内容总结:

  1. 磁珠提取法介绍
  2. KingFisher磁珠提取法的独特设计和优点
  3. 磁珠提取法在生命科学中的应用

演讲者:赛默飞应用专家:公杰 博士

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、分子生物学与检验实验室技术人员、医药研发与质检人员

[00:00-09:59] 核酸提取方法: 分相法和柱法流程和操作视频

[10:00-16:59] 自动提取流程: KingFisher操作视频及注意事项

[17:00-23:59] 难样品处理方法: 土壤和藻类及固定样品

[24:00-29:00] 微生物和细胞分选方法: 免疫磁珠流程及注意事项

[29:00-34:00] 蛋白实验流程: pull down和IP及回顾

学习目标:

  1. 掌握磁珠提取法的结合、清洗和洗脱流程
  2. 理解KingFisher自动化磁棒转移的操作要点
  3. 学习核酸提取在病毒、血液与种子检测中的应用
  4. 掌握免疫磁珠在微生物富集与细胞分选中的使用
  5. 理解Pull down、IP与ChIP的实验思路与步骤
  6. 学习土壤、藻类与固定样品等难样品的处理方法

基础概念:

  1. 磁珠提取法: 在高盐或酒精条件下,核酸或蛋白与表面功能化磁珠结合,通过磁力实现转移、清洗与洗脱的提取方法。
  2. KingFisher自主提取仪: 利用磁棒吸附转移磁珠,在多孔板中完成结合、清洗和洗脱的全自动系统,支持不同通量与体积。
  3. 硅胶柱离心法: 核酸在高盐/酒精条件下与硅介质结合,经离心清洗与洗脱获得核酸的经典固相提取方法。
  4. 免疫磁珠: 在磁珠表面偶联特异抗体,用于富集微生物或分选特定细胞的磁性载体。
  5. Pull down实验: 将诱饵蛋白固定在磁珠上,从复杂样品中捕获与之相互作用的蛋白进行分析。
  6. 免疫沉淀(IP/Co-IP): 用蛋白A/G磁珠固定抗体,富集目标蛋白及其复合物,用于蛋白相互作用研究。
  7. 染色质免疫沉淀(ChIP): 用抗体捕获与特定蛋白结合的DNA片段,分析转录调控与染色质状态。
  8. 噬菌体表面展示: 将外源肽/蛋白表达在噬菌体外壳上,通过磁珠选择获得与特定靶结合的克隆。