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Phire 和 Phusion 直接 PCR 预混液 |
直接 PCR 技术是一种便捷的 DNA 扩增方法，无需预先提取和纯化 DNA 即可直接从样本中进行 PCR 反应。该技术在动植物基因分型等应用中可显著节省时间和成本。我们提供 Thermo Scientific Phire 和 Phusion 直接 PCR 产品，助您以更简捷的步骤完成实验探索。针对不同样本类型有多种直接 PCR 预混液和试剂盒可供选择。
Thermo Scientific 直接 PCR 解决方案采用经过特殊改造的 Phire 和 Phusion DNA 聚合酶，这些酶具有强大的扩增能力，并能耐受未纯化样本中存在的多种 PCR 抑制剂。这两种 DNA 聚合酶均融合了一种小型 DNA 结合蛋白，使其具备更强的抑制剂耐受性、更快的扩增速度以及更高的产物得率。
直接 PCR 技术的优势：
直接 PCR 技术通过省去 DNA 纯化步骤，实现了直接从样本进行 PCR 扩增的便捷操作。该技术在动植物基因分型等应用中可显著提升工作效率并降低成本。Thermo Scientific 直接 PCR 酶的主要特点包括：
- 针对动物和人类组织、植物材料及血液样本优化的专用配方
- 实现“样本到 PCR "快速工作流程的直接方案
- 提供样本稀释和保存方案，操作更灵活
- 样本可在稀释缓冲液中保存长达四周仍适用于PCR
- 简化的工作流程支持 PCR 产物直接上样电泳。直接 PCR 预混液已预先混合电泳追踪染料和密度试剂。
图 1. 适用于多功能且高效工作流程的直接方案与稀释方案。(A) 直接方案可最大程度减少人工操作时间。(B) 稀释方案可提供工作流程的灵活性和优化空间。
视频：如何直接从未纯化的样本中进行PCR 操作
视频：如何执行直接 PCR 方案与稀释PCR 方案
基于样本类型的预混液和试剂盒
Phire 组织直接 PCR 预混液专为从动物和人体组织中进行 DNA 扩增而设计。该预混液含有 Phire 热启动 II DNA 聚合酶，并经过特殊配制，可在存在各种组织源性抑制剂的情况下进行 PCR，比如胶原蛋白、黑色素和真黑素（存在于毛发、皮肤中）或肌红蛋白（存在于肌肉中）。预混液中含有 Thermo Scientific DNA 释放添加剂，有助于从难以处理的组织中释放 DNA。
使用 Phire 组织直接 PCR 预混液对不同的人体和动物组织样本中的 DNA 片段进行扩增。小鼠（1）尾巴、（2）耳朵和（3）毛发；鸟类（4）肌肉和（5）羽毛；人类（6）头发、（7）牙齿、（8）指甲和（9）唾液；（10）斑马鱼的肌肉；以及（11）果蝇。M：Thermo Scientific O’GeneRuler Express DNA标准品，+：阳性对照反应，–：无模板对照。
白皮书： 动物友好型基因分型
应用说明： 转基因小鼠的基因分型
应用说明： 动物毛发直接 PCR 检测
技术说明： 从 FFPE 样本中直接进行 SNP 分析
参考表： 已测试的动物和人类样本
参考表： 推荐的动物和人类样本量
参考表： 果蝇和斑马鱼对照引物序列
Phire 植物直接 PCR 预混液专为直接从植物样本中扩增 DNA 而设计。该预混液含有 Phire 热启动 II DNA 聚合酶，并经过特殊配制，可用于含有植物源性抑制剂（如复杂多糖和多酚）的样本进行 PCR。
图3. 直接从不同植物的叶片和种子中扩增0.5 kb 的 DNA 片段。将0.5毫米的叶片打孔样本 (L) 或一小块研磨后的种子样本 (S) 直接放入50 μL 的 Phire Plant Direct PCR 预混液中。同时按照供应商的说明，使用K供应商的试剂盒对相同样本进行扩增。M：O’GeneRuler Express DNA标准品，+：使用纯化 DNA 的对照反应，–：无模板对照
应用说明： 从酵母细胞中进行直接 PCR
参考表： 已测试的植物样本
Phusion 血液直接 PCR 预混液专为从全血中扩增 DNA 而设计，在 PCR 反应体系中血液浓度最高可达40%。使用特殊修饰的 Phusion 热启动 II 高保真 DNA 聚合酶，能耐受血液中存在的 PCR 抑制剂以及大多数常用血液防腐剂 (例如肝素、EDTA、柠檬酸盐）。
图4. 从人类和动物血液样本中扩增 DNA。人类血液采用（1）肝素、（2）柠檬酸盐、（3）EDTA保存，或（4）储存在血卡上；（5）小鼠；（6）猫；（7）狗；（8）牛；（9）鸟；（10）羊；（11）马；以及（12）鱼。M：O’GeneRuler Express DNA Ladder，+：使用纯化 DNA 的对照反应，–：无模板对照
参考表： 已检测的血液样本
Phire 组织直接 PCR 预混液专为从动物和人体组织中进行 DNA 扩增而设计。该预混液含有 Phire 热启动 II DNA 聚合酶，并经过特殊配制，可在存在各种组织源性抑制剂的情况下进行 PCR，比如胶原蛋白、黑色素和真黑素（存在于毛发、皮肤中）或肌红蛋白（存在于肌肉中）。预混液中含有 Thermo Scientific DNA 释放添加剂，有助于从难以处理的组织中释放 DNA。
使用 Phire 组织直接 PCR 预混液对不同的人体和动物组织样本中的 DNA 片段进行扩增。小鼠（1）尾巴、（2）耳朵和（3）毛发；鸟类（4）肌肉和（5）羽毛；人类（6）头发、（7）牙齿、（8）指甲和（9）唾液；（10）斑马鱼的肌肉；以及（11）果蝇。M：Thermo Scientific O’GeneRuler Express DNA标准品，+：阳性对照反应，–：无模板对照。
白皮书： 动物友好型基因分型
应用说明： 转基因小鼠的基因分型
应用说明： 动物毛发直接 PCR 检测
技术说明： 从 FFPE 样本中直接进行 SNP 分析
参考表： 已测试的动物和人类样本
参考表： 推荐的动物和人类样本量
参考表： 果蝇和斑马鱼对照引物序列
Phire 植物直接 PCR 预混液专为直接从植物样本中扩增 DNA 而设计。该预混液含有 Phire 热启动 II DNA 聚合酶，并经过特殊配制，可用于含有植物源性抑制剂（如复杂多糖和多酚）的样本进行 PCR。
图3. 直接从不同植物的叶片和种子中扩增0.5 kb 的 DNA 片段。将0.5毫米的叶片打孔样本 (L) 或一小块研磨后的种子样本 (S) 直接放入50 μL 的 Phire Plant Direct PCR 预混液中。同时按照供应商的说明，使用K供应商的试剂盒对相同样本进行扩增。M：O’GeneRuler Express DNA标准品，+：使用纯化 DNA 的对照反应，–：无模板对照
应用说明： 从酵母细胞中进行直接 PCR
参考表： 已测试的植物样本
Phusion 血液直接 PCR 预混液专为从全血中扩增 DNA 而设计，在 PCR 反应体系中血液浓度最高可达40%。使用特殊修饰的 Phusion 热启动 II 高保真 DNA 聚合酶，能耐受血液中存在的 PCR 抑制剂以及大多数常用血液防腐剂 (例如肝素、EDTA、柠檬酸盐）。
图4. 从人类和动物血液样本中扩增 DNA。人类血液采用（1）肝素、（2）柠檬酸盐、（3）EDTA保存，或（4）储存在血卡上；（5）小鼠；（6）猫；（7）狗；（8）牛；（9）鸟；（10）羊；（11）马；以及（12）鱼。M：O’GeneRuler Express DNA Ladder，+：使用纯化 DNA 的对照反应，–：无模板对照
参考表： 已检测的血液样本
Phire 和 Phusion 直接 PCR 试剂盒及预混液：选择指南
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 Phire 组织直接 PCR 预混液 Order here |  Phire 动物组织直接 PCR 试剂盒 (不含采样工具) Order here | |
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 Phire 植物直接 PCR 预混液 Order here |  Phire 植物直接 PCR 试剂盒 (不含采样工具) Order here | |
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Phusion 血液直接 PCR 试剂盒 Order here | ||
动物和人类样本
植物样本
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。
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