简介

为了能够形成新的血管，现有血管中的内皮细胞必须降解周围的基底膜。血管受到刺激激活内皮细胞后，内皮细胞产生多种基质金属蛋白酶（MMP）–一种蛋白水解酶，可裂解基底膜的蛋白质骨架和细胞外基质，以促进细胞向细胞外空间迁移。1

试验说明

用基质入侵实验检测细胞降解基底膜的能力。  虽然它最初是为了检测肿瘤细胞的侵袭能力，但它已经被用于各种类型的细胞。  本实验采用改良的 Boyden 腔室，其中内皮细胞置于细胞培养插入物的上腔室中，该细胞培养物包含涂有基底膜提取物的细胞渗透膜。  这种提取物堵塞细胞膜的毛孔，阻止细胞迁移。  然后将含有测试剂的溶液置于细胞渗透膜下。在孵育期（4-48 小时）后，对降解基质并通过膜迁移的细胞进行染色和计数。


影响本实验的变量必须由研究者优化，包括细胞类型、细胞种子密度、基质屏障的类型和厚度、孵育时间以及被测血管生成因子的类型。  该方法具有定量、灵活、快速等优点。  然而，建立分析室是很困难的。   商业上可用的细胞培养插入物减轻了这种负担。


材料


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参考文献

  1. Park M, Kwak H, Lee H et al.(2007).  Nerve growth factor induces endothelial cell invasion and cord formation by promoting matrix metalloproteinase-2 expression through the phosphatidylinositol 3-kinase/Akt signaling pathway and AP-2 transcription factor.  J Biol Chem.282(42):30485-96.

LT168 updated 6-Oct-2011
 

仅供科研使用，不可用于诊断目的。