序列特异性蛋白酶可用于将蛋白质切割为更小的片段(肽段)。胰蛋白酶是蛋白质酶解的常用工具,然而单独或序贯使用其他蛋白酶(如Glu-C、LysN、Lys-C、Asp-N或胰凝乳蛋白酶)可提升单个蛋白质的序列覆盖率,或为不同质谱应用生成独特肽段序列。Thermo Scientific Pierce蛋白酶经过高度纯化和修饰优化,专为蛋白质酶解设计,并通过质谱应用验证。Thermo Scientific EasyPep Mini 质谱样品制备试剂盒提供预配制试剂和稳健方法,可在3小时内制备出用于质谱分析的高质量样品。

  • 全面性——提供广谱蛋白酶满足多样化酶解策略需求
  • 便捷性——可选完整凝胶内/溶液内消化试剂盒,或独立蛋白酶多规格包装
  • 经济性——部分蛋白酶支持大包装/定制包装,实现成本优化
  • 验证保障——所有蛋白酶均经全面质控,处理样本已通过赛默飞质谱系统分析验证

操作视频——EasyPep Mini 质谱样品制备试剂盒

该快速质谱样品制备试剂盒可在2-4小时内完成蛋白质提取、酶解及肽段纯化全流程。

根据应用与切割位点选择合适的蛋白酶

 
产品名称Pierce 胰蛋白酶,质谱级)Pierce LysN 蛋白酶,质谱级Pierce 胰蛋白酶/Lys-C蛋白酶混合物,质谱级Pierce LysC 蛋白酶,质谱级

来源

猪胰腺提取物灰树花(Grifola frondosa)提取物猪胰腺提取物 + 溶酶杆菌(Lysobacter enzymogenes)溶酶杆菌(Lysobacter enzymogenes)
切割特异性精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)残基的羧基端赖氨酸(Lys)残基的氨基端精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)残基的羧基端赖氨酸(Lys)残基的羧基端
是否修饰?是,经TPCK处理并甲基化是 (胰蛋白酶); 否 (LysC)
形式冻干冷冻冻干冻干冻干
标准包装20 或 100 µg/瓶20 µg/瓶20 或 100 µg/瓶20 或 100 µg/瓶
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产品名称糜蛋白酶(Chymotrypsin)Glu-C 蛋白酶,质谱级Asp-N 蛋白酶,质谱级
来源牛胰腺提取物金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)脆假单胞菌(Pseudomonas fragi)
切割特异性酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)及亮氨酸(Leu)的羧基端谷氨酸(Glu)的羧基端天冬氨酸(Asp)残基的氨基端
是否修饰?是(经TLCK处理)
形式冻干冻干冻干
标准包装4 x 25 µg/瓶10 µg/瓶2 µg/瓶
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产品名称Pierce 胰蛋白酶,质谱级)Pierce LysN 蛋白酶,质谱级Pierce 胰蛋白酶/Lys-C蛋白酶混合物,质谱级Pierce LysC 蛋白酶,质谱级

来源

猪胰腺提取物灰树花(Grifola frondosa)提取物猪胰腺提取物 + 溶酶杆菌(Lysobacter enzymogenes)溶酶杆菌(Lysobacter enzymogenes)
切割特异性精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)残基的羧基端赖氨酸(Lys)残基的氨基端精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)残基的羧基端赖氨酸(Lys)残基的羧基端
是否修饰?是,经TPCK处理并甲基化是 (胰蛋白酶); 否 (LysC)
形式冻干冷冻冻干冻干冻干
标准包装20 或 100 µg/瓶20 µg/瓶20 或 100 µg/瓶20 或 100 µg/瓶
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产品名称糜蛋白酶(Chymotrypsin)Glu-C 蛋白酶,质谱级Asp-N 蛋白酶,质谱级
来源牛胰腺提取物金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)脆假单胞菌(Pseudomonas fragi)
切割特异性酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)及亮氨酸(Leu)的羧基端谷氨酸(Glu)的羧基端天冬氨酸(Asp)残基的氨基端
是否修饰?是(经TLCK处理)
形式冻干冻干冻干
标准包装4 x 25 µg/瓶10 µg/瓶2 µg/瓶
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胰蛋白酶/Lys-C蛋白酶混合物数据

Quality of peptide samples achieved using Pierce trypsin/Lys-C mix

使用 Pierce 胰蛋白酶/Lys-C 混合物制备的肽段样本质量,与其他供应商的胰蛋白酶/Lys-C 混合物制备的蛋白样本相比相当甚至更优。


胶内消化 vs. 溶液内消化:如何选择?

选择胶内消化(in-gel digestion)或溶液内消化(in-solution digestion)通常取决于样本量和/或样本复杂度。

溶液内消化推荐用于小体积、低至中等复杂度样本,更适配高通量样本处理需求。

对于高复杂度样本,胶内消化具有固有的优势,因为SDS-PAGE流程可同步实现蛋白变性、分离,并提供样本中蛋白相对丰度的可视化参考,但肽段回收率较溶液内消化低。

我们提供针对胶内与溶液内样本处理的完整试剂盒,满足不同实验需求。


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重点数据

蛋白质LysNTrypsinMerged
膜突蛋白(Moesin)21%24%37%
Src底物皮层蛋白25%10%30%
谷氨酸脱氢酶116%12%28%
环氧水解酶113%14%23%

表中数据展示了 A549 细胞裂解液经 LysN 蛋白酶 或 胰蛋白酶 溶液内消化后,选定蛋白质的序列覆盖率百分比。合并覆盖率(Merged)表示通过 LysN 与胰蛋白酶分步消化 并结合 基于 CID(碰撞诱导解离)的 LC-MS/MS 分析 获得的综合结果。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。