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用于质谱分析的蛋白质富集与纯化技术
蛋白质富集技术涵盖多种方法，可基于蛋白序列、抗体表位、翻译后修饰（PTM）或活性结合位点分离细胞蛋白。该技术对分离低丰度蛋白及降低蛋白质组分析样本复杂度至关重要。采用免疫亲和技术（如免疫沉淀）可高效富集特定蛋白或复合物， 或通过PTM特异性亲和结合（如磷酸化蛋白富集）针对翻译后修饰进行定向分离。新型的Thermo Scientific ActivX™ 探针与富集试剂盒能特异性靶向激酶、GTP酶、丝氨酸水解酶等酶类。
- 全面性——提供多种蛋白质富集策略的试剂与试剂盒。
- 优化设计——所有试剂与试剂盒旨在最大化蛋白得率并减少非特异性结合。
- 便捷性——即用型离心柱或磁珠形式实现更快速的蛋白富集。
- 灵活性——试剂盒适用于培养的哺乳动物细胞或组织样本。
- 验证可靠——所有产品均经过全面测试，处理后的样本经 Thermo Scientific 质谱仪分析验证
基于免疫沉淀（IP）的靶向富集试剂盒选择表
| 项目 |  Streptavidin IP-MS Kit |  Protein A/G IP-MS Kit |  MHC Class I Antibody Coupling Kit |
|---|---|---|---|
| 靶标 | 单一蛋白及其复合物 | 单一蛋白及其复合物 | MHC Class I 蛋白及肽复合物 |
| 结合机制 | 生物素化抗体与靶标的亲和结合 | 抗体与靶标的亲和结合 | MHC Class I 抗体与靶标的亲和结合 |
| 富集对象 | 蛋白（酶解前） | 蛋白（酶解前） | 蛋白/肽复合物（酶解前） |
| 是否包含抗体 | 否 | 否 | 是 |
| 富集形式 | 固定化链霉亲和素 | 固定化 Protein A/G | 固定化 Protein A/G |
| 基质磁珠 | Pierce 磁珠 | Pierce 磁珠 | Pierce 磁性琼脂糖 |
| 样本类型 | 生物流体 | 细胞与组织 | 细胞与组织 |
| 应用 | 靶蛋白富集、生物素化蛋白富集、邻近标记与互作组学、化学蛋白组学 | 靶蛋白富集、蛋白–蛋白相互作用、信号通路解析 | 免疫肽组学（Immunopeptidomics） |
| 货号（仅 IP） | 90408 | 90409 | A40008468 |
| 货号（IP + MS 样品制备套装） | A51744 | A51743 | 不适用 |
发现型蛋白组学富集试剂盒选择表
| 项目 |  Phosphoprotein Enrichment Kit |  Kinase Enrichment Kit with ATP Probe |  ActivX TAMRA-FP Serine Hydrolase Probe |
|---|---|---|---|
| 靶标 | 磷酸化蛋白 | ATP 结合位点 | 活性丝氨酸水解酶 |
| 结合机制 | 金属螯合对磷酸基团的亲和作用 | 生物素化 ATP 类似物与活性位点赖氨酸结合 | TAMRA 标记的磷酸酯与活性位点丝氨酸结合 |
| 富集对象 | 蛋白（酶解前） | 肽段（酶解后） | 肽段（酶解后） |
| 富集形式 | IMAC（固定化金属亲和） | 固定化链霉亲和素 | 固定化抗 TAMRA 单克隆抗体 |
| 基质 | 琼脂糖树脂 | 琼脂糖树脂 | 琼脂糖树脂 |
| 应用 | 磷酸化蛋白富集、信号通路分析、生物标志物发现 | 激酶活性表征、化学蛋白组学、新型激酶靶点鉴定、抑制剂选择性分析、细胞信号通路绘制 | 基于活性的蛋白组学分析（ABPP）、药物靶点占位/结合研究、抑制剂筛选 |
| 货号 | 90003 | 88310 | 88318 |
核心实验数据
| 靶标 | A431 | HEK293 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 靶标抗体组 | 阴性对照组 | 靶标抗体组 | 阴性对照组 | ||
| 序列覆盖率（%） | EGFR | 65% | 0% | 16% | 0% |
| AKT1 | 36% | 2% | 68% | 6% | |
| AKT2 | 50% | 0% | 82% | 0% | |
| AKT3 | 8% | 0% | 62% | 0% | |
| PTEN | 16% | 0% | 36% | 0% | |
使用Thermo Scientific Pierce链霉亲和素磁珠对中低丰度EGFR-AKT通路靶标进行质谱富集分析。 从A431和HEK293细胞系中，使用生物素化抗体对EGFR-AKT通路靶标进行免疫沉淀，通过Pierce链霉亲和素磁珠捕获抗原-抗体复合物。IP洗脱液进行溶液内酶切消化，通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）评估序列覆盖率，并鉴定异构体特异性肽段。
Western blot与质谱联用技术可实现酶的靶向捕获与分析与。该示意图描述了使用 ActivX 探针对激酶、GTP 酶或丝氨酸水解酶进行剖析、捕获和检测的两个并行工作流程。用抑制剂对酶进行预孵育，可以通过探针标记蛋白质的 Western 印迹（或仅针对丝氨酸水解酶的荧光 SDS-PAGE）或探针标记肽的质谱分析来确定抑制剂的特异性、结合亲和力和效力。
| 靶标 | A431 | HEK293 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 靶标抗体组 | 阴性对照组 | 靶标抗体组 | 阴性对照组 | ||
| 序列覆盖率（%） | EGFR | 65% | 0% | 16% | 0% |
| AKT1 | 36% | 2% | 68% | 6% | |
| AKT2 | 50% | 0% | 82% | 0% | |
| AKT3 | 8% | 0% | 62% | 0% | |
| PTEN | 16% | 0% | 36% | 0% | |
使用Thermo Scientific Pierce链霉亲和素磁珠对中低丰度EGFR-AKT通路靶标进行质谱富集分析。 从A431和HEK293细胞系中，使用生物素化抗体对EGFR-AKT通路靶标进行免疫沉淀，通过Pierce链霉亲和素磁珠捕获抗原-抗体复合物。IP洗脱液进行溶液内酶切消化，通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）评估序列覆盖率，并鉴定异构体特异性肽段。
Western blot与质谱联用技术可实现酶的靶向捕获与分析与。该示意图描述了使用 ActivX 探针对激酶、GTP 酶或丝氨酸水解酶进行剖析、捕获和检测的两个并行工作流程。用抑制剂对酶进行预孵育，可以通过探针标记蛋白质的 Western 印迹（或仅针对丝氨酸水解酶的荧光 SDS-PAGE）或探针标记肽的质谱分析来确定抑制剂的特异性、结合亲和力和效力。
其他蛋白质富集质谱产品清单
资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。