His-tagged Fusion Protein Purification

我们提供两种配体用于纯化 His 标签蛋白:镍（以 Ni-NTA 形式）和钴。需要更高蛋白得率时，建议使用 Ni-NTA 树脂。目标是更高蛋白纯度时，建议使用钴树脂。这些磁珠和其他树脂具有多种产品形式，可满足高通量筛选、批量、中试和工艺纯化等多种需求。Superflow 琼脂糖树脂已经过广泛的化学表征。

  • 形式更多样——磁珠、磁性琼脂糖、松散树脂、离心柱和试剂盒、FPLC 纯化柱和96孔过滤板，实现从微克到千克规模的融合蛋白纯化。
  • 性能卓越——树脂旨在更大程度提高蛋白得率和降低背景水平。
  • 经济实惠——价格与其他供应商接近或更优惠。

选择一种 His 标签融合蛋白纯化产品

产品类型Pierce 高容量 Ni-IMAC 磁珠，EDTA 兼容Pierce Ni-NTA 琼脂糖磁珠Pierce Ni-NTA 磁珠
微珠或树脂尺寸100 µm10–40 μm1 μm
静态结合容量>80 mg/ml≥70 mg/mL≥0.5 mg/mL
动态结合容量*>60 mg/ml 不适用不适用
最大线性流速*300 cm/hr（推荐 150 cm/hr）不适用不适用
载体6% 交联琼脂糖磁石嵌入型 6% 微珠状琼脂糖磁石包被聚合物
重复使用次数多达10次00
可选产品形式松散微珠松散微珠松散微珠
推荐的应用规模可扩展高通量批量筛选
货号A50588 (1 mL)
A50589 (5 mL)
A50590 (25 mL)
A50591 (100 mL)		7860588831
产品类型HisPur Ni-NTA 琼脂糖树脂HisPur Ni-NTA Superflow 树脂Pierce 高容量
Ni-IMAC 树脂，EDTA 兼容		HisPur 钴琼脂糖树脂HisPur 钴 Superflow 树脂
微珠或树脂尺寸45–165 μm60–160 μm100 µm45–165 μm60–160 μm
静态结合容量~60 mg/mL≥60 mg/mL>80 mg/mL≥15 mg/mL≥30 mg/mL
动态结合容量*18 mg/mL20 mg/mL>60 mg/mL不确定20 mg/mL
最大线性流速*700 cm/hr1,200 cm/hr300 cm/hr700 cm/hr1,200 cm/hr
载体6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 琼脂糖6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 微珠状琼脂糖
重复使用次数52510525
可选产品形式松散微珠、预装离心柱和试剂盒、色谱纯化柱松散微珠松散微珠松散微珠、预装离心柱和试剂盒、色谱纯化柱松散微珠
推荐的应用规模批量、中试批量、中试、工艺批量、中试批量、中试批量、中试、工艺
货号88221
（松散树脂）
90098
（1 mL 纯化柱）
90099
（5 mL 纯化柱）
88230
（离心板）		25214A50584
(20 mL)
A50585
(100 mL)
A50586
(500 mL)
A50587
(1000 mL)		89964
（松散树脂）
90093
（1 mL 纯化柱）
90094
（5 mL 纯化柱）
90095
（离心板）		25228
IMAC 磁珠
产品类型Pierce 高容量 Ni-IMAC 磁珠，EDTA 兼容Pierce Ni-NTA 琼脂糖磁珠Pierce Ni-NTA 磁珠
微珠或树脂尺寸100 µm10–40 μm1 μm
静态结合容量>80 mg/ml≥70 mg/mL≥0.5 mg/mL
动态结合容量*>60 mg/ml 不适用不适用
最大线性流速*300 cm/hr（推荐 150 cm/hr）不适用不适用
载体6% 交联琼脂糖磁石嵌入型 6% 微珠状琼脂糖磁石包被聚合物
重复使用次数多达10次00
可选产品形式松散微珠松散微珠松散微珠
推荐的应用规模可扩展高通量批量筛选
货号A50588 (1 mL)
A50589 (5 mL)
A50590 (25 mL)
A50591 (100 mL)		7860588831
IMAC 树脂
产品类型HisPur Ni-NTA 琼脂糖树脂HisPur Ni-NTA Superflow 树脂Pierce 高容量
Ni-IMAC 树脂，EDTA 兼容		HisPur 钴琼脂糖树脂HisPur 钴 Superflow 树脂
微珠或树脂尺寸45–165 μm60–160 μm100 µm45–165 μm60–160 μm
静态结合容量~60 mg/mL≥60 mg/mL>80 mg/mL≥15 mg/mL≥30 mg/mL
动态结合容量*18 mg/mL20 mg/mL>60 mg/mL不确定20 mg/mL
最大线性流速*700 cm/hr1,200 cm/hr300 cm/hr700 cm/hr1,200 cm/hr
载体6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 琼脂糖6% 微珠状琼脂糖高度交联 6% 微珠状琼脂糖
重复使用次数52510525
可选产品形式松散微珠、预装离心柱和试剂盒、色谱纯化柱松散微珠松散微珠松散微珠、预装离心柱和试剂盒、色谱纯化柱松散微珠
推荐的应用规模批量、中试批量、中试、工艺批量、中试批量、中试批量、中试、工艺
货号88221
（松散树脂）
90098
（1 mL 纯化柱）
90099
（5 mL 纯化柱）
88230
（离心板）		25214A50584
(20 mL)
A50585
(100 mL)
A50586
(500 mL)
A50587
(1000 mL)		89964
（松散树脂）
90093
（1 mL 纯化柱）
90094
（5 mL 纯化柱）
90095
（离心板）		25228


其他 HisPur Ni-NTA 和 HisPur 钴产品

树脂产品形式每柱所需树脂柱尺寸收集管尺寸货号
Ni-NTA离心柱0.2 mL0.8 mL微量离心88224
Ni-NTA离心柱1 mL2 mL15 mL（锥形）88225
Ni-NTA离心柱3 mL10 mL50 mL（锥形）88226
Ni-NTA离心柱试剂盒0.2 mL0.8 mL微量离心88227
Ni-NTA离心柱试剂盒1 mL2 mL15 mL（锥形）88228
Ni-NTA离心柱试剂盒3 mL10 mL50 mL（锥形）88229
钴离心柱0.2 mL0.8 mL微量离心89967
钴离心柱1 mL2 mL15 mL（锥形）89968
钴离心柱3 mL10 mL50 mL（锥形）89969
钴离心柱试剂盒0.2 mL0.8 mL微量离心90090
钴离心柱试剂盒1 mL2 mL15 mL（锥形）90091
钴离心柱试剂盒3 mL10 mL50 mL（锥形）90092


产品特征数据

Comparison of protein yield and purity between Pierce Ni-NTA Magnetic Agarose and competing products from other suppliers.

Pierce Ni-NTA 磁性琼脂糖和其他供应商竞争产品的蛋白得率和纯度比较。用 0.5 mL 结合缓冲液稀释三种蛋白质（6xHis 标签 BirA、6xHis 标签红色萤火虫荧光素酶或 6xHis 标签 GFP）的样本 (0.5 mL)，并用 25 mL 沉淀微珠进行手动纯化。有关缓冲液成分和体积，遵循各自供应商的实验方案。Pierce Ni-NTA 磁性琼脂糖的得率更高，且纯度与其他供应商的微珠类似。
 

Product comparison with Thermo Scienitific HisPur Nickel Superflow Agarose and Qiagen Ni-NTA Superflow resin.

镍树脂上的 6xHis-GFP 纯度。将对应于大约 16 mg 6xHis-GFP 的大肠杆菌过表达裂解液的等份试液 (8 mL) 上样到两种不同 Ni-NTA 树脂的 1 mL 色谱柱中（直径 = 0.7 cm）：Thermo Scientific HisPur 镍 Superflow 琼脂糖和 Qiagen™ Ni-NTA Superflow（货号30410）。 用 10 mL（10倍色谱柱体积）包含 30 mM 咪唑的洗涤缓冲液来洗涤色谱柱。用 10 mL 包含 300 mM 咪唑的洗脱缓冲液来洗脱结合蛋白。按 1 mL 间隔收集组分。通过 SDS-PAGE 分离等份上样裂解液 (L)、流穿液 (FT)、洗涤液 (W) 和洗脱液（1至10）组分，然后用 Thermo Scientific Imperial 蛋白染色剂（货号24615）进行染色。使用 Thermo Scientific myImageAnalysis 软件（货号62237）通过光密度测定法确定每种凝胶中所有洗脱组分的 6xHis-GFP 纯度。

阅读完整应用文档：HisPur 镍 Superflow 琼脂糖的性能表征

相关资源

仅供科研使用，不可用于诊断目的。