Search
Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶 |
产品优势
- 卓越的准确度 ——经NGS测序鉴定，其保真度高出 Taq 保真度 300 倍以上
- 简化的实验流程——缓冲液经优化可使用60°C的通用引物退火温度（无需计算 Tm）
- 增强的 PCR 成功率——高效扩增高 GC 含量靶标、纯度不佳的 DNA 和长片段序列
- 兼容自动化——Invitrogen Platinum 热启动技术可确保反应体系配制后24小时的室温稳定性
- 减少移液步骤——可提供含或不含上样染液的预混液
观看视频了解 DNA 聚合酶的保真度、酶保真度测量方法，以及在 PCR 中使用高保真 DNA 聚合酶的优势。
观看视频了解 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的优势。
了解我们对酶卓越品质的执着追求，其中包括 Platinum DNA 聚合酶卓越的可靠性和高保真度，它们正引领着科学探索的前行之路。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的优势
>300x Taq高保真度
Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶错配率极低，可确保DNA 序列的高度准确性。经 NGS 检测，Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的相对 保真度 超过 Taq DNA 聚合酶的 300 倍。
图 1. 市面上商业供应PCR酶相对于 Taq 酶的保真度比较。 使用不同的 DNA 聚合酶通过 PCR 扩增 3.9kb 的序列，然后用 MuA 转座酶将得到的 PCR 扩增子片段化。在片段化过程中引入了由 12 个随机核苷酸组成的独特分子标签（UMI），以单独标记每个产物。经NGS测序后，将reads与正确序列比对，按照UMI 分组，以此发现扩增中的错误。只有当错误出现在同一UMI标记的所有reads中时，错误才得以识别确认；否则将作为测序错误而被丢弃。以 Taq DNA 聚合酶作为标准来衡量聚合酶的保真度。
60°C 通用引物退火
Platinum SuperFi II 缓冲液的独特配方有助于减少 PCR 中繁琐的优化步骤。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶时，不再需要计算退火步骤的引物解链温度。按照一般的引物设计规则（图 2）得到的引物，无论引物序列如何，该创新的缓冲液均能够实现使用60°C的统一引物退火温度。当然如果在退火步骤中使用自己计算的 Tm 时，该缓冲液同样能确保成功进行扩增（数据未显示）。
图2.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。使用不同退火温度的引物对在 60°C 退火温度下从 50ng 人基因组 DNA中扩增 12 个靶标。所使用的分子量标准为是 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。以上用于 Platinum SuperFi DNA 聚合酶的退火温度是经使用 Tm 计算器计算得到的。
了解退火步骤在 PCR 中的重要性、如何使用特殊 PCR 缓冲液避免反应优化，以及缓冲液使用通用退火温度的优势。
通用扩增方案
由于使用创新型的反应缓冲液，Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶可使用通用的退火温度和灵活的延长时间，实现多个PCR反应的同时扩增。
图 3.借助通用 PCR 扩增方案节约时间和实现不同PCR反应的同时扩增。 使用一般的PCR 试剂，扩增每个 DNA 片段都需要特定的扩增方案，这是由于需要不同的引物退火温度和延伸步骤；因此，在同一次 PCR 运行中通常不能将多个靶标一起进行扩增。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶，可以使用一种通用扩增方案将不同的 PCR反应同时进行扩增，该扩增方案使用60°C通用引物退火温度和按最长片段计算的延伸时间（ 图 4 ）。
图 4.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可以实现短片段和长片段的同时扩增。从 100 ng 人类基因组 DNA 中扩增 0.7 kb、2.0 kb、4.8 kb 和 14 kb 片段，均使用相同的扩增方案：98℃ 变性 10 秒，60℃ 退火 10 秒，72℃ 延伸 7 分钟。 延伸时间基于最长片段进行计算。
直接凝胶上样电泳
Platinum SuperFi II Green PCR 预混液 可实现 PCR 产物直接上样电泳，省去了 PCR 样品中加染料的环节，且有助于减少移液错误。绿色缓冲液与下游实验应用相兼容，包括 DNA 测序、 连接和限制性酶切 。
图 5.绿色预混液可实现 PCR 产物直接加样至凝胶中进行分析。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的预混液可提供含绿色缓冲液的形式，其中包含一种密度试剂和两种示踪染料。借助两种染料（蓝色和黄色），可以在电泳过程中轻松地观察 DNA 条带的迁移（如右图电泳5 分钟和 15 分钟的泳道）。
>300x Taq高保真度
Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶错配率极低，可确保DNA 序列的高度准确性。经 NGS 检测，Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的相对 保真度 超过 Taq DNA 聚合酶的 300 倍。
图 1. 市面上商业供应PCR酶相对于 Taq 酶的保真度比较。 使用不同的 DNA 聚合酶通过 PCR 扩增 3.9kb 的序列，然后用 MuA 转座酶将得到的 PCR 扩增子片段化。在片段化过程中引入了由 12 个随机核苷酸组成的独特分子标签（UMI），以单独标记每个产物。经NGS测序后，将reads与正确序列比对，按照UMI 分组，以此发现扩增中的错误。只有当错误出现在同一UMI标记的所有reads中时，错误才得以识别确认；否则将作为测序错误而被丢弃。以 Taq DNA 聚合酶作为标准来衡量聚合酶的保真度。
60°C 通用引物退火
Platinum SuperFi II 缓冲液的独特配方有助于减少 PCR 中繁琐的优化步骤。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶时，不再需要计算退火步骤的引物解链温度。按照一般的引物设计规则（图 2）得到的引物，无论引物序列如何，该创新的缓冲液均能够实现使用60°C的统一引物退火温度。当然如果在退火步骤中使用自己计算的 Tm 时，该缓冲液同样能确保成功进行扩增（数据未显示）。
图2.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。使用不同退火温度的引物对在 60°C 退火温度下从 50ng 人基因组 DNA中扩增 12 个靶标。所使用的分子量标准为是 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。以上用于 Platinum SuperFi DNA 聚合酶的退火温度是经使用 Tm 计算器计算得到的。
了解退火步骤在 PCR 中的重要性、如何使用特殊 PCR 缓冲液避免反应优化，以及缓冲液使用通用退火温度的优势。
通用扩增方案
由于使用创新型的反应缓冲液，Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶可使用通用的退火温度和灵活的延长时间，实现多个PCR反应的同时扩增。
图 3.借助通用 PCR 扩增方案节约时间和实现不同PCR反应的同时扩增。 使用一般的PCR 试剂，扩增每个 DNA 片段都需要特定的扩增方案，这是由于需要不同的引物退火温度和延伸步骤；因此，在同一次 PCR 运行中通常不能将多个靶标一起进行扩增。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶，可以使用一种通用扩增方案将不同的 PCR反应同时进行扩增，该扩增方案使用60°C通用引物退火温度和按最长片段计算的延伸时间（ 图 4 ）。
图 4.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可以实现短片段和长片段的同时扩增。从 100 ng 人类基因组 DNA 中扩增 0.7 kb、2.0 kb、4.8 kb 和 14 kb 片段，均使用相同的扩增方案：98℃ 变性 10 秒，60℃ 退火 10 秒，72℃ 延伸 7 分钟。 延伸时间基于最长片段进行计算。
直接凝胶上样电泳
Platinum SuperFi II Green PCR 预混液 可实现 PCR 产物直接上样电泳，省去了 PCR 样品中加染料的环节，且有助于减少移液错误。绿色缓冲液与下游实验应用相兼容，包括 DNA 测序、 连接和限制性酶切 。
图 5.绿色预混液可实现 PCR 产物直接加样至凝胶中进行分析。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的预混液可提供含绿色缓冲液的形式，其中包含一种密度试剂和两种示踪染料。借助两种染料（蓝色和黄色），可以在电泳过程中轻松地观察 DNA 条带的迁移（如右图电泳5 分钟和 15 分钟的泳道）。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的强劲扩增能力
由于酶的强劲扩增能力和出色的热启动技术，Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可高产量地、高特异性地扩增多种不同长度的片段。基于抗体的 Platinum 热启动技术在最初的 PCR 变性步骤之前抑制酶的活性，防止非特异性扩增和引物降解，同时可确保目的片段的高产量扩增。
图 6.适用于扩增多种不同长度的片段Platinum SuperFi II DNA 聚合酶（左侧泳道）可高产量和高特异性地从 100 ng 人类基因组 DNA 扩增 0.3 kb 至 14 kb 的DNA 片段。同时使用其他 DNA 聚合酶扩增相同的靶标。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的高灵敏度可以实现低丰度 DNA 模板的检测，并获得准确的扩增结果。在起始材料有限或样品中目标 DNA 浓度较低的实验中，DNA聚合酶的高灵敏度是非常有利的。
图 7.从少量起始 DNA 中实现高灵敏度和可靠的扩增。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶（左侧泳道）可分别从 0.4 ng、2 ng、10 ng、50 ng 和 250 ng 人基因组 DNA中稳定扩增一个 2 kb 的片段（模板量显示在每个泳道上方）。同时使用其它DNA 聚合酶扩增相同的靶标。预估的拷贝数约为每 0.4ng 人类基因组 DNA 中100 个拷贝。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶经设计含有 DNA 结合结构域，从而实现高持续合成能力，并增强对常见 PCR 抑制剂的耐受性，如氯化血红素（红细胞成分）、木聚糖（植物生物聚合物）和腐殖酸（土壤）。
图 8.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶显示出对常见 PCR 抑制剂的高度耐受性。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和其他高保真 DNA 聚合酶从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 2 kb 人类基因组 DNA 片段。反应混合物中包含 1—无抑制剂，2—腐植酸（4 µg/mL），3—血红素（20 µM），或者 4—胆盐（1 mg/mL）。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的室温稳定性得到增强，可实现高通量PCR扩增。其卓越的 Platinum 热启动技术可实现室温稳定性和酶的高特异性。
图 9.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶配制的反应体系可在室温下保持稳定。从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出一个 0.5 kb 的片段。配制 PCR 反应体系，并在室温下放置 0 小时和 24 小时，然后再通过Applied Biosystems ProFlex 热循环仪进行扩增。可以看到，即使在室温下放置 24 小时后，Platinum SuperFi II DNA 聚合酶（泳道 P）也能获得高特异性和高产量的扩增结果。同时使用其它 DNA 聚合酶进行同样的实验。所使用的分子量标准是 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶对不同类型模板进行 PCR扩增
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶由于其酶的强扩增能力和使用特殊的缓冲液，可以高特异性地扩增各种序列。Platinum SuperFi II 缓冲液可扩增高 GC 含量的靶标，而无需添加 DNA 解链添加剂。
图 10.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶强劲扩增富含 AT 和 GC 的靶标。从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 15 个具有不同 GC 含量的靶标，而未添加任何有助于 DNA 变性的添加剂。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
图 11.强劲扩增富含 GC 的靶标。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可对高GC含量靶标进行高特异性和高产量的扩增（左侧泳道），而未添加任何 DNA 解链添加剂。从 50 ng 人基因组 DNA 中扩增出四个富含 GC 的片段（长度分别为 0.74 kb、0.58 kb、0.71 kb 和 0.72 kb；GC 含量如上标注）。根据制造商推荐的用于高 GC 含量模板的 PCR 扩增方案，使用同类DNA 聚合酶同时扩增相同的靶标。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
由于其 高持续合成能力 和极低的错配率，Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶是准确扩增长片段（长达 20 kb）的理想选择，其还可扩增更长的靶标（长达 40 kb），但可能需要进行一些优化，例如使用高质量的模板（纯净、新鲜和完整的模板）和新鲜的引物溶液。将引物浓度降低至 0.2 μM 也可以改善PCR扩增结果。
图 12.长片段扩增。使用Platinum SuperFi II DNA 聚合酶（泳道 P）成功地从 200 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 20 kb 的靶标。使用相同的引物对，同类DNA 聚合酶也进行了测试。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
图 13.扩增 >20 kb片段。使用Platinum SuperFi II DNA 聚合酶（泳道P）从 50 ng 的大肠杆菌基因组 DNA 中成功扩增出 30 kb 的靶标和 40 kb 的靶标。使用相同的引物对，同类DNA 聚合酶也进行了测试。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。
图 14.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶对不同浓度模板进行多重 PCR扩增。从 2.5 ng、25 ng 和 250 ng 人类基因组 DNA 中（模板量显示在每个泳道上方）同时扩增15 个靶标（99 bp；131 bp；160 bp；199 bp；251 bp；300 bp；345 bp；400 bp；516 bp；613 bp；735 bp；908 bp；1,005 bp；1,190 bp；和 1,606 bp）。所使用的分子量标记为 TrackIt 100 bp DNA Ladder。
由于具有高特异性和高抑制剂耐受性，Platinum SuperFi II DNA 聚合酶能够高效扩增质量不佳的 DNA 模板，如福尔马林固定的石蜡包埋（FFPE）样本。
图 15.对FFPE 样本 DNA 的扩增。对于使用Invitrogen RecoverAll FFPE 总核酸分离试剂盒提取的 10 ng 小鼠 FFPE DNA， Platinum SuperFi II DNA聚合酶可从中成功扩增长达 0.4 kb 的片段。所使用分子量标记为 TrackIt 100 bp DNA Ladder。
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和 Platinum SuperFi DNA 聚合酶之间的差异
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的缓冲液中含有共稳定组分。这种独特的缓冲液成分带来了多种优势：不需要计算引物的Tm，对富含 GC 靶标的扩增能力更强，可扩增更长的片段，以及可使用 通用 PCR 扩增方案 更适合高通量 PCR扩增（ 表 1 ）。
表 1.Platinum SuperFi II 和 Platinum SuperFi DNA 聚合酶之间的比较。
| Platinum SuperFi II DNA 聚合酶 | Platinum SuperFi DNA 聚合酶 | |
|---|---|---|
| 保真度（vs. Taq） | 超出 300 倍 | 超出 300 倍 |
| 热启动修饰 | 是 | 是 |
| 需要Tm 计算器 | 否（60°C 下引物退火） | 是 |
| 通用 PCR 扩增方案 | 是 | 否 |
| 高 GC 含量模板扩增 | 是（无需 GC enhancer） | 是（推荐 GC enhancer） |
| 长片段扩增 | 长达 20 kb（性能得到增强） | 长达 20 kb |
| 室温稳定性 | 长达 24 小时 | 长达 24 小时 |
| 抑制剂耐受性 | 高 | 高 |
| 扩增子的 3’ 端 | 平末端 | 平末端 |
| 残留 DNA（每 50 μL rxn） | ≤1 个细菌 DNA拷贝≤ 0.3 个人类 DNA 拷贝 | ≤1 个细菌 DNA 拷贝 ≤ 0.2 个人类 DNA 拷贝 |
Platinum SuperFi DNA 聚合酶：文献引用
Platinum SuperFi DNA 聚合酶在多篇同行评审的研究论文中被高频引用。在2019至2024年的五年间，其被引次数已突破5,000次。
| 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|
| 在进行 ddPCR 之前，对 FFPE 和细针穿刺活检的患者样本中的 DNA 进行扩增。 | Maeda C, Ono Y, Hayashi A et al. (2023) Multiplex digital PCR assay to detect multiple KRAS and GNAS mutations associated with pancreatic carcinogenesis from minimal specimen amounts. J Mol Diagn 25(6):367–377. doi: 10.1016/j.jmoldx.2023.02.007 PMID: 36965665 |
| 对经修饰细胞的 DNA 进行扩增，以验证 CRISPR 修饰效果。 | Lumaquin-Yin D, Montal E, Johns E et al. (2023) Lipid droplets are a metabolic vulnerability in melanoma. Nat Commun 14(1):3192. doi: 10.1038/s41467-023-38831-9 PMID: 37268606 |
| 对 CRISPR 编辑细胞的 DNA 进行扩增。通过琼脂糖凝胶电泳和 Sanger 测序对 PCR 产物进行分析。 | Lee SCS, Pyo AHA, Mohammadi H et al. (2024) Cysteamine dioxygenase (ADO) governs cancer cell mitochondrial redox homeostasis through proline metabolism. Sci Adv 10(40):eadq0355. doi: 10.1126/sciadv.adq0355 PMID: 39356760 |
| 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|
| 从纯化的 DNA 中检测病毒；扩增后的 DNA 通过牛津纳米孔技术进行测序。 | Licheri M, Licheri MF, Mehinagic K et al. (2024) Multiplex PCR approach for rapid African swine fever virus genotyping. Viruses 16(9):1460. doi: 10.3390/v16091460 PMID: 39339936 |
| 从病毒 RNA 中扩增 cDNA；扩增产物经过测序和克隆。 | Reddy N, Papathanasopoulos M, Steegen K et al. (2024) K103N, V106M and Y188L significantly reduce HIV-1 subtype C phenotypic susceptibility to doravirine. Viruses 16(9):1493. doi: 10.3390/v16091493 PMID: 39339969 |
| 用于对现有表达荧光素酶报告基因的重组 SARS-CoV-2 病毒进行定点突变。 | Rodriguez L, Lee HW, Li J et al. (2024) SARS-CoV-2 resistance analyses from the Phase 3 PINETREE study of remdesivir treatment in nonhospitalized participants. Antimicrob Agents Chemother e0123824. doi: 10.1128/aac.01238-24 PMID: 39699245 |
| 扩增甲烷八叠球菌球形病毒（Methanosarcina spherical virus）的染色体；也用于该病毒的定点诱变。 | Gehlert FO, Weidenbach K, Barüske B et al. (2023) Newly established genetic system for functional analysis of MetSV. Int J Mol Sci 24(13):11163. doi: 10.3390/ijms241311163 PMID: 37446343 |
| 研究领域 | 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 干细胞 – 神经科学 | 从患者来源的干细胞中扩增线粒体 DNA，以构建测序文库。 | Wu YT, Tay HY, Yang JT et al. (2023) Mitochondrial impairment and synaptic dysfunction are associated with neurological defects in iPSCs-derived cortical neurons of MERRF patients. J Biomed Sci 30(1):70. doi: 10.1186/s12929-023-00966-8 PMID: 37605213 |
| 干细胞 – 免疫学、移植 | 扩增长片段靶标进行测序，以验证基因编辑效果和切割效率。 | Frederiksen HRS, Skov S, Tveden-Nyborg P et al. (2024) Novel traceable CRISPR-Cas9 engineered human embryonic stem cell line (E1C3 + hSEAP + 2xKO + pCD47), has potential to evade immune detection in pigs. Stem Cell Res 77:103438. doi: 10.1016/j.scr.2024.103438 PMID: 38776701 |
| 合成生物学 | 用于对 DNA 进行条形码标记，以构建纳米孔测序文库。 | Rix G, Williams RL, Hu VJ et al. (2024) Continuous evolution of user-defined genes at 1 million times the genomic mutation rate. Science 386(6722):eadm9073. doi: 10.1126/science.adm9073 PMID: 39509492 |
| 治疗性抗体开发 | 在测序前从表达抗体的细胞中扩增基因组 DNA，以验证表达情况。 | Adams AC, Grav LM, Ahmadi S et al. (2024) Single-batch expression of an experimental recombinant snakebite antivenom based on an oligoclonal mixture of human monoclonal antibodies. Biotechnol J 19(10):e202400348. doi: 10.1002/biot.202400348 PMID: 39380504 |
| 单克隆抗体制备 | 扩增用于重组抗体生产的克隆片段。 | Ende Z, Mishina M, Kauffman RC et al. (2024) Human monoclonal antibody cloning and expression with overlap extension PCR and short DNA fragments. J Immunol Methods 534:113768. doi: 10.1016/j.jim.2024.113768 PMID: 39447635 |
| 抗体制备 | 从低起始量细胞样本中扩增基因组 DNA，用于 CRISPR 和细胞系验证。 | Woo HJ, Kim J, Kim SM et al. (2024) Context-dependent genomic locus effects on antibody production in recombinant Chinese hamster ovary cells generated through random integration. Comput Struct Biotechnol J 23:1654–1665. doi: 10.1016/j.csbj.2024.04.023 PMID: 38680870 |
| 研究领域 | 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 农业 | 从蜱幼虫中扩增基因组 DNA，以构建测序文库，用于识别与杀螨剂抗性相关的突变。 | Heylen DJA, Labuschagne M, Meiring C et al. (2024) Phenotypic and genotypic characterization of acaricide resistance in Rhipicephalus microplus field isolates from South Africa and Brazil. Int J Parasitol Drugs Drug Resist 24:100519. doi: 10.1016/j.ijpddr.2023.100519 PMID: 38168594 |
| 水产养殖 | 从感染牡蛎的某种细菌中扩增细菌 DNA。以粗裂解液为模板，通过琼脂糖凝胶电泳和 Sanger 测序对扩增出的 DNA 进行检测。 | Oyanedel D, Rojas R, Brokordt K et al. (2023) Crassostrea gigas oysters from a non-intensive farming area naturally harbor potentially pathogenic Vibrio strains. J Invertebr Pathol 196:107856. doi: 10.1016/j.jip.2022.107856 PMID: 36414122 |
| 生态学 | 基于 Platinum SuperFi II 预混液和蜱虫幼虫粗提裂解液，开发了现场 qPCR 检测方法；PCR 产物通过测序进行验证。 | Meiring C, Labuschagne M (2024) Using QUASR-PCR as a field-based genotyping assay for a tick acaricide resistance marker. Sci Rep 14(1):13584. doi: 10.1038/s41598-024-64401-0 PMID: 38866908 |
| 代谢 | 从人类基因组 DNA 中扩增涵盖 ER-α 结合元件（-112 至 + 371 bp）的区域。将 PCR 产物克隆到荧光素酶报告载体中。 | Cherubini A, Ostadreza M, Jamialahmadi O et al. (2023) Interaction between estrogen receptor-α and PNPLA3 p.I148M variant drives fatty liver disease susceptibility in women. Nat Med 29(10):2643–2655. doi: 10.1038/s41591-023-02553-8 PMID: 37749332 |
| 微生物 | 从微藻中扩增核糖体 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，并将其用于 NGS 文库的构建。 | Hosseini H, Saadaoui I, Cherif M et al. (2024) Exploring the dynamics of algae-associated microbiome during the scale-up process of Tetraselmis sp. microalgae: A metagenomics approach. Bioresour Technol 393:129991. doi: 10.1016/j.biortech.2023.129991 PMID: 37949148 |
| 微生物学 | 从皮肤微生物群中扩增 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，并将其用于文库构建。 | Mills JG, Selway CA, Thomas T et al. (2023) Schoolyard biodiversity determines short-term recovery of disturbed skin microbiota in children. Microb Ecol 86(1):658–669. doi: 10.1007/s00248-022-02052-2 PMID: 35689685 |
| 肾脏病学 | 扩增 cDNA 并在 DNA 模板上添加限制性酶切位点以用于克隆。该酶还被用于构建突变体载体。 | Niedbalska-Tarnowska J, Jakubowska A, Majkowski M et al. (2024) Case-inspired exploration of renin mutations in autosomal dominant tubulointerstitial kidney disease: Not all paths lead to the endoplasmic reticulum. Pediatr Nephrol 39(8):2363–2375. doi: 10.1007/s00467-024-06350-4 PMID: 38520530 |
| 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|
| 在进行 ddPCR 之前，对 FFPE 和细针穿刺活检的患者样本中的 DNA 进行扩增。 | Maeda C, Ono Y, Hayashi A et al. (2023) Multiplex digital PCR assay to detect multiple KRAS and GNAS mutations associated with pancreatic carcinogenesis from minimal specimen amounts. J Mol Diagn 25(6):367–377. doi: 10.1016/j.jmoldx.2023.02.007 PMID: 36965665 |
| 对经修饰细胞的 DNA 进行扩增，以验证 CRISPR 修饰效果。 | Lumaquin-Yin D, Montal E, Johns E et al. (2023) Lipid droplets are a metabolic vulnerability in melanoma. Nat Commun 14(1):3192. doi: 10.1038/s41467-023-38831-9 PMID: 37268606 |
| 对 CRISPR 编辑细胞的 DNA 进行扩增。通过琼脂糖凝胶电泳和 Sanger 测序对 PCR 产物进行分析。 | Lee SCS, Pyo AHA, Mohammadi H et al. (2024) Cysteamine dioxygenase (ADO) governs cancer cell mitochondrial redox homeostasis through proline metabolism. Sci Adv 10(40):eadq0355. doi: 10.1126/sciadv.adq0355 PMID: 39356760 |
| 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|
| 从纯化的 DNA 中检测病毒；扩增后的 DNA 通过牛津纳米孔技术进行测序。 | Licheri M, Licheri MF, Mehinagic K et al. (2024) Multiplex PCR approach for rapid African swine fever virus genotyping. Viruses 16(9):1460. doi: 10.3390/v16091460 PMID: 39339936 |
| 从病毒 RNA 中扩增 cDNA；扩增产物经过测序和克隆。 | Reddy N, Papathanasopoulos M, Steegen K et al. (2024) K103N, V106M and Y188L significantly reduce HIV-1 subtype C phenotypic susceptibility to doravirine. Viruses 16(9):1493. doi: 10.3390/v16091493 PMID: 39339969 |
| 用于对现有表达荧光素酶报告基因的重组 SARS-CoV-2 病毒进行定点突变。 | Rodriguez L, Lee HW, Li J et al. (2024) SARS-CoV-2 resistance analyses from the Phase 3 PINETREE study of remdesivir treatment in nonhospitalized participants. Antimicrob Agents Chemother e0123824. doi: 10.1128/aac.01238-24 PMID: 39699245 |
| 扩增甲烷八叠球菌球形病毒（Methanosarcina spherical virus）的染色体；也用于该病毒的定点诱变。 | Gehlert FO, Weidenbach K, Barüske B et al. (2023) Newly established genetic system for functional analysis of MetSV. Int J Mol Sci 24(13):11163. doi: 10.3390/ijms241311163 PMID: 37446343 |
| 研究领域 | 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 干细胞 – 神经科学 | 从患者来源的干细胞中扩增线粒体 DNA，以构建测序文库。 | Wu YT, Tay HY, Yang JT et al. (2023) Mitochondrial impairment and synaptic dysfunction are associated with neurological defects in iPSCs-derived cortical neurons of MERRF patients. J Biomed Sci 30(1):70. doi: 10.1186/s12929-023-00966-8 PMID: 37605213 |
| 干细胞 – 免疫学、移植 | 扩增长片段靶标进行测序，以验证基因编辑效果和切割效率。 | Frederiksen HRS, Skov S, Tveden-Nyborg P et al. (2024) Novel traceable CRISPR-Cas9 engineered human embryonic stem cell line (E1C3 + hSEAP + 2xKO + pCD47), has potential to evade immune detection in pigs. Stem Cell Res 77:103438. doi: 10.1016/j.scr.2024.103438 PMID: 38776701 |
| 合成生物学 | 用于对 DNA 进行条形码标记，以构建纳米孔测序文库。 | Rix G, Williams RL, Hu VJ et al. (2024) Continuous evolution of user-defined genes at 1 million times the genomic mutation rate. Science 386(6722):eadm9073. doi: 10.1126/science.adm9073 PMID: 39509492 |
| 治疗性抗体开发 | 在测序前从表达抗体的细胞中扩增基因组 DNA，以验证表达情况。 | Adams AC, Grav LM, Ahmadi S et al. (2024) Single-batch expression of an experimental recombinant snakebite antivenom based on an oligoclonal mixture of human monoclonal antibodies. Biotechnol J 19(10):e202400348. doi: 10.1002/biot.202400348 PMID: 39380504 |
| 单克隆抗体制备 | 扩增用于重组抗体生产的克隆片段。 | Ende Z, Mishina M, Kauffman RC et al. (2024) Human monoclonal antibody cloning and expression with overlap extension PCR and short DNA fragments. J Immunol Methods 534:113768. doi: 10.1016/j.jim.2024.113768 PMID: 39447635 |
| 抗体制备 | 从低起始量细胞样本中扩增基因组 DNA，用于 CRISPR 和细胞系验证。 | Woo HJ, Kim J, Kim SM et al. (2024) Context-dependent genomic locus effects on antibody production in recombinant Chinese hamster ovary cells generated through random integration. Comput Struct Biotechnol J 23:1654–1665. doi: 10.1016/j.csbj.2024.04.023 PMID: 38680870 |
| 研究领域 | 使用方法 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 农业 | 从蜱幼虫中扩增基因组 DNA，以构建测序文库，用于识别与杀螨剂抗性相关的突变。 | Heylen DJA, Labuschagne M, Meiring C et al. (2024) Phenotypic and genotypic characterization of acaricide resistance in Rhipicephalus microplus field isolates from South Africa and Brazil. Int J Parasitol Drugs Drug Resist 24:100519. doi: 10.1016/j.ijpddr.2023.100519 PMID: 38168594 |
| 水产养殖 | 从感染牡蛎的某种细菌中扩增细菌 DNA。以粗裂解液为模板，通过琼脂糖凝胶电泳和 Sanger 测序对扩增出的 DNA 进行检测。 | Oyanedel D, Rojas R, Brokordt K et al. (2023) Crassostrea gigas oysters from a non-intensive farming area naturally harbor potentially pathogenic Vibrio strains. J Invertebr Pathol 196:107856. doi: 10.1016/j.jip.2022.107856 PMID: 36414122 |
| 生态学 | 基于 Platinum SuperFi II 预混液和蜱虫幼虫粗提裂解液，开发了现场 qPCR 检测方法；PCR 产物通过测序进行验证。 | Meiring C, Labuschagne M (2024) Using QUASR-PCR as a field-based genotyping assay for a tick acaricide resistance marker. Sci Rep 14(1):13584. doi: 10.1038/s41598-024-64401-0 PMID: 38866908 |
| 代谢 | 从人类基因组 DNA 中扩增涵盖 ER-α 结合元件（-112 至 + 371 bp）的区域。将 PCR 产物克隆到荧光素酶报告载体中。 | Cherubini A, Ostadreza M, Jamialahmadi O et al. (2023) Interaction between estrogen receptor-α and PNPLA3 p.I148M variant drives fatty liver disease susceptibility in women. Nat Med 29(10):2643–2655. doi: 10.1038/s41591-023-02553-8 PMID: 37749332 |
| 微生物 | 从微藻中扩增核糖体 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，并将其用于 NGS 文库的构建。 | Hosseini H, Saadaoui I, Cherif M et al. (2024) Exploring the dynamics of algae-associated microbiome during the scale-up process of Tetraselmis sp. microalgae: A metagenomics approach. Bioresour Technol 393:129991. doi: 10.1016/j.biortech.2023.129991 PMID: 37949148 |
| 微生物学 | 从皮肤微生物群中扩增 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，并将其用于文库构建。 | Mills JG, Selway CA, Thomas T et al. (2023) Schoolyard biodiversity determines short-term recovery of disturbed skin microbiota in children. Microb Ecol 86(1):658–669. doi: 10.1007/s00248-022-02052-2 PMID: 35689685 |
| 肾脏病学 | 扩增 cDNA 并在 DNA 模板上添加限制性酶切位点以用于克隆。该酶还被用于构建突变体载体。 | Niedbalska-Tarnowska J, Jakubowska A, Majkowski M et al. (2024) Case-inspired exploration of renin mutations in autosomal dominant tubulointerstitial kidney disease: Not all paths lead to the endoplasmic reticulum. Pediatr Nephrol 39(8):2363–2375. doi: 10.1007/s00467-024-06350-4 PMID: 38520530 |
订购信息
相关资源
宣传单页
产品手册
应用资料
白皮书
聚焦文章
支持中心
PCR 学习中心
了解 PCR 的历史、PCR 反应配制所需考虑因素、DNA 聚合酶选择的重要性、常见 PCR 方法和应用以及疑难解答。
PCR 和 cDNA 合成支持中心
查找终点 PCR 和 cDNA 应用相关的实验建议、疑难解答及相关资源。
OEM 和定制 PCR 解决方案
查找可进行定制的生产解决方案、产品标签和包装，以满足您的特定需求。
联系我们
通过电子邮件或电话联系我们的技术应用专家，了解有关 PCR 酶和预混液的其它问题。
除非另有说明，否则所有商标均为赛默飞世尔科技公司及其子公司的财产。PrimeSTAR 是 Takara-Clontech Laboratories, Inc. Merck 是 Merck KGaA.KAPA HiFi HotStart 是 Roche Inc. HotStar 是 Qiagen GmbH 的商标。Roche Expand 是 Roche Molecular Systems Inc. PfuUltra 是安捷伦公司的商标。仅供科研使用，不可用于诊断目的。
All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.。Q5 is a trademark of New England BioLabs Inc. PrimeSTAR is a trademark of Takara-Clontech Laboratories, Inc. Merck is a trademark of Merck KGaA.KAPA HiFi HotStart is a trademark of Roche Inc. HotStar is a trademark of Qiagen GmbH.Roche Expand is a trademark of Roche Molecular Systems Inc. PfuUltra is a trademark of Agilent, Inc.
仅供科研使用，不可用于诊断目的。