冠状病毒SARS-COV-2(COVID-19)检测及研究用抗体

本页目录

• 冠状病毒刺突蛋白及核酸蛋白
• ACE2蛋白
• TMPRSS2蛋白
• Furin蛋白
• SARS-Cov-2相关文献中使用的Invitrogen二抗

SARS 冠状病毒刺突蛋白抗体  SARS 冠状病毒核酸蛋白抗体

刺突蛋白受体结合区域（RBD）在冠状病毒与宿主细胞膜结合的过程中起着关键作用。核酸蛋白是 SARS-CoV-2 中含量最丰富的蛋白。研究表明，核酸蛋白通过与基因组 RNA 形成复合物来增强病毒体装配和病毒转录[3]。研究 SARS-CoV-2 刺突蛋白、核酸蛋白及其在病毒感染中的作用有助于为诊断和疫苗开发提供新的靶标选择方向。

ACE2 抗体

血管紧张素转换酶2（ACE2）是 ACE 的同系物，是一种主要在心脏、肾脏、血管和睾丸中表达的糖蛋白。研究证明，ACE2 蛋白在高血压、心脏病、心脏功能和糖尿病中也发挥着一定的作用。此外，研究也表明，SARS-CoV 和 HCoV-NL63 病毒都是通过与人体细胞表面上的 ACE2 蛋白结合进入宿主细胞，从而引起人类呼吸系统疾病 [8]。

有研究显示，SARS-CoV-2 可能使用与 SARS-CoV [1，2] 相同的受体 ACE2 进入宿主细胞，但是 SARS-CoV-2 与 ACE2 的结合亲和力明显更高 [9]。与 SARS-CoV 和 HCoV-NL63 类似，SARS-CoV-2 通过刺突蛋白（S）受体结合区域（RBD）与 ACE2 受体蛋白结合，进入宿主细胞。因此，使用人类 ACE2 的抗血清进行体外研究时，可阻止 SARS-CoV 和 SARS-CoV-2 假型病毒进入 Vero 细胞[8]。此外，将重组人类 ACE2 蛋白引入工程人体组织，在早期可以显著减少 SARS-CoV-2 感染，这可能是因为阻止了 SARS-CoV-2 与人体细胞膜上的内源性 ACE2 蛋白发生结合 [ 10]。这一初步结果可为当前和未来疫苗开发提供新的方向。

使用 ACE2 抗体对人体肾脏和肺组织中的 ACE2 进行 IHC 和Western Blot分析，（A）使用 ACE2 重组兔单克隆抗体（SN0754，货号 MA5-32307）对石蜡包埋的人体肾脏组织中的 ACE2 进行IHC分析。（B）使用 ACE2 单克隆抗体（CL4013，货号 MA5-31394）对人体肾脏组织中的 ACE2 进行Western Blot分析。（C）使用 ACE2 单克隆抗体（OTI4D2，货号 MA5-26628）对石蜡包埋的人体肺组织癌细胞中的 ACE2 进行IHC分析。

TMPRSS2 抗体

TMPRSS2 属于丝氨酸蛋白酶家族，包含 II 型跨膜结构域、A 类受体结构域、富含半胱氨酸的清道夫受体结构域和蛋白酶结构域。人类 TMPRSS2 在前列腺、结肠、胃和唾液腺中表达[4]。在 2009 年，有报道首次提出 TMPRSS2 可通过裂解血球凝集素激活流感病毒 [5]。自此，越来越多证据表明 TMPRSS2 参与激活不同的病毒类型和毒株，例如 A 型流感病毒、B 型流感病毒、MERS 冠状病毒和 SARS 冠状病毒。结果表明，TMPRSS2 可裂解并激活 SARS-CoV 刺突蛋白 [6]。刺突蛋白与宿主细胞膜的受体蛋白 ACE2结合后，引起受体诱导的构象改变，这种构象变化使刺突蛋白中的蛋白酶切割位点暴露于丝氨酸蛋白酶 TMPRSS2 。然后，TMPRSS2 裂解并激活刺突蛋白，从而引起病毒感染 [7]。近期发生 COVID-19 全球危机后， Hoffmann 等人证实 TMPRSS2 在激活 SARS-CoV-2 刺突蛋白中也起着关键作用 [1]，与先前 SARS-CoV 的研究发现类似。此项研究还表明，TMPRSS2 抑制剂可以显著降低细胞模型中的 SARS-CoV-2 感染率，因此TMPRSS2 可看作是治疗 SARS-CoV-2 的潜在靶标。

Furin 蛋白抗体

Furin（弗林蛋白酶）属于前体蛋白转化酶家族，是 I 型转化酶。在真核组织及细胞中广泛表达，研究显示Furin能裂解多种前体蛋白，而且能激活许多类型的病毒融合蛋白，例如埃博拉病毒和黄热病病毒。就目前报道来看，近期在全球爆发的SARS-CoV-2病毒，与之前的SARS-Cov相比，它具有更高的传染性和较低的免疫反应[11]。研究人员通过对比这两类病毒的刺突蛋白序列，发现SARS-CoV-2的受体结合区域包含了一段Furin酶切位点，而SARS-CoV病毒中却没有[11,12]。该结果显示，furin也许与SARS-CoV-2病毒具有更高的传染性有关。通过用SARS-CoV-2刺突蛋白包被的假病毒进行的体外实验结果显示，TMPRSS2 和 Furin都可以裂解SARS-CoV-2刺突蛋白[11]。该项研究同时揭示TMPRSS2 和 Furin在病毒侵入细胞的过程中，有不同的作用：Furin在刺突蛋白的S1/S2位点预激活，然后TMPRSS2则是在S2位点激活刺突蛋白。因此，对Furin在病毒激活方面的机制进行深入研究，可能为降低SARS-CoV-2病毒的感染性提供新的靶点和治疗方向。

Invitrogen Furin蛋白抗体的检测数据 （A）用抗体 Furin Polyclonal Antibody (Cat. No. PA1-062) 对Hela细胞进行免疫荧光检测的结果。 (B) 用抗体 Furin Monoclonal Antibody (ARC1221) (Cat. No. MA5-35627) 对不同细胞系进行Western Blot分析的结果。(C) 用抗体 Furin Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody (Cat. No. MA5-34677) 对人结肠组织的石蜡包埋切片进行IHC分析的结果。

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