Endotoxin Quantitation and Removal

内毒素是与某些革兰氏阴性菌外膜相关的热稳定性脂多糖(LPS)分子。当这些细菌死亡时,细胞破裂,内毒素释放到周围环境中。内毒素是生物生产过程中的常见污染物,对组织培养中的细胞生长有害。

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选择适合的内毒素定量或去除产品

我们提供了两种试剂盒,可使用终点法变形细胞裂解物检测试剂盒准确检测蛋白质、多肽或抗体样品中的内毒素含量。与其他高通量定量试剂盒相比,这些定量试剂盒非常适合一次处理少量样品。通过存在内毒素时产生的发色信号测量样品中的内毒素浓度。可在酶标仪上于 405 nm 进行检测。使用每个试剂盒中随附的大肠杆菌内毒素标准品制作标准曲线,根据所需灵敏度在 16-36 分钟内计算内毒素含量(低至 0.01 EU / mL)。

  • 灵敏——检测限低至 0.01 EU/mL
  • 快速——在 16-36 分钟内完成检测
  • 所需样品量极少——仅需 10 μL 的蛋白质检测样品
  • 准确——每个试剂盒中的大肠杆菌O111:B4 标准品可实现内毒素准确定量
  • 多功能——405 nm 吸光度读数与常见的 ELISA 板读数仪兼容

选择适合的内毒素定量试剂盒

 Pierce LAL 发色内毒素定量试剂盒新型Pierce 发色内毒素定量试剂盒
灵敏度范围0.1 – 1.00.01 – 0.1  (高灵敏)
 0.1 – 1.0
检测时间-高浓度范围(min)1620
检测时间-低浓度范围(min)NA36
β-葡聚糖(10 ng/mL)干扰定量不干扰定量
包装规格50-次反应试剂盒30-60 和 240-次反应试剂盒
 立即订购立即订购

标准曲线

Pierce 内毒素定量试剂盒的标准曲线

图 1.Pierce 内毒素定量试剂盒的标准曲线。构建的内毒素标准曲线呈现出出色的线性,r2 = 0.99。Pierce 发色内毒素定量试剂盒在 0.01–0.1 EU/mL 之间具有较窄的标准曲线范围。标准曲线范围 0.1–1.0 EU/mL ,与内毒素标准品和变形细胞的孵育时间为 14 分钟,然后与发色底物共同孵育 6 分钟。对于较窄的范围,与内毒素标准品和变形细胞裂解物的孵育时间为 30 分钟,然后与发色底物共同孵育 6 分钟。窄范围标准品(0.01–0.1 EU/mL)的检测呈现出一致性和重现性(n = 17; CV = 3%)。

Thermo Scientific Pierce 高容量内毒素去除树脂使用修饰的 ε-poly-L-lysine [poly(ε-lysine)] 亲和配体选择性地结合并从蛋白质、多肽和抗体样品中去除内毒素。我们的离心式色谱柱可在 1 小时内将生物样品中的内毒素水平降低高达 99%,蛋白质回收率 ≥85%。Pierce 高容量内毒素去除树脂可作为散装填料来填充定制色谱柱,也可针对不同样品量进行优化,例如提供便于使用的一次性预装离心柱。

  • 高容量——结合浓度高达 2,000,000 EU/mL,可消除 >99% 的内毒素
  • 耐用——树脂最多可重复使用 10 次
  • 选择性——回收 ≥85% 的蛋白质样品
  • 高性能——可将最终 EU 浓度降低至 <5 EU / mL,符合 FDA 标准
  • 快速——我们的离心柱通常可在 1 小时内消除内毒素
  • 清洁——一次性离心柱可避免样品交叉污染
  • 优化——离心柱已针对不同的样品量进行了优化

选择适合的内毒素去除产品

 
规格离心柱离心柱离心柱Loose 树脂
柱规格 (mL)0.250.51不同
样品体积 (mL)0.5 - 11.0 - 4.02.0 - 10不同
订购5 个色谱柱5 个色谱柱5 个色谱柱10 mL
25 个色谱柱25 个色谱柱100 mL
250 mL

结合能力

表1.有效去除严重污染样品中的内毒素。Thermo Scientific Pierce 高容量内毒素去除离心柱( 0.5 mL)在一小时内可处理含有5,000 至 500,000 EU/mL(来自大肠杆菌 055:5)污染的蛋白质(2 mL,1 mg/mL BSA)。即使在最高内毒素水平下,去除率也 > 98%。

初始内毒素浓度(EU/mL)*最终内毒素浓度(EU/mL)内毒素去除效率蛋白质回收率
5,000<199.98%>90%
12,500<199.99%>90%
25,0001.2699.99%>90%
50,0007.199.99%>90%
250,0003299.98%>90%
500,0009,60099.08%>90%

蛋白质兼容性

表 2.不同分子量和等电点下各种蛋白质的内毒素去除和蛋白质回收率。 Pierce 高容量内毒素去除离心柱(0.5 mL)可处理分子量和电荷不同的蛋白质。所有样品的内毒素去除率均 >99%,蛋白质回收率 >85%。

蛋白质 (1 mg/mL)分子量(Da)等电点(pI)初始内毒素浓度(EU/mL)最终内毒素浓度(EU/mL)内毒素去除效率蛋白质回收率
细胞色素 C12,00010.610,0001.35>99.9%86%
肌红蛋白17,0006.810,0003.68>99.9%87%
牛血清白蛋白(BSA)66,0004.910,0000.80>99.9%85%
牛丙种球蛋白(BGG)150,0007.410,0004.60>99.9%92%
>99.9%
>99.9%

我们提供了两种试剂盒,可使用终点法变形细胞裂解物检测试剂盒准确检测蛋白质、多肽或抗体样品中的内毒素含量。与其他高通量定量试剂盒相比,这些定量试剂盒非常适合一次处理少量样品。通过存在内毒素时产生的发色信号测量样品中的内毒素浓度。可在酶标仪上于 405 nm 进行检测。使用每个试剂盒中随附的大肠杆菌内毒素标准品制作标准曲线,根据所需灵敏度在 16-36 分钟内计算内毒素含量(低至 0.01 EU / mL)。

  • 灵敏——检测限低至 0.01 EU/mL
  • 快速——在 16-36 分钟内完成检测
  • 所需样品量极少——仅需 10 μL 的蛋白质检测样品
  • 准确——每个试剂盒中的大肠杆菌O111:B4 标准品可实现内毒素准确定量
  • 多功能——405 nm 吸光度读数与常见的 ELISA 板读数仪兼容

选择适合的内毒素定量试剂盒

 Pierce LAL 发色内毒素定量试剂盒新型Pierce 发色内毒素定量试剂盒
灵敏度范围0.1 – 1.00.01 – 0.1  (高灵敏)
 0.1 – 1.0
检测时间-高浓度范围(min)1620
检测时间-低浓度范围(min)NA36
β-葡聚糖(10 ng/mL)干扰定量不干扰定量
包装规格50-次反应试剂盒30-60 和 240-次反应试剂盒
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标准曲线

Pierce 内毒素定量试剂盒的标准曲线

图 1.Pierce 内毒素定量试剂盒的标准曲线。构建的内毒素标准曲线呈现出出色的线性,r2 = 0.99。Pierce 发色内毒素定量试剂盒在 0.01–0.1 EU/mL 之间具有较窄的标准曲线范围。标准曲线范围 0.1–1.0 EU/mL ,与内毒素标准品和变形细胞的孵育时间为 14 分钟,然后与发色底物共同孵育 6 分钟。对于较窄的范围,与内毒素标准品和变形细胞裂解物的孵育时间为 30 分钟,然后与发色底物共同孵育 6 分钟。窄范围标准品(0.01–0.1 EU/mL)的检测呈现出一致性和重现性(n = 17; CV = 3%)。

Thermo Scientific Pierce 高容量内毒素去除树脂使用修饰的 ε-poly-L-lysine [poly(ε-lysine)] 亲和配体选择性地结合并从蛋白质、多肽和抗体样品中去除内毒素。我们的离心式色谱柱可在 1 小时内将生物样品中的内毒素水平降低高达 99%,蛋白质回收率 ≥85%。Pierce 高容量内毒素去除树脂可作为散装填料来填充定制色谱柱,也可针对不同样品量进行优化,例如提供便于使用的一次性预装离心柱。

  • 高容量——结合浓度高达 2,000,000 EU/mL,可消除 >99% 的内毒素
  • 耐用——树脂最多可重复使用 10 次
  • 选择性——回收 ≥85% 的蛋白质样品
  • 高性能——可将最终 EU 浓度降低至 <5 EU / mL,符合 FDA 标准
  • 快速——我们的离心柱通常可在 1 小时内消除内毒素
  • 清洁——一次性离心柱可避免样品交叉污染
  • 优化——离心柱已针对不同的样品量进行了优化

选择适合的内毒素去除产品

 
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柱规格 (mL)0.250.51不同
样品体积 (mL)0.5 - 11.0 - 4.02.0 - 10不同
订购5 个色谱柱5 个色谱柱5 个色谱柱10 mL
25 个色谱柱25 个色谱柱100 mL
250 mL

结合能力

表1.有效去除严重污染样品中的内毒素。Thermo Scientific Pierce 高容量内毒素去除离心柱( 0.5 mL)在一小时内可处理含有5,000 至 500,000 EU/mL(来自大肠杆菌 055:5)污染的蛋白质(2 mL,1 mg/mL BSA)。即使在最高内毒素水平下,去除率也 > 98%。

初始内毒素浓度(EU/mL)*最终内毒素浓度(EU/mL)内毒素去除效率蛋白质回收率
5,000<199.98%>90%
12,500<199.99%>90%
25,0001.2699.99%>90%
50,0007.199.99%>90%
250,0003299.98%>90%
500,0009,60099.08%>90%

蛋白质兼容性

表 2.不同分子量和等电点下各种蛋白质的内毒素去除和蛋白质回收率。 Pierce 高容量内毒素去除离心柱(0.5 mL)可处理分子量和电荷不同的蛋白质。所有样品的内毒素去除率均 >99%,蛋白质回收率 >85%。

蛋白质 (1 mg/mL)分子量(Da)等电点(pI)初始内毒素浓度(EU/mL)最终内毒素浓度(EU/mL)内毒素去除效率蛋白质回收率
细胞色素 C12,00010.610,0001.35>99.9%86%
肌红蛋白17,0006.810,0003.68>99.9%87%
牛血清白蛋白(BSA)66,0004.910,0000.80>99.9%85%
牛丙种球蛋白(BGG)150,0007.410,0004.60>99.9%92%
>99.9%
>99.9%

如何使用 Pierce Chromogenic Endotoxin Quant Kit 的说明视频

使用这种灵敏的、范围广泛的内毒素定量试剂盒测量 0.01 - 1 EU/mL 之间的内毒素污染。

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仅供科研使用,不可用于诊断目的。