GST-tagged Fusion Protein Purification

将还原型谷胱甘肽 (GSH) 固定后作为琼脂糖或其他色谱载体的配体时，可对表达为谷胱甘肽 S 转移酶 (GST) 融合的重组蛋白进行高得率和高质量纯化。GST 融合蛋白纯化具有高得率，因为12原子 GSH 连接子极大程度减小了空间位阻。我们提供多种形式的谷胱甘肽磁珠和琼脂糖树脂，可满足高通量筛选、批量、中试和工艺纯化等多种需求。Superflow 琼脂糖树脂已经过广泛的化学表征。

  • 形式更多样——磁珠、磁性琼脂糖、松散树脂、离心柱和试剂盒、FPLC 纯化柱和96孔过滤板，实现从微克到千克规模的融合蛋白纯化。
  • 性能卓越——树脂旨在更大程度提高蛋白得率和降低背景水平。
  • 经济实惠——价格与其他供应商接近或更优惠。

选择一种 GST 标签融合蛋白纯化产品

产品类型Pierce 谷胱甘肽琼脂糖磁珠Pierce 谷胱甘肽琼脂糖树脂Pierce 谷胱甘肽 Superflow 树脂
微珠或树脂尺寸10–40 μm45–165 μm60–160 μm
静态结合容量≥12 mg/mL~40 mg/mL~30 mg/mL
动态结合容量*不适用~10.5 mg/mL~10 mg/mL
最大线性流速*不适用800 cm/hr1,200 cm/hr
载体磁石嵌入型 6% 微珠状琼脂糖6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 微珠状琼脂糖
重复使用次数0525
可选产品形式松散微珠松散微珠、预装离心柱和试剂盒、色谱纯化柱松散微珠
推荐的应用规模高通量批量批量、中试批量、中试、工艺
订购产品7860116100（松散树脂）
16109（1 mL 纯化柱）
16110（5 mL 纯化柱）
16111（离心板）		25236

其他 Pierce 谷胱甘肽琼脂糖产品

树脂产品形式每柱所需树脂柱尺寸收集管尺寸货号
谷胱甘肽离心柱0.2 mL0.8 mL微量离心16103
谷胱甘肽离心柱1 mL2 mL15 mL（锥形）16104
谷胱甘肽离心柱3 mL10 mL50 mL（锥形）16105
谷胱甘肽离心柱试剂盒0.2 mL0.8 mL微量离心16106
谷胱甘肽离心柱试剂盒1 mL2 mL15 mL（锥形）16107
谷胱甘肽离心柱试剂盒3 mL10 mL50 mL（锥形）16108

产品特征数据

Comparison of protein yield and purity between Pierce Glutathione Magnetic Agarose and products from other suppliers.
Pierce 谷胱甘肽磁性琼脂糖和其他供应商产品的蛋白得率和纯度比较。用 0.25 mL 结合缓冲液稀释三种蛋白质（GST 绿色海肾荧光素酶、GST-RalGDS 和 GST 蛋白 A/G）的样本 (0.25 mL) 并用 25 µL 沉淀微珠进行手动纯化。有关缓冲液成分和体积，遵循各自供应商的实验方案。使用新鲜裂解液重复实验时，得率低于之前的纯化方法（冰箱出现故障，裂解液可能已经解冻）。Pierce 磁性琼脂糖的得率更高，且纯度与其他供应商的微珠类似。
Large-scale FPLC purification of GST produces greater than 98% purity of target protein.

对 GST 进行大规模 FPLC 纯化得到纯度 >98% 的靶蛋白。使用 1.7 L 裂解缓冲液裂解含过表达量 GST 的生物体团块 (170 g)。然后，将 0.75 L 裂解液上样到经过平衡处理的 200 mL Thermo Scientific Pierce 谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖（左）或谷胱甘肽 Sepharose™ 4 Fast Flow（GE Healthcare；货号 17-5132-03，右）色谱柱 (50 mm x 100 mm) 中，线性流速为 30 cm/hr。用结合缓冲液洗涤色谱柱，直到 UV280 达到基线；然后用洗脱缓冲液洗脱结合蛋白，并合并包含纯化 GST 的组分。通过 SDS-PAGE 分离等份上样液、流穿液、洗涤液和洗脱液组分，然后用 Thermo Scientific Imperial 蛋白染色剂（货号24615）染色，并使用 Thermo Scientific myImageAnalysis 软件（货号62237）进行评价以测定纯度。两种树脂的总得率、回收率和纯度相似。

相关资源

仅供科研使用，不可用于诊断目的。