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DreamTaq DNA 聚合酶 |
PCR (聚合酶链式反应) 是分子生物学中广泛使用的实验室技术，用于扩增最长5 kb 的特定 DNA 序列。常规 PCR 实验使用天然或重组的 Taq 聚合酶。增强型 Taq DNA 聚合酶，比如 DreamTaq DNA 聚合酶，在常规 PCR 应用中表现更优异，与普通 Taq 聚合酶相比，具有更高灵敏度、更长扩增片段和更高产量。热启动 PCR 技术可有效防止非特异性产物的扩增，能对低丰度靶标进行扩增，并可在室温下便捷地设置反应体系。与传统热启动 Taq DNA 聚合酶相比，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶具有更高的灵敏度、特异性和产量。
适用于日常 PCR 的 DreamTaq DNA 聚合酶
Thermo Scientific DreamTaq DNA 聚合酶是一种增强型 Taq DNA 聚合酶，有标准型和热启动型两种形式，在性能和成本之间取得了平衡。该聚合酶配套提供经过特殊优化的缓冲液，可在无需过多优化反应条件的情况下实现稳定可靠的 DNA 扩增。Thermo Scientific DreamTaq 绿色缓冲液还支持直接上样 PCR 产物进行凝胶电泳。
DreamTaq DNA 聚合酶相对 Taq 聚合酶的优势
- 相较于传统 Taq 酶，具有更高产量、灵敏度和更长靶标扩增能力
- 无需优化 MgCl₂ 浓度即可实现稳定扩增
- 提供单酶和预混液形式，便于反应体系的快速配置
- 绿色缓冲液支持直接凝胶上样，简化下游凝胶分析步骤
观看视频，了解如何使用 DreamTaq DNA 聚合酶进行菌落 PCR。
DreamTaq 和 DreamTaq 热启动聚合酶的比较
DreamTaq DNA 聚合酶 |
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶 | |
|---|---|---|
| 保真度 (vs. Taq DNA 聚合酶) | 1x | 1x |
| 增强特异性 (热启动修饰) | 否 | 是 |
| 灵敏度 (人类 gDNA) | 30 pg | 3 pg |
| 扩增长度 (人类 gDNA/λ DNA) | 6 kb**/20 kb | 6 kb**/20 kb |
| dUTP 掺入能力 | 否 | 是 |
| 3′A 尾添加 | 是 | 是 |
| DNA 合成速度 | 1 分钟/kb | 1 分钟/kb |
| 单酶 | ||
无色 | 无色 | |
| 预混液 | ||
无色 绿色† | 绿色† | |
**标准版本和热启动版本分别可以达到7.5 kb 和9 kb
†含有惰性绿色染料，用于 PCR 产物的直接凝胶上样
选择 DreamTaq DNA 聚合酶的理由
- 专为基础 PCR 应用优化
- 与传统 Taq DNA 聚合酶相比，具有更高灵敏度、更长扩增片段和更高产量
- 反应条件无需复杂优化即可实现稳定 DNA 扩增
增强的 PCR 灵敏度和扩增产物得率
DreamTaq DNA 聚合酶较传统 Taq 酶具有更高的 PCR 灵敏度。即使在模板 DNA 量极低的情况下，也能实现稳定高效的扩增效果。
图1. 低模板量下的高效扩增表现。使用 DreamTaq DNA 聚合酶 (A) 和不同厂商 Taq DNA 聚合酶 (B-F) 按照推荐条件，分别以 30 pg、300 pg、3 ng和30 ng 人类基因组 DNA 为模板扩增 956 bp 片段。结果显示，仅 DreamTaq DNA 聚合酶能在所有模板量下均实现高产率扩增。DNA 分子量标准：Thermo Scientific GeneRuler Express DNA Ladder.
长片段扩增的强劲性能
DreamTaq DNA 聚合酶可从基因组 DNA 中扩增最长达 7.5 kb 的靶标，从 λDNA 中扩增最长达 20 kb 的片段。相较于传统 Taq 酶，DreamTaq DNA 聚合酶表现更优，可提供更高产量并成功扩增更长的扩增子。
图 2. 使用 DreamTaq DNA 聚合酶进行长片段扩增。按照制造商推荐条件，使用 DreamTaq DNA 聚合酶 (A) 和其他供应商的 Taq DNA 聚合酶 (B–H) 分别扩增长度递增的 DNA 片段 (160 bp、345 bp、727 bp、1,988 bp、4,473 bp、7,500 bp)。仅 DreamTaq DNA 聚合酶能够以高产量和特异性成功扩增直至 7.5 kb 的所有片段。DNA 分子量标准: GeneRuler 1 kb plus DNA Ladder。
即用型 PCR 产品
DreamTaq 绿色缓冲液形式由 DreamTaq DNA 聚合酶与绿色反应缓冲液组成。该缓冲液含密度调节剂和双色示踪染料，可直接上样电泳。绿色缓冲液不影响聚合酶性能，兼容 DNA 测序、连接反应及限制性酶切等下游应用。
图3. 绿色与无色缓冲液等效性能验证。使用 DreamTaq 标准预混液和 DreamTaq 绿色预混液对 376 bp、634 bp 和 2000 bp 片段进行扩增，显示同等效率。分子量标记：GeneRuler Express DNA Ladder。
图4. DreamTaq 绿色反应缓冲液。(A)电泳前：绿色反应液上样状态；(B) 电泳后：蓝色染料迁移位置相当于 3-5 kb 片段，黄色染料迁移速率>10 bp 片段，可实时监测电泳进程。
更少优化需求的高效扩增
DreamTaq DNA 聚合酶配套提供的 DreamTaq 缓冲液含有优化比例的 KCl 和 (NH₄)₂SO₄，可在单一 MgCl₂ 浓度下实现 DNA 片段的高效扩增，增强 PCR 过程中的特异性，并支持更宽泛的引物退火温度范围。
图5. 不同片段扩增的最适 MgCl2 浓度。梯度增加 MgCl2 浓度扩增三种 DNA 片段。当MgCl2 终浓度为 2 mM（DreamTaq 标准反应条件）时，所有片段均获高产率扩增且无非特异性产物。1: 2 mM；2: 2.5 mM；3: 3 mM；4: 4 mM；分子量标记：ZipRuler Express DNA Ladder。
用于常规 PCR 的重组 Taq 聚合酶
选择 DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶的理由
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶是增强型 DreamTaq DNA 聚合酶的热启动版本。其热启动激活特性可在室温下抑制聚合酶活性，防止非特异性扩增。因此，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶具有更高的灵敏度和特异性，并支持在室温下设置反应体系，同时不影响 PCR 的特异性和产量。
更优的反应结果：
- 减少非特异性扩增
- 更高灵敏度
- 更高产量
- 更长扩增片段
便捷性：
- 室温下进行反应体系配置
- 室温下反应稳定性高
对各种长度的扩增子均能实现高特异性和高产率
与竞品相比，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶能够高效扩增各种长度的 DNA 片段并获得高产率，其强大的热启动特性确保了对特定片段的选择性扩增。
图 6. 人基因组 DNA 的强劲扩增。与其他供应商的热启动 DNA 聚合酶相比，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶产生的 PCR 产物更多、条带更清晰，并能扩增更长的片段。上图显示了人基因组 DNA 的扩增产物（160 bp、727 bp、2 kb 或 5 kb）。M: GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder；1：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶；2-6：其他供应商的热启动 DNA 聚合酶。
适用于起始材料有限的实验
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可检测低至 3 pg 的人类基因组 DNA 模板，非常适合起始材料有限或靶标 DNA 浓度低的实验。
图 7. 高灵敏度：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶相比其他供应商的热启动 DNA 聚合酶可从更低模板量实现扩增。每组 PCR 反应含 3 pg、30 pg 或 3 ng 人基因组 DNA。M: GeneRuler Express DNA Ladder；1：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶；2-6：其他供应商的热启动 DNA 聚合酶。
对多种长度扩增子均能实现稳定高产
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可从人基因组 DNA 中扩增高达 9 kb 的序列，从 λDNA 中扩增高达 20 kb 的片段。
图 8. 稳定可靠的扩增效果。DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可高特异性地扩增人基因组 DNA 中长达 9 kb 的片段，使用 λDNA 模板时可扩增长达 20 kb 的更长序列。M: GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder。
选择 DreamTaq DNA 聚合酶的理由
- 专为基础 PCR 应用优化
- 与传统 Taq DNA 聚合酶相比，具有更高灵敏度、更长扩增片段和更高产量
- 反应条件无需复杂优化即可实现稳定 DNA 扩增
增强的 PCR 灵敏度和扩增产物得率
DreamTaq DNA 聚合酶较传统 Taq 酶具有更高的 PCR 灵敏度。即使在模板 DNA 量极低的情况下，也能实现稳定高效的扩增效果。
图1. 低模板量下的高效扩增表现。使用 DreamTaq DNA 聚合酶 (A) 和不同厂商 Taq DNA 聚合酶 (B-F) 按照推荐条件，分别以 30 pg、300 pg、3 ng和30 ng 人类基因组 DNA 为模板扩增 956 bp 片段。结果显示，仅 DreamTaq DNA 聚合酶能在所有模板量下均实现高产率扩增。DNA 分子量标准：Thermo Scientific GeneRuler Express DNA Ladder.
长片段扩增的强劲性能
DreamTaq DNA 聚合酶可从基因组 DNA 中扩增最长达 7.5 kb 的靶标，从 λDNA 中扩增最长达 20 kb 的片段。相较于传统 Taq 酶，DreamTaq DNA 聚合酶表现更优，可提供更高产量并成功扩增更长的扩增子。
图 2. 使用 DreamTaq DNA 聚合酶进行长片段扩增。按照制造商推荐条件，使用 DreamTaq DNA 聚合酶 (A) 和其他供应商的 Taq DNA 聚合酶 (B–H) 分别扩增长度递增的 DNA 片段 (160 bp、345 bp、727 bp、1,988 bp、4,473 bp、7,500 bp)。仅 DreamTaq DNA 聚合酶能够以高产量和特异性成功扩增直至 7.5 kb 的所有片段。DNA 分子量标准: GeneRuler 1 kb plus DNA Ladder。
即用型 PCR 产品
DreamTaq 绿色缓冲液形式由 DreamTaq DNA 聚合酶与绿色反应缓冲液组成。该缓冲液含密度调节剂和双色示踪染料，可直接上样电泳。绿色缓冲液不影响聚合酶性能，兼容 DNA 测序、连接反应及限制性酶切等下游应用。
图3. 绿色与无色缓冲液等效性能验证。使用 DreamTaq 标准预混液和 DreamTaq 绿色预混液对 376 bp、634 bp 和 2000 bp 片段进行扩增，显示同等效率。分子量标记：GeneRuler Express DNA Ladder。
图4. DreamTaq 绿色反应缓冲液。(A)电泳前：绿色反应液上样状态；(B) 电泳后：蓝色染料迁移位置相当于 3-5 kb 片段，黄色染料迁移速率>10 bp 片段，可实时监测电泳进程。
更少优化需求的高效扩增
DreamTaq DNA 聚合酶配套提供的 DreamTaq 缓冲液含有优化比例的 KCl 和 (NH₄)₂SO₄，可在单一 MgCl₂ 浓度下实现 DNA 片段的高效扩增，增强 PCR 过程中的特异性，并支持更宽泛的引物退火温度范围。
图5. 不同片段扩增的最适 MgCl2 浓度。梯度增加 MgCl2 浓度扩增三种 DNA 片段。当MgCl2 终浓度为 2 mM（DreamTaq 标准反应条件）时，所有片段均获高产率扩增且无非特异性产物。1: 2 mM；2: 2.5 mM；3: 3 mM；4: 4 mM；分子量标记：ZipRuler Express DNA Ladder。
用于常规 PCR 的重组 Taq 聚合酶
选择 DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶的理由
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶是增强型 DreamTaq DNA 聚合酶的热启动版本。其热启动激活特性可在室温下抑制聚合酶活性，防止非特异性扩增。因此，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶具有更高的灵敏度和特异性，并支持在室温下设置反应体系，同时不影响 PCR 的特异性和产量。
更优的反应结果：
- 减少非特异性扩增
- 更高灵敏度
- 更高产量
- 更长扩增片段
便捷性：
- 室温下进行反应体系配置
- 室温下反应稳定性高
对各种长度的扩增子均能实现高特异性和高产率
与竞品相比，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶能够高效扩增各种长度的 DNA 片段并获得高产率，其强大的热启动特性确保了对特定片段的选择性扩增。
图 6. 人基因组 DNA 的强劲扩增。与其他供应商的热启动 DNA 聚合酶相比，DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶产生的 PCR 产物更多、条带更清晰，并能扩增更长的片段。上图显示了人基因组 DNA 的扩增产物（160 bp、727 bp、2 kb 或 5 kb）。M: GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder；1：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶；2-6：其他供应商的热启动 DNA 聚合酶。
适用于起始材料有限的实验
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可检测低至 3 pg 的人类基因组 DNA 模板，非常适合起始材料有限或靶标 DNA 浓度低的实验。
图 7. 高灵敏度：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶相比其他供应商的热启动 DNA 聚合酶可从更低模板量实现扩增。每组 PCR 反应含 3 pg、30 pg 或 3 ng 人基因组 DNA。M: GeneRuler Express DNA Ladder；1：DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶；2-6：其他供应商的热启动 DNA 聚合酶。
对多种长度扩增子均能实现稳定高产
DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可从人基因组 DNA 中扩增高达 9 kb 的序列，从 λDNA 中扩增高达 20 kb 的片段。
图 8. 稳定可靠的扩增效果。DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可高特异性地扩增人基因组 DNA 中长达 9 kb 的片段，使用 λDNA 模板时可扩增长达 20 kb 的更长序列。M: GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder。
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。
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