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多肽分离后,可使用反相 (RP) 树脂去除盐和缓冲液,其中 C18 基质是用于捕获疏水肽的最理想基质。多肽在高水相流动相中与反相柱结合,冲洗盐和缓冲液,然后使用高有机相流动相洗脱多肽。然而,磷酸化多肽等亲水肽可能不能与 C18 树脂实现良好结合,因此建议使用石墨离心柱,以便更好地进行回收。但是,C18 和石墨树脂不能有效去除去垢剂,这会污染仪器并干扰多肽与色谱柱的结合、洗脱和电离。Thermo Scientific 去垢剂可有效地结合并去除样品处理过程中常用的各种高浓度组分。
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|---|---|---|---|---|---|
| Pierce 多肽脱盐柱 | Pierce C18 吸头 | Pierce C18 离心柱 | Pierce C18 离心吸头 | 石墨离心柱 | |
| 主要应用 | 采用微量离心机进行高通量多肽脱盐 | 采用微量离心管进行多肽脱盐 | 采用微量离心机进行多肽脱盐 | 采用微量离心机和 Stage 吸头进行多肽脱盐 | 采用微量离心机进行磷酸化多肽脱盐 |
| 产品规格 | 离心柱 | 吸头 | 离心柱 | 离心吸头 | 离心柱 |
| 最大结合容量 | 5 mg | 10 µg 或 80 µg | 30 µg | 10 µg | 100 µg |
| 最大上样体积 | 300 µL | 10 µL 或 100 µL | 150 µL | 20 µL | 500 µL |
| 处理时间 | 15 min | 5分钟 | 25 min | 5-10 min | 10 min |
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图 1.在不同载量下使用 Pierce 多肽脱盐离心柱处理天然多肽的回收率。将消化的 HeLa 细胞裂解物(5-5,000 μg)添加到 Pierce 多肽脱盐离心柱并根据实验方案进行处理。使用 Pierce 定量多肽测定法评估回收后脱盐的多肽总量。
图 2.天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率。Pierce 多肽脱盐离心柱为天然多肽和 TMT 标记的多肽样品制备提供了优异的结合和回收性能。色谱柱可以有效地去除多余的非反应型 TMT 标记多肽和污染盐。使用 TMT 等量异位标签标记消化的 HeLa 细胞裂解物 (500 μg),根据实验方案添加到每个离心柱上并进行处理。使用 Pierce 定量多肽测定法评估回收后脱盐的多肽总量。
图 3.Thermo Scientific Pierce C18 离心吸头比其他畅销的 C18 吸头更胜一筹。在使用 Pierce C18 离心吸头或 ZipTip™ 吸头(含 0.6 μL C18 树脂的 10 μL 吸头)对 10 μg 等份相同消化液进行处理后,将 BSA 胰蛋白酶消化物在 LTQ Orbitrap XL ETD 质谱仪上进行分析。从数据库中提取多肽洗脱的色谱图来评估样品复杂性和色谱分辨率。使用 SEQUEST 搜索引擎和 SwissProt 数据库分析 MS 结果,以确定蛋白序列覆盖率。
图 1.在不同载量下使用 Pierce 多肽脱盐离心柱处理天然多肽的回收率。将消化的 HeLa 细胞裂解物(5-5,000 μg)添加到 Pierce 多肽脱盐离心柱并根据实验方案进行处理。使用 Pierce 定量多肽测定法评估回收后脱盐的多肽总量。
图 2.天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率。Pierce 多肽脱盐离心柱为天然多肽和 TMT 标记的多肽样品制备提供了优异的结合和回收性能。色谱柱可以有效地去除多余的非反应型 TMT 标记多肽和污染盐。使用 TMT 等量异位标签标记消化的 HeLa 细胞裂解物 (500 μg),根据实验方案添加到每个离心柱上并进行处理。使用 Pierce 定量多肽测定法评估回收后脱盐的多肽总量。
图 3.Thermo Scientific Pierce C18 离心吸头比其他畅销的 C18 吸头更胜一筹。在使用 Pierce C18 离心吸头或 ZipTip™ 吸头(含 0.6 μL C18 树脂的 10 μL 吸头)对 10 μg 等份相同消化液进行处理后,将 BSA 胰蛋白酶消化物在 LTQ Orbitrap XL ETD 质谱仪上进行分析。从数据库中提取多肽洗脱的色谱图来评估样品复杂性和色谱分辨率。使用 SEQUEST 搜索引擎和 SwissProt 数据库分析 MS 结果,以确定蛋白序列覆盖率。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。


