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如果您想看到最精细的结构,应使用低分子量葡聚糖偶联物,例如3,000 MW葡聚糖偶联物。
请确保您使用的是葡聚糖是可固定形式(即包含伯胺)。不包含伯胺的葡聚糖将无法固定。另一个原因可能是葡聚糖的浓度过低,其使用浓度可以增加到10 mg/mL。
我们没有测定右旋糖酐偶联物的净电荷。净电荷取决于标记右旋糖酐所用的荧光团和制备偶联物所采用的方法。我们根据所用的荧光团将右旋糖酐标记为中性的或阴性的,但是染料和右旋糖酐的净电荷可能并不总是相同。Alexa Fluor、Cascade Blue、荧光黄、荧光素和Oregon Green右旋糖苷本质上是阴性的,而大多数标记两性离子罗丹明 B、四甲基罗丹明和Texas Red染料的右旋糖酐基本上是中性的。
我们已使用过3000至70,000分子量右旋糖酐,但3000至10000分子量右旋糖酐最常用于神经元示踪。3000 分子量的右旋糖酐用于对精细神经传递进行更详细的跟踪、研究间隙连接,并且扩散更快;而10000MW右旋糖酐具有较慢的分散速度、较长的胞内存留时间,且不会不穿过间隙连接。
NeuroTrace BDA-10,000 神经元示踪试剂盒(货号N7167)手册有一个 使用10,000 MW lysine-fixable biotin dextran amine(BDA)进行注射操作及神经元跟踪的实验方案。该试验方案也适用于其他荧光标记的右旋糖酐。 请参阅第4和5页的表1a和1b(https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/mp07167.pdf)。