抗淬灭封片剂概述

封片剂是显微镜成像中必不可少的工具,用于保存和保护样品,同时提高图像清晰度和信号持久度。封片剂分为软性(非固化型)和硬性(固化型),具体取决于封片剂是否含有胶凝剂。软性封片剂含有缓冲甘油溶液,应在需要立即对载玻片进行成像时使用。软性封片剂可以冲洗掉,样品可以重新染色或用于单细胞RNA测序或PCR等下游实验。硬性封片剂含有一种聚合物,可将盖玻片永久固定在载玻片上,用于延长样品的保存时间。

封片剂有多种类型,每种类型都针对特定的应用和成像技术而定制:水性封片剂、非水性(有机)封片剂和抗淬灭封片剂。抗淬灭封片剂在防止光漂白和稳定荧光信号方面非常有效。

为尽量减少实验样品的光漂白,我们开发了一系列抗荧光淬灭封片剂,以提高活细胞和固定细胞样品中荧光染料的光稳定性。我们为抗荧光淬灭封片剂提供了多款选择,有封片后可即时成像的,也有可长期储存的,同时还提供可包含核染料的配方,以将封片和复染一步完成。减少光漂白意味着能够追踪更长久的时间进程实验、获得更高的灵敏度以及对荧光信号实现更好的定量。查看下列封片剂选项,挑选满足您研究和成像需求的理想解决方案。

详细了解封片剂如何改善图像


根据您的荧光成像需求选择适合的抗荧光淬灭封片剂

 ProLong 抗淬灭封片剂SlowFade抗淬灭封片剂
常规版ProLong Glass新品ProLong RapidSetProLong DiamondProLong GoldProLong LiveSlowFade GlassSlowFade DiamondSlowFade Gold
带复染剂的版本ProLong Glass with NucBlueProLong Diamond with DAPIProLong Gold with DAPISlowFade with DAPISlowFade with DAPISlowFade with DAPI
样品类型固定细胞/组织活细胞固定细胞/组织
是否固化是(硬性)N/A否 (软性)
固化时间18–60 小时1 小时24 小时sN/AN/A
成像类型固定细胞/组织,长时间成像固定细胞/组织,即刻长时间成像固定细胞/组织,长时间成像活细胞成像固定细胞/组织,即刻成像
样品厚度厚至150 µm厚至80 µm厚至10 µmN/A厚至500 µm厚至15 µm
折射率1.51 (固化24h后)1.49 (固化1h后)1.47 (固化24h后)1.31.521.42
最佳显微镜物镜*油镜油镜甘油物镜

甘油物镜

水或空气物镜

甘油物镜
兼容荧光基团大多数染料和荧光蛋白Alexa Fluor 染料大多数染料和荧光蛋白大多数染料和荧光蛋白Alexa Fluor 染料
形式即用型100x 浓缩液即用型
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*上表封片剂与所有物镜类型兼容


抗淬灭封片剂

fluorescent cells mounted with prolong antifade

ProLong 抗淬灭封片剂

ProLong 抗淬灭封片剂可抑制光漂白,并保留荧光标记目标分子的信号,以便长时间成像、分析和样品储存。

了解更多关于 ProLong 抗淬灭封片剂的信息

fluorescent cells mounted with SlowFade antifade medium

SlowFade 抗淬灭试剂

SlowFade 抗淬灭试剂可抑制光漂白,并保存荧光标记目标分子的信号,以便立即观察,并可用于短期保存(3-4 周)。

了解更多关于 SlowFade 抗淬灭试剂的信息


什么是光漂白?

不可逆的光漂白会造成荧光信号的损失,从而导致灵敏度大大降低,尤其在靶标分子丰度较低、激发光较强或激发持续时间长时,表现得非常显著。此外,光漂白相关机制还与光毒性有关,可对细胞活性和数据质量产生不利影响。抗淬灭封片剂可通过减弱光漂白效应,以获得更持久、更稳定的信号。

Illustration of microscope slide with sample

步骤 1. 将样品置于载玻片或盖玻片上。所有染色操作可在此步骤之前或之后完成。

Illustration of microscope slide with antifade applied

步骤 2. 将抗淬灭封片剂涂抹于样品上。对于硬性封片剂,请置于空气中过夜固化。

Illustration of microscope slide with glycerol applied (hard-setting mountants only)

步骤 3. 仅限使用硬性封片剂:在封好的样品上滴一滴 100% 甘油,然后盖上盖玻片。甘油有助于盖玻片的粘附。ProLong Glass 抗淬灭封片剂在 24 小时后完全固化,最终折射率约为 1.52。


成像实验方法


资源

细胞成像资源中心
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固定细胞成像
利用现有的工具和实验方案来拍摄和分析高分辨率图像,促进细胞水平的研究

活细胞成像
观察细胞的自然状态以维持细胞功能,从而研究各种细胞过程

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