使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒进行 RNA 快速提取

PureLink RNA小提试剂盒带红白包装盒,内含试剂和试管

Invitrogen PureLink RNA 小提试剂盒可以通过柱式纯化法从多种细胞和组织类型中快速纯化总 RNA。兼容的细胞和组织类型包括哺乳动物细胞,植物细胞,酵母细胞,细菌和血液。

  • 在 20 分钟内快速提取获得高品质 RNA
  • 提取一次可获得多达 1000 μg的纯化 RNA
  • 无需进行有害的有机(酚/氯仿) 裂解法提取
     

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PureLink RNA 小量提取试剂盒至 qPCR 流程

使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒从组织培养细胞中纯化的 RNA 随即便可进行 RT-PCR 及后续使用金标准 Applied Biosystems TaqMan 基因表达检测进行的 qPCR 下游分析。使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒分离的 RNA 进行基因表达分析 qPCR 的流程示例 图 1

图1.PureLink RNA 小量提取试剂盒至 qPCR 的流程示例。该流程始于使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒从组织培养物中分离 RNA。样本中提取获得的总 RNA 随后可用于使用ProFlex PCR 系统进行的 RT-PCR。使用 TaqMan 检测来测量样本之间 RNA 的相对量, 再使用QuantStudio 7 Pro 实时 PCR 系统进行 qPCR。

使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒可以从 100 万个细胞中提取多少 RNA ?

根据细胞或样本类型及起始量,PureLink RNA 小量提取试剂盒的平均提取得率为 1.8–350 µg 每个样本(表 1)。查看表 2中与 PureLink RNA 小量提取试剂盒兼容的细胞/样本类型列表。 

表 1.使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒从各种样本中获得的总 RNA 的平均得率

样本类型样本起始量平均得率 (μg)
动物细胞HeLa 细胞1 x 106 个细胞15-20
293细胞1 x 106 个细胞20-25

动物组织

大鼠肝脏10 mg
100 mg
60
300
大鼠大脑10 mg
100 mg
6
90
大鼠脾脏10 mg
100 mg
58
320
小牛胸腺10 mg
100 mg
58
350
植物组织拟南芥属100 mg26
小麦100 mg31
玉米100 mg36
大米100 mg37
紫花苜蓿100 mg32
大豆100 mg38
甜菜100 mg
31
200 mg65
酵母菌细胞

酿酒酵母

1 x 107
1.8
5 x 108125

表2.与 PureLink RNA小量提取试剂盒兼容的样品量

来源用量
动物和植物细胞至多5 x 107个细胞
动物组织至多 200 mg
细菌细胞至多109个细胞
植物组织至多 250 mg
全血至多 0.2 mL
酵母菌细胞至多5 x 108个细胞

使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒进行高品质的 RNA 提取

柱式纯化试剂盒适用于总 RNA、mRNA、miRNA、小 RNA、病毒 RNA 和序列特异性 RNA 的提取。使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒分离的总 RNA 可用于多种需要高品质总 RNA 的下游应用(图 2)。此类下游应用包括:

  • 微阵列分析
  • 二代测序(NGS)
  • Northern 印迹
  • 核酸酶保护实验
  • qPCR
  • 实时 PCR
  • cDNA 文库构建和合成

如果需要去除残留 DNA, PureLink RNA 小量提取试剂盒提供柱上处理,以节省时间和保留珍贵的 RNA 样本,或使用 PureLink DNase 套装进行分离后 DNase 处理。

使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒的硅胶基质纯化方案

PureLink RNA快速提取技术结合了无毒裂解与硅胶膜纯化柱式RNA 纯化的速度、纯度和易用性。安全且简易的 RNA 纯化过程可以在 20 分钟内完成,可以从小到中等规模的起始物料中提取获得高品质的总 RNA,且无基因组 DNA 污染。

视频:PureLink RNA 小量提取试剂盒方案

使用PureLink RNA Mini试剂盒分离RNA

仅供科研使用,不可用于诊断目的。