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从肽段中去除去垢剂
Thermo Scientific Pierce 膜蛋白和肽段去垢剂去除树脂采用方便的离心柱或板形式提供，可以快速有效地从蛋白或多肽样品中去除离子、非离子和/或两性离子去垢剂，以提高与下游应用的兼容性。有两种配方可供选择，它们经过优化，可从不同浓度范围的肽样品中去除去垢剂。Thermo Scientific HiPPR（高蛋白和肽回收率）产品适用于≤100 μg/mL的肽样品。标准 Pierce 去垢剂去除树脂产品非常适合浓度＞100 μg/mL 的肽样品。
- 高效性能—去垢剂去除率＞ 90%，且无需稀释样品，确保高回收率
- 广泛适用—可有效去除肽段或蛋白样品中的多种去垢剂
- 优化配方—针对肽段浓度 ≤μg/mL或 >100 μg/mL的样品，提供专属配方
- 灵活形式—有多种形式可供选择，包括离心柱、96 孔离心板和散装树脂等
- 操作方便—简单的流程有助于提高 质谱检测的肽段覆盖度
为您的应用选择合适的肽段去垢剂去除产品
| HiPPR 去垢剂去除离心柱 | HiPPR 去垢剂去除离心柱试剂盒 | HiPPR 去垢剂去除离心板 | 去垢剂去除离心柱 （4 种尺寸） | 去垢剂去除树脂 | 去垢剂去除离心板 | |
|---|---|---|---|---|---|---|
 |  |  |  |  |  | |
| 样本量范围 | 100 µL | 25–
| 100 µL |
| 10–
| 20–
|
| 建议的肽样品浓度范围 | 1–
| 1–100 µg/mL | 1–100 µg/mL | >100 µg | >100 µg | >100 µg |
| 形式 | 预填充离心柱 | 5 mL 树脂 + 0.8 mL 空离心柱 | 96 孔预填充离心板 | 预填充离心柱 | 10 mL 树脂 | 96 孔预填充离心板 |
| 树脂床体积 | 0.1 mL | 0.025–0.2 mL | 0.1 mL |
| 0.125 mL–
| 0.55 mL |
| 货号 | 88306 | 88305 | 88307 | 87777 | 87780 | 88304 |
表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 膜蛋白和肽去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。
膜蛋白和肽去垢剂去除效率和蛋白回收率 。BSA 样品 (25–200 µL) + 0.15 M NaCl、0.05% 叠氮化钠中的去垢剂与等体积的去垢剂去除树脂混合（对于 CHAPS 去除，为 2 倍体积）。
| 去垢剂 | 样品量 (µL) | 蛋白含量 (µg) | 去垢剂去除率 (%) | 蛋白回收率 (%) |
|---|---|---|---|---|
| SDS (1%) | 25 | 0.375 | >99 | 98 |
| 50 | 0.75 | >99 | 97 | |
| 100 | 1.5 | >99 | 100 | |
| 200 | 3.0 | >99 | 100 | |
| Triton X-100 (1%) | 25 | 0.375 | >95 | 82 |
| 50 | 0.75 | >95 | 86 | |
| 100 | 1.5 | >95 | 86 | |
| 200 | 3.0 | >95 | 93 | |
| NP-40 (0.75%) | 25 | 0.375 | 95 | 90 |
| 50 | 0.75 | 96 | 94 | |
| 100 | 1.5 | 97 | 91 | |
| 200 | 3.0 | 97 | 97 | |
| CHAPS (1%) | 25 | 0.375 | 95 | 64 |
| 50 | 0.75 | 97 | 70 | |
| 100 | 1.5 | 98 | 78 | |
| 200 | 3.0 | 98 | 75 |
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图1. 使用标准 Pierce 去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。 含有去垢剂的胰蛋白酶消化物 (0.1 mL, 100 μg) 分别经过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂处理，并进行 LC-MS/MS 分析。上行图：基峰 LC-MS 色谱图。下行图：积分质谱图。Brij-35 去垢剂、辛基葡萄糖苷、辛基硫代葡萄糖苷和 SDS 去垢剂处理均获得类似的结果（未显示数据）。
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图 2. 使用 Pierce 去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。 将含有 1% SDS 的 HeLa 细胞裂解物 (0.1 mL, 100 μg) 的胰蛋白酶消化物通过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂进行处理，然后进行 LC-MS/MS 分析。处理过的样品与不含 SDS 的消化物相比，鉴定到的肽段数量相近。而在含有 SDS 的样品中，肽段鉴定数量显著减少。有效的去垢剂去除可以实现更好的肽段鉴定。
表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。
每个柱和板孔含有约 550 μL 去垢剂树脂浆料和 0.1 mL 样品。
| 流程形式 | 去垢剂 | 去垢剂浓度 (%) | 去垢剂去除率 (%) | BSA 回收率 (%) |
|---|---|---|---|---|
| 0.5 mL 离心柱 | 脱氧胆酸钠 | 5 | 99 | 100 |
| 辛基葡萄糖苷 | 5 | 99 | 90 | |
| 辛基硫代葡萄糖苷 | 5 | 99 | 95 | |
| 月桂酰基麦芽糖苷 | 1 | 98 | 99 | |
| Triton X-114 | 2 | 95 | 100 | |
| Brij-35 | 1 | 99 | 97 | |
| 吐温 20 | 0.25 | 99 | 87 | |
| 96 孔离心板 | SDS | 5 | 99 | 89 |
| Triton X-100 | 4 | 99 | 100 | |
| NP-40 | 1 | 95 | 100 | |
| CHAPS | 5 | 99 | 100 |
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图 3. 使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。实验设置牛血清白蛋白（BSA，100 μg/mL）胰蛋白酶酶解产物分为三组：无去垢剂组、含0.5% Triton X-100组、以及酶解后添加0.5% SDS组。使用 HiPPR 去垢剂去除树脂处理含有去垢剂的样品 (0.1 mL)，并通过 LC-MS/MS 与未处理组及无去垢剂组的样品进行比较。结果表明，该树脂能有效去除去垢剂，并且产生的结果与不含去垢剂的样品的实验结果相当。
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图 4. 使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。在有和没有去垢剂的情况下消化 BSA（25 和 100 μg/mL），然后对样品进行 LC-MS/MS 分析。有效的去垢剂去除可提高肽识别率并获得较高的 MASCOT™ 分数。
表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 膜蛋白和肽去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。
膜蛋白和肽去垢剂去除效率和蛋白回收率 。BSA 样品 (25–200 µL) + 0.15 M NaCl、0.05% 叠氮化钠中的去垢剂与等体积的去垢剂去除树脂混合（对于 CHAPS 去除，为 2 倍体积）。
| 去垢剂 | 样品量 (µL) | 蛋白含量 (µg) | 去垢剂去除率 (%) | 蛋白回收率 (%) |
|---|---|---|---|---|
| SDS (1%) | 25 | 0.375 | >99 | 98 |
| 50 | 0.75 | >99 | 97 | |
| 100 | 1.5 | >99 | 100 | |
| 200 | 3.0 | >99 | 100 | |
| Triton X-100 (1%) | 25 | 0.375 | >95 | 82 |
| 50 | 0.75 | >95 | 86 | |
| 100 | 1.5 | >95 | 86 | |
| 200 | 3.0 | >95 | 93 | |
| NP-40 (0.75%) | 25 | 0.375 | 95 | 90 |
| 50 | 0.75 | 96 | 94 | |
| 100 | 1.5 | 97 | 91 | |
| 200 | 3.0 | 97 | 97 | |
| CHAPS (1%) | 25 | 0.375 | 95 | 64 |
| 50 | 0.75 | 97 | 70 | |
| 100 | 1.5 | 98 | 78 | |
| 200 | 3.0 | 98 | 75 |
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图1. 使用标准 Pierce 去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。 含有去垢剂的胰蛋白酶消化物 (0.1 mL, 100 μg) 分别经过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂处理，并进行 LC-MS/MS 分析。上行图：基峰 LC-MS 色谱图。下行图：积分质谱图。Brij-35 去垢剂、辛基葡萄糖苷、辛基硫代葡萄糖苷和 SDS 去垢剂处理均获得类似的结果（未显示数据）。
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图 2. 使用 Pierce 去垢剂去除离心柱 (0.5 mL) 得到的结果。 将含有 1% SDS 的 HeLa 细胞裂解物 (0.1 mL, 100 μg) 的胰蛋白酶消化物通过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂进行处理，然后进行 LC-MS/MS 分析。处理过的样品与不含 SDS 的消化物相比，鉴定到的肽段数量相近。而在含有 SDS 的样品中，肽段鉴定数量显著减少。有效的去垢剂去除可以实现更好的肽段鉴定。
表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。
每个柱和板孔含有约 550 μL 去垢剂树脂浆料和 0.1 mL 样品。
| 流程形式 | 去垢剂 | 去垢剂浓度 (%) | 去垢剂去除率 (%) | BSA 回收率 (%) |
|---|---|---|---|---|
| 0.5 mL 离心柱 | 脱氧胆酸钠 | 5 | 99 | 100 |
| 辛基葡萄糖苷 | 5 | 99 | 90 | |
| 辛基硫代葡萄糖苷 | 5 | 99 | 95 | |
| 月桂酰基麦芽糖苷 | 1 | 98 | 99 | |
| Triton X-114 | 2 | 95 | 100 | |
| Brij-35 | 1 | 99 | 97 | |
| 吐温 20 | 0.25 | 99 | 87 | |
| 96 孔离心板 | SDS | 5 | 99 | 89 |
| Triton X-100 | 4 | 99 | 100 | |
| NP-40 | 1 | 95 | 100 | |
| CHAPS | 5 | 99 | 100 |
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图 3. 使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。实验设置牛血清白蛋白（BSA，100 μg/mL）胰蛋白酶酶解产物分为三组：无去垢剂组、含0.5% Triton X-100组、以及酶解后添加0.5% SDS组。使用 HiPPR 去垢剂去除树脂处理含有去垢剂的样品 (0.1 mL)，并通过 LC-MS/MS 与未处理组及无去垢剂组的样品进行比较。结果表明，该树脂能有效去除去垢剂，并且产生的结果与不含去垢剂的样品的实验结果相当。
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图 4. 使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。在有和没有去垢剂的情况下消化 BSA（25 和 100 μg/mL），然后对样品进行 LC-MS/MS 分析。有效的去垢剂去除可提高肽识别率并获得较高的 MASCOT™ 分数。
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。