ... More
Role of actin polymerization and adhesion to extracellular matrix in Rac- and Rho-induced cytoskeletal reorganization.
Authors:Machesky LM, Hall A
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:9265656
'Most animal cells use a combination of actin-myosin-based contraction and actin polymerization- based protrusion to control their shape and motility. The small GTPase Rho triggers the formation of contractile stress fibers and focal adhesion complexes (Ridley, A.J., and A. Hall. 1992. Cell. 70:389-399) while a close relative, Rac, induces lamellipodial ... More
A role for phosphoinositide 3-kinase in the completion of macropinocytosis and phagocytosis by macrophages.
Authors:Araki N, Johnson MT, Swanson JA
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:8947549
'Phosphoinositide 3-kinase (PI 3-kinase) has been implicated in growth factor signal transduction and vesicular membrane traffic. It is thought to mediate the earliest steps leading from ligation of cell surface receptors to increased cell surface ruffling. We show here that inhibitors of PI 3-kinase inhibit endocytosis in macrophages, not by ... More