活性氧类的微孔板检测

活性氧类 (ROS) 的产生对于需氧生物而言是不可避免的，其在健康细胞中以可控速率发生。在氧化应激条件下，ROS 生成急剧增加，使膜脂质、蛋白质和核酸发生变化。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件相关，包括动脉粥样硬化、癌变、缺血再灌注损伤和神经退行性疾病等。

广义活性氧检测

CellROX 试剂是用于测量细胞广义氧化应激的荧光探针。该染料在还原状态无荧光，氧化后发出明亮的绿色、橙色或深红色荧光。检测过程简单可靠，具有灵敏和稳定的荧光读出，并且该试剂适用于生长于完全生长孵育基中的细胞。

一氧化氮检测

DAF-FM 和 DAF-FM 双乙酸盐可用于检测和定量低浓度一氧化氮 (NO)。这些试剂在与 NO 反应形成荧光苯并三唑之前，基本上处于非荧光状态。能检测荧光素的任何荧光微孔板读数仪均可以检测 DAF-FM 荧光。

选择性活性氧指示剂

还原型谷胱甘肽也称为 GSH，是与蛋白结合的主要巯基化合物。GSH 等蛋白质硫醇在测定细胞氧化还原状态中起着重要作用。过氧化氢与核酸、蛋白质和脂质反应，可能导致细胞和组织损伤。

髓过氧物酶 (MPO)

Amplex UltraRed 试剂（在 EnzChek MPO 活性检测试剂盒 中）可快速且灵敏检测溶液和细胞裂解液中髓过氧化物酶 (MPO) 的氯化活性和过氧化活性。混合读取的室温检测可用于这些活动的连续检测，是高通量策略的理想选择。

DAF-FM
DAF-FM 在含有 0 至 1.2 μM 一氧化氮 (NO) 自由基的溶液中的荧光发射光谱。

选择指南
 CellROX Deep Red 试剂，用于氧化应激检测CellROX Green 试剂，用于氧化应激检测CM-H2DCFDA，通用氧化应激指示剂
靶标活性氧活性氧活性氧
报告底物CellROX Deep Red CellROX GreenCM-H2DCFDA
激发/发射波长 (nm)644/665485/520495/525
活细胞是是是
裂解物是是是
纯化酶是是是
用途用于活细胞测定的细胞渗透性用于活细胞测定的细胞渗透性用于活细胞测定的细胞渗透性
组件散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格5 x 50 µL5 x 50 µL20 x 50 µg
实验方案概述
  1. 处理细胞。
  2. 添加 CellROX 试剂。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 去除并洗涤 3 次。
  5. 分析细胞。
  1. 处理细胞。
  2. 添加 CellROX 试剂。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 去除并洗涤 3 次。
  5. 分析细胞。
  1. 使用 CM-H2DCFDA 上样细胞。
  2. 处理细胞。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 分析细胞。
货号C10422C10444C6827
 DAF-FM（4-氨基-5-甲胺基-2′,7′-二氟荧光素）DAF-FM 二乙酸酯（4-氨基-5-甲胺基-2′,7′-二氟荧光素双乙酸盐）ThiolTracker Violet（谷胱甘肽检测试剂）
靶标一氧化氮一氧化氮谷胱甘肽
报告底物DAF-FMDAF-FMThiolTracker Violet
激发/发射波长 (nm)495/515495/515405/526
活细胞否是是
裂解物是是是
纯化酶是是是
用途NO 的检测下限为 ~3 nMNO 的检测下限为 ~3 nM用于活细胞测定的细胞渗透性
组件散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格1 mg1 mg500 次检测，每次100 µL
实验方案概述
  1. 将细胞放入孔中。
  2. 添加要测试的溶液。
  3. 孵育，然后去除溶液。
  4. 加入 DAF-FM 双乙酸盐。
  5. 孵育。
  6. 测定荧光信号。
  1. 制备染料操作溶液。
  2. 药物处理后，向细胞中加入染料。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 分析细胞。
货号D23841D23842T10096
 Amplex Red 过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒 （500 检测）APF（羟自由基、次氯酸根或过氧亚硝基传感器）HPF（羟自由基和过氧亚硝基传感器）MitoSOX Red 线粒体超氧化物指示剂，用于活细胞成像
二氢乙啶（氢乙啶）
靶标过氧化氢/过氧化物酶单独使用进行常规 ROS 检测；串联可用于检测低氯酸 (HOCl)靶向线粒体氧化后由蓝色荧光变为红色荧光
报告底物Amplex Red 试剂ARFHPFMitoSOX Red二氢乙啶 (DHE)
激发/发射波长 (nm)571/585
490/515
510/580518/606
活细胞否
是
是是
裂解物是
否
否否
纯化酶是
否
否否
用途更低的检测限为 1 x 10–5 U/ml HRP 两种试剂在与 ROS 反应后均会发出荧光，APF 对次氯酸根阴离子的响应均比 HPF 更高检测细胞超氧化物生成的增加在细胞质内呈现蓝色荧光，氧化后插入细胞 DNA
组件包括检测缓冲液和对照品散装试剂散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格500 次检测，每次100 µL470 µL470 µL10 x 50 µg10 x 1 mg
实验方案概述
  1. 制备标准曲线样品并上样到孔中。
  2. 将实验样品稀释到反应缓冲液中，并上样至孔中。
  3. 制备 Amplex Red 试剂操作溶液。
  4. 向孔中加入 Amplex Red 溶液。
  5. 孵育。
  6. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 37°C 下避光孵育 10 min。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
货号A22188A36003H36004M36008D11347
 EnzChek 髓过氧化物酶 (MPO) 活性分析试剂盒
靶标连续检测髓过氧化物酶 (MPO) 的氯化和过氧化活性
报告底物Amplex UltraRed
激发/发射波长 (nm)571/585
活细胞否
裂解物是
纯化酶是
用途测定 1.5 至 200 ng/mL MPO
组件包括检测缓冲液和对照品
产品规格200 次测定，每次 100µL 反应体积
实验方案概述
  1. 将样品或 MPO 标准品添加到孔中。
  2. 添加稀释的 Amplex UltraRed 试剂。
  3. 孵育 30 min（室温）。
  4. 测定荧光强度。
  5. 从样品和对照中减去背景。
  6. 生成 MPO 标准曲线，确定样品浓度。
货号E33856
广义 ROS 检测
 CellROX Deep Red 试剂，用于氧化应激检测CellROX Green 试剂，用于氧化应激检测CM-H2DCFDA，通用氧化应激指示剂
靶标活性氧活性氧活性氧
报告底物CellROX Deep Red CellROX GreenCM-H2DCFDA
激发/发射波长 (nm)644/665485/520495/525
活细胞是是是
裂解物是是是
纯化酶是是是
用途用于活细胞测定的细胞渗透性用于活细胞测定的细胞渗透性用于活细胞测定的细胞渗透性
组件散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格5 x 50 µL5 x 50 µL20 x 50 µg
实验方案概述
  1. 处理细胞。
  2. 添加 CellROX 试剂。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 去除并洗涤 3 次。
  5. 分析细胞。
  1. 处理细胞。
  2. 添加 CellROX 试剂。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 去除并洗涤 3 次。
  5. 分析细胞。
  1. 使用 CM-H2DCFDA 上样细胞。
  2. 处理细胞。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 分析细胞。
货号C10422C10444C6827
一氧化氮检测
 DAF-FM（4-氨基-5-甲胺基-2′,7′-二氟荧光素）DAF-FM 二乙酸酯（4-氨基-5-甲胺基-2′,7′-二氟荧光素双乙酸盐）ThiolTracker Violet（谷胱甘肽检测试剂）
靶标一氧化氮一氧化氮谷胱甘肽
报告底物DAF-FMDAF-FMThiolTracker Violet
激发/发射波长 (nm)495/515495/515405/526
活细胞否是是
裂解物是是是
纯化酶是是是
用途NO 的检测下限为 ~3 nMNO 的检测下限为 ~3 nM用于活细胞测定的细胞渗透性
组件散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格1 mg1 mg500 次检测，每次100 µL
实验方案概述
  1. 将细胞放入孔中。
  2. 添加要测试的溶液。
  3. 孵育，然后去除溶液。
  4. 加入 DAF-FM 双乙酸盐。
  5. 孵育。
  6. 测定荧光信号。
  1. 制备染料操作溶液。
  2. 药物处理后，向细胞中加入染料。
  3. 在 37°C 下孵育 30 分钟。
  4. 分析细胞。
货号D23841D23842T10096
选择性 ROS 指示剂
 Amplex Red 过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒 （500 检测）APF（羟自由基、次氯酸根或过氧亚硝基传感器）HPF（羟自由基和过氧亚硝基传感器）MitoSOX Red 线粒体超氧化物指示剂，用于活细胞成像
二氢乙啶（氢乙啶）
靶标过氧化氢/过氧化物酶单独使用进行常规 ROS 检测；串联可用于检测低氯酸 (HOCl)靶向线粒体氧化后由蓝色荧光变为红色荧光
报告底物Amplex Red 试剂ARFHPFMitoSOX Red二氢乙啶 (DHE)
激发/发射波长 (nm)571/585
490/515
510/580518/606
活细胞否
是
是是
裂解物是
否
否否
纯化酶是
否
否否
用途更低的检测限为 1 x 10–5 U/ml HRP 两种试剂在与 ROS 反应后均会发出荧光，APF 对次氯酸根阴离子的响应均比 HPF 更高检测细胞超氧化物生成的增加在细胞质内呈现蓝色荧光，氧化后插入细胞 DNA
组件包括检测缓冲液和对照品散装试剂散装试剂散装试剂散装试剂
产品规格500 次检测，每次100 µL470 µL470 µL10 x 50 µg10 x 1 mg
实验方案概述
  1. 制备标准曲线样品并上样到孔中。
  2. 将实验样品稀释到反应缓冲液中，并上样至孔中。
  3. 制备 Amplex Red 试剂操作溶液。
  4. 向孔中加入 Amplex Red 溶液。
  5. 孵育。
  6. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 37°C 下避光孵育 10 min。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
  1. 制备试剂并添加到细胞中。
  2. 在 4 – 37°C 下孵育 20-60 分钟，具体取决于细胞类型。
  3. 洗去多余的探针。
  4. 测定荧光信号。
货号A22188A36003H36004M36008D11347
髓过氧物酶 (MPO)
 EnzChek 髓过氧化物酶 (MPO) 活性分析试剂盒
靶标连续检测髓过氧化物酶 (MPO) 的氯化和过氧化活性
报告底物Amplex UltraRed
激发/发射波长 (nm)571/585
活细胞否
裂解物是
纯化酶是
用途测定 1.5 至 200 ng/mL MPO
组件包括检测缓冲液和对照品
产品规格200 次测定，每次 100µL 反应体积
实验方案概述
  1. 将样品或 MPO 标准品添加到孔中。
  2. 添加稀释的 Amplex UltraRed 试剂。
  3. 孵育 30 min（室温）。
  4. 测定荧光强度。
  5. 从样品和对照中减去背景。
  6. 生成 MPO 标准曲线，确定样品浓度。
货号E33856
使用 Thermo Scientific 微孔板读数仪进行荧光检测

使用 Thermo Scientific 微孔板读数仪进行荧光检测

使用 Invitrogen 荧光染料可在 Fluoroskan 或 Fluoroskan FL 荧光微孔板荧光分析仪或 Varioskan LUX 多功能酶标仪上快速对 96-1,536 份样品进行高灵敏度荧光检测，获得最佳检测效果。利用自动化动态范围功能为每个孔提供最佳的增益，并利用自动化功能获得更高的通量。

酶标仪产品比较

相关资源

仅供科研使用，不可用于诊断目的。