Search
•将Tris-甘氨酸转膜缓冲液的pH增加至9.2,可使pl低于9.2的所有蛋白质朝阳极方向迁移。 •使用Tris-甘氨酸转膜缓冲液,并在凝胶两侧各放一张膜。碱性高于转膜缓冲液pH的蛋白质,将被凝胶阴极侧的膜捕获。随后,可以用相同的方式处理两张膜。 •转印前,将凝胶置于含0.1% SDS的Tris-甘氨酸转膜缓冲液中孵育15分钟。少量的SDS会给予蛋白质足够的电荷,使蛋白质朝阳极端单向移动,并且在大部分情况下不会使蛋白质变性。然后,使用常规Tris-甘氨酸转膜缓冲液进行转印。
我们建议使用2X NuPAGE转膜缓冲液,在20V恒定电压下转印30-60分钟。
以下是可能原因和解决方案: -使用了浓度过高或错误的缓冲液。应检查缓冲液配方;必要时,稀释或重新配制。 -电压、电流或功率设置过高。将电源条件降低至推荐的电泳条件。
请务必查看电源、设备或凝胶是否存在问题。通常,切断电源或开盖查看是否有连接错误可帮助解决问题。同时,应检查凝胶盒底部的胶带是否已去除以及缓冲液核心装置是否损坏。此外,应确保电泳槽中的缓冲液足以浸没凝胶的上样孔。
我们的新型Bolt Bis-Tris Plus小型凝胶(货号NWxxxxxBOX)以及Invitrogen小型凝胶和NuPAGE小型凝胶,可使用小型凝胶电泳槽进行电泳。请注意,传统Bolt Bis-Tris Plus小型凝胶(货号BGxxxxxBOX,2014年12月31日起停产)只能使用Bolt小型凝胶电泳槽(2014年12月31日起停产,库存售尽后将停止供应)。