在蛋白质酶解后,肽段的富集(Enrichment)和/或分馏(Fractionation)通常是检测低丰度蛋白肽段或降低样本复杂性的必要步骤。提升目标蛋白鉴定率的常用策略包括:翻译后修饰(PTM)特异性富集, 例如:磷酸化肽段富集;或分馏技术, 例如:根据肽段疏水性差异分离的高pH反相色谱法。

创新的Thermo Scientific ™ActivX™探针与富集试剂盒能特异性地靶向多种酶类,包括激酶、GTP 酶和丝氨酸水解酶,通过在蛋白质水平对其活性位点进行共价标记,并在酶解后实现高效富集。

  • 全面性:提供多种肽段富集/分馏策略的试剂与试剂盒。
  • 优化设计:最大化蛋白得率,提升目标蛋白鉴定数量。
  • 便捷操作:离心柱、吸头或磁珠形式简化样本处理流程。
  • 灵活适配:适用于培养的哺乳动物细胞或组织样本。
  • 严格验证:所有产品均经Thermo Scientific™质谱平台测试,确保数据可靠性。

为您的应用选择合适的肽段富集或分馏产品

 
 Fe-NTA 磷酸肽富集试剂盒TiO2 磷酸肽富集与纯化试剂盒磁性TiO2 磷酸肽富集试剂盒高pH 反相分馏试剂盒含ATP 探针的激酶富集试剂盒
靶向目标磷酸肽磷酸肽磷酸肽所有肽段ATP 结合位点
结合/标记机制金属螯合物对磷酸基团的亲和力金属氧化物对磷酸基团的亲和力金属氧化物对磷酸基团的亲和力疏水相互作用生物素化ATP类似物与活性位点赖氨酸结合
富集策略IMAC-琼脂糖树脂多孔球形TiO2材料

 

TiO2包被磁性颗粒疏水聚合物树脂固定化链霉亲和素琼脂糖树脂
负载量/反应*0.5–5 mg0.5–3 mg100 µg10–100 µg冻干粉
形式离心柱吸头磁珠离心柱离心柱
#洗脱组分数量11181
处理时间45–60 分钟45–60 分钟15 分钟30–60 分钟6.5 小时 + 酶解
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 *每个反应的负载量基于典型的哺乳动物培养细胞蛋白质消化样品。
 

其他用于质谱分析的肽段富集&分馏产品

重点数据

The Thermo Scientific Pierce Fe-NTA Phosphopeptide Enrichment Kit effectively captures phosphopeptides with multiple phosphates.

Thermo Scientific™ Pierce™ Fe-NTA磷酸肽富集试剂盒可高效捕获含多个磷酸基团的磷酸肽。

每个肽段上的磷酸基团数量

123456总数
TiO24921038401608
Fe-NTA IMAC23434216310488
重叠部分15501000156

通过TiO2与Fe-NTA IMAC对单磷酸化和多磷酸化肽段的选择性富集。基于重复实验的平均磷酸肽富集结果,展示两种方法分别富集的含 1个或多个磷酸基团 的磷酸肽数量。肽段谱图总结结果从 Proteome Software Scaffold 3.0 导出,并通过 Microsoft™ Excel™ 软件 分析。

关键结论

  • TiO2:适合单磷酸化肽段的高效富集(如信号转导研究)。
  • Fe-NTA IMAC:适用于多磷酸化肽段(如核酸结合蛋白或高度修饰蛋白分析)。
  • 联合使用:结合两种方法可提升磷酸化蛋白质组覆盖度(减少“盲区”)。
The Thermo Scientific Pierce Fe-NTA Phosphopeptide Enrichment Kit effectively captures phosphopeptides with multiple phosphates.

Thermo Scientific™ Pierce™ Fe-NTA磷酸肽富集试剂盒可高效捕获含多个磷酸基团的磷酸肽。

每个肽段上的磷酸基团数量

123456总数
TiO24921038401608
Fe-NTA IMAC23434216310488
重叠部分15501000156

通过TiO2与Fe-NTA IMAC对单磷酸化和多磷酸化肽段的选择性富集。基于重复实验的平均磷酸肽富集结果,展示两种方法分别富集的含 1个或多个磷酸基团 的磷酸肽数量。肽段谱图总结结果从 Proteome Software Scaffold 3.0 导出,并通过 Microsoft™ Excel™ 软件 分析。

关键结论

  • TiO2:适合单磷酸化肽段的高效富集(如信号转导研究)。
  • Fe-NTA IMAC:适用于多磷酸化肽段(如核酸结合蛋白或高度修饰蛋白分析)。
  • 联合使用:结合两种方法可提升磷酸化蛋白质组覆盖度(减少“盲区”)。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。