转染效率，一步到位｜Lipofectamine™ 转染试剂

• 在实际实验中，转染效果不仅取决于单一试剂，更依赖于转染试剂、培养条件及应用场景的整体匹配（试剂 × 细胞 × 条件）
• 单一试剂优化往往难以兼顾效率、毒性与稳定性

基于此，我们将转染实验经典产品进行组合设计，以减少实验优化成本，帮助研究人员更高效地建立稳定且可重复的转染体系。

Lipofectamine 2000 #11668019试剂于 1999 年上市，此后引用该试剂的出版物数量稳步上升，该产品仍然是被引用次数最多的在售转染试剂之一, 其在多种细胞类型中均表现稳定，适用于 DNA、siRNA 以及共转染实验，且转染后无需换液，长期以来深受研究者信赖。针对涉及自动化系统或机器人系统的高通量应用，也可以轻松建立转染条件，是建立稳定细胞系和转染神经细胞的更佳选择。

随着实验和研究难度的不断提升，Lipofectamine 3000 #L3000015作为新一代高效转染试剂，也逐渐被研究者广泛认可。其在广泛细胞系中均可实现 DNA 的高效转染，即使面对难处理细胞类型（包括原代细胞、干细胞和癌细胞系），也能在保持较高效率的同时，对细胞作用更为温和、毒性更低。Lipofectamine 3000 在更低剂量下可获得高且稳定的转染效率（图2）。

Lipofectamine RNAiMAX   #13778150转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。目前尚无其他siRNA专用转染试剂能够在广泛的细胞系中（包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及难转染的细胞类型）提供如此简便、高效的siRNA输送效果。

在实现高效的基因抑制方面，Lipofectamine RNAiMAX试剂的表现可以轻松击败其他siRNA转染试剂。通过低至1 nM的siRNA，即可实现较高的靶标基因抑制水平（图3）。

1) Lipofectamine2000 + Lipofectamine 3000：从“常规表达”升级到“高难度表达”

当实验室既进行常规质粒表达，又涉及难转染细胞时，这种组合形成“基础 + 强化”双平台结构。

应用价值：

• 同一实验室内覆盖不同细胞模型
• 对比不同转染体系效果
• 减少因转染效率不足导致的重复实验

适合：原代细胞研究，大型质粒构建，高表达蛋白需求实验

2) Lipofectamine 2000 +Lipofectamine  RNAiMAX：DNA表达 + RNA干扰双体系并行

在许多课题中，需要同时进行过表达与基因敲低实验。该组合可同时支持质粒过表达，siRNA / miRNA 干扰，功能互补实验

应用价值：

• 构建“表达 + 沉默”双向验证模型
• 提高机制研究严谨度
• 减少不同平台更换带来的变量

3) Lipofectamine 2000  + Opti-MEM™：提升转染体系稳定性

Opti-MEM™ 为转染复合物提供更理想的缓冲环境，在降低血清干扰的同时优化脂质体-核酸复合物形成。

应用价值：

• 提高转染一致性
• 减少不同批次间效率波动
• 优化难以控制的表达差异

4) Lipofectamine 2000 + 青霉素-链霉素：保障培养体系长期稳定

在长周期表达或多次重复实验中，培养体系的稳定性往往影响转染效率。

应用价值：

• 降低污染风险
• 提高实验安全性，尤其长周期筛选实验
• 减少因细胞状态不稳定带来的表达波动

有些细胞天生“娇贵”，转染既要效率，更要存活率。

Q1：转染实验中细胞密度应该控制在多少？
通常建议在细胞汇合度约70%–90%时进行转染。过低的细胞密度可能导致细胞状态不稳定，而过高的密度可能影响核酸进入细胞，从而降低转染效率。

Q2：转染实验是否需要使用无血清培养基？
在形成转染复合物时通常建议使用无血清培养基（如Opti-MEM）。复合物加入细胞后，可以在含血清培养基中继续培养。

Q3：转染后多久可以检测基因表达？
对于瞬时转染实验，通常在转染后24–48小时即可检测目标基因表达。具体时间可能会因细胞类型和实验设计不同而有所差异。

Q4：为什么我的转染效率比较低？
转染效率受多种因素影响，例如细胞状态、细胞密度、DNA质量以及转染试剂与核酸的比例。优化这些条件通常可以显著提高转染效率。

Q5：转染后细胞出现毒性怎么办？
如果转染后细胞出现明显毒性，可以尝试降低转染试剂或核酸的用量，优化细胞密度，或者缩短转染复合物与细胞的接触时间。

Q6: Lipofectamine转染产品这么多，到底怎么选？

• 细胞转染：高效解决方案 — 浏览所有转染策略与支持工具
• 转染基础与技巧 — 赛默飞转染技术入门与常见问题（适合初级实验者）
• 转染产品选择指南 — 按 DNA/RNA 类型 & 细胞类型选合适试剂