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Western Blotting用的膜和滤纸 |
蛋白印迹膜选购指南
我们预切割、预组装的蛋白印迹膜/滤纸夹层专为您的凝胶设计，使蛋白转膜变得简单便捷。除此之外，还提供膜卷、膜片和滤纸，方便您根据需要自行裁剪和组装。
湿转系统选购
| 格式 | 非常适合 | 易于使用 | 聚偏二氟乙烯（PVDF） | 低荧光PVDF |
|---|---|---|---|---|
| 卷装 | 灵活的膜尺寸 | + | PVDF转印膜，0.2微米，1卷（货号Cat. No. 88520） PVDF转印膜，0.45微米，1卷（货号Cat. No. 88518） | 低荧光PVDF转印膜，0.3微米，1卷（货号Cat. No. 678000） |
| 预切片 | 一致性、减少因操作造成的损坏风险、减少浪费 | ++ | PVDF转印膜，0.45微米，10 x 10厘米（货号Cat. No. 88585） | 迷你型：低荧光PVDF膜，0.3微米，8.3 x 7.3厘米（货号：678003） 中型：低荧光PVDF膜，0.3微米，13.5 x 8厘米（货号：678004） |
| 膜/滤纸夹层 | 即用型湿转移，无需组装 | +++ | 迷你型：PVDF/滤纸夹层，0.2微米，8.3 x 7.3厘米（货号：LC2002） 迷你型：PVDF/滤纸夹层，0.45微米，8.3 x 7.3厘米（货号：LC2005） 中型：PVDF/滤纸夹层，0.45微米，8.5 x 13.5厘米（货号：LC2007） | 迷你型：低荧光PVDF/滤纸夹层，0.3微米，8.3 x 7.3厘米（货号：678001） 中型：低荧光PVDF/滤纸夹层，0.3微米，13.5 x 8厘米（货号：678002） |
对于快速干转和半干转系统，如 iBlot™ 3 Western Blot 转膜系统 和 Power Blotter™ 半干转系统，可配套使用专用的转膜耗材包。
快速转膜系统选购
| 转膜系统 | 最佳选择 | 易于使用 | 聚偏二氟乙烯（PVDF） | 低荧光PVDF |
|---|---|---|---|---|
| iBlot 3 | 最快的安装、清理和转膜时间（3–8分钟） | +++++ | Mini：iBlot 3 转印垫，PVDF膜，0.2 µm，8 x 8 cm（目录号：IB34002） Midi：iBlot 3 转印垫，PVDF膜，0.2 µm，13.5 x 8 cm（目录号：IB34001） | Mini：iBlot 3 转印垫，低荧光PVDF膜，0.3 µm，8 x 8 cm（目录号：IB34004） Midi：iBlot 3 转印垫，低荧光PVDF膜，0.3 µm，13.5 x 8 cm（目录号：IB34003） |
| Power Blotter | 快速转印（5–10分钟），多种灵活的膜和滤纸选择 | ++++ | 迷你型：Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，0.2 µm，8 x 8 cm（目录号：PB5240） 迷你型：Power Blotter预切膜和过滤器，PVDF，0.45 µm，7 x 8.4 cm（目录号：PB9220） 中型：Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，0.2 µm，13 x 8.3 cm（目录号：PB5310） 中型：Power Blotter预切膜和过滤器，PVDF，0.45 µm，13.5 x 8.5 cm（目录号：PB9320） | 上述表格中列出的低荧光PVDF膜与Power Blotter兼容。 |
如何选择膜材料
高质量的蛋白质印迹（western blot）结果通常可以通过使用硝酸纤维素（nitrocellulose）或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜来获得。这两种类型的膜都能实现高效的蛋白转移和强力的蛋白结合，从而为化学发光法western blot提供一致且灵敏的检测结果。然而，这一效果高度依赖于具体蛋白。有些蛋白在某一种膜上的结合能力会优于另一种。诸如“高分子量或低分子量蛋白更适合某种膜”这样的笼统说法，可能具有误导性或不准确性。蛋白本身的性质（如电荷、疏水性等）会影响其与膜表面的结合能力，因此，找到最佳膜材可能需要针对您的特定蛋白，在不同类型的膜上进行实验。
所采用的检测方法也会影响目标信号和膜背景。在荧光免疫印迹（fluorescent western blotting）中，或者使用如Invitrogen No-Stain Protein Labeling Reagent 这类荧光总蛋白归一化方法时，由于膜自身自发荧光和背景噪音，曝光时间通常受到限制，这会降低可达到的检测极限。优化后的低荧光PVDF膜在各个荧光通道下表现出较低的自发荧光，从而实现低背景和高信噪比，非常适用于基于荧光的western blot应用。
最后，还有一些操作方面的考虑因素可能影响选择硝酸纤维素还是PVDF。一般认为，PVDF膜比硝酸纤维素更耐用。然而，PVDF需要一个激活步骤以增强其对蛋白质的结合能力，这一步骤通常通过在100%甲醇或乙醇中孵育3-5分钟来完成。相比之下，硝酸纤维素膜不需要这种预激活步骤，但它比PVDF更脆弱，需要更加小心地操作以避免撕裂。
| 属性 | 硝酸纤维素膜 | PVDF膜 | 低荧光PVDF膜 |
|---|---|---|---|
| 化学发光检测 | +++ | +++ | +++ |
| 荧光检测 | ++ | + | +++ |
| 总蛋白归一化 | ++ | + | +++ |
| 需要激活吗？ | 否 | 是 | 是 |
| 结合机制 | 氮偶极、氢键、离子和疏水相互作用 | 疏水相互作用 | 疏水相互作用 |
| 耐久性 | 不太耐用 | 更耐用 | 更耐用 |
PVDF 膜
PVDF（聚偏二氟乙烯）膜是一种疏水性微孔膜，是Western Blot实验、氨基酸分析以及少量蛋白（最低可达10皮摩尔）序列测定的理想选择。在Western Blot中，PVDF 膜通过疏水作用和偶极相互作用与蛋白结合。
PVDF膜在浸入转移缓冲液之前需要进行激活步骤。这一步是必要的，因为PVDF具有高度疏水性。在激活过程中，甲醇或乙醇作为非极性膜与极性缓冲液之间的媒介，使转移缓冲液能够与膜发生作用。
低荧光PVDF膜
在进行荧光免疫印迹实验时，标准PVDF膜通常表现出较高的自发荧光，尤其是在低波长通道（如紫外、488和550 nm）中。这是一个显著的缺点，因为高水平的荧光背景会干扰准确检测和分析。因此，选择合适的膜用于荧光免疫印迹至关重要，因为它影响可用的荧光通道、检测限以及整体准确性。
Invitrogen低荧光PVDF膜在所有荧光通道中都表现出极低的自发荧光，标准PVDF膜相比，背景更低（见图1）。此外，Invitrogen低荧光PVDF膜具有独特的一致且均匀分布于整个表面的0.3微米孔径，是高质量荧光免疫印迹应用的优选（见图2）。
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图1。标准PVDF膜相比，Invitrogen低荧光PVDF表现出更低的自发荧光。未处理的膜被水化后，在兼容的数字蛋白免疫印迹成像系统上于六个不同的荧光通道中一起成像。在每个通道内，每种膜的曝光时间和对比度设置保持一致。
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图2。Invitrogen低荧光PVDF具有纤维结构，并且其孔径分布比许多标准PVDF膜更加均匀。(A) 通过扫描电子显微镜拍摄的Invitrogen低荧光PVDF膜（左）和标准PVDF（右）的顶部及截面视图。(B) Invitrogen低荧光PVDF膜（红色）与标准PVDF（灰色）的孔径分布。使用毛细管孔径计评估每种膜直径为12毫米的圆片，以测定平均孔径及频率。
图3。与其他市售低荧光PVDF膜相比，Invitrogen低荧光PVDF表现出更低的自发荧光。未处理的膜被水化后，在兼容的数字蛋白免疫印迹成像系统上，于六个不同的荧光通道中一起成像，曝光时间和对比度设置与标准蛋白免疫印迹应用一致。在每个通道内，每种膜的对比度和成像时间保持一致。各膜在100%甲醇中水化3分钟，然后在去离子水中用摇床清洗5分钟。
与其他市售低荧光PVDF膜相比，Invitrogen低荧光PVDF膜在较短波长通道成像时表现出卓越性能（见图3）。
较低的背景荧光能够实现每张印迹检测更多的蛋白靶标，提升数据发表质量，并带来多项额外优势，包括：
- 更高的信噪比——降低背景噪音可增强信号清晰度（见图4）
- 灵敏的检测——减少自发荧光可提高检测下限
- 增强多重检测能力——在多重实验中提升结果表现，尤其是在利用低波长通道时效果更佳
图4. Invitrogen 低荧光PVDF膜在蛋白免疫印迹中相比其他市售低荧光PVDF膜实现了更高的信噪比。四种裂解液以2倍梯度稀释，从20 µg至2.5 µg，加载并在Tris-Glycine凝胶上进行电泳，然后转移到三种不同的膜上。室温封闭1小时后，于4°C孵育一夜，加入针对Hsp90、Calreticulin、β-Actin和p23的一抗。TBST中的二抗（GAR-800、GAM-647和GAC-488）于室温孵育1小时。使用iBright FL1500成像系统（货号A44241）在相同条件下对印迹进行成像和对比分析。
滤纸
蛋白免疫印迹滤纸是预切割棉质片，用于湿转或半干转、被动或电泳方式将蛋白从聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）转移到PVDF、硝酸纤维素或其他膜上。滤纸片是组装各种蛋白或核酸凝胶到转膜方案所必需的“夹心”结构和盒式组件的重要组成部分。高质量的蛋白免疫印迹滤纸有标准厚度和加厚两种规格，均为方便小型及中型凝胶操作而预先裁剪。请选择适合特定凝胶尺寸及设备平台或盒式组件所需厚度与尺寸的滤纸。
| 厚度 | 迷你尺寸 | 中号尺寸 | 特殊尺寸 |
|---|---|---|---|
| 0.83 毫米 | 蛋白免疫印迹滤纸，7 x 8.4 厘米（货号 84783） | 蛋白免疫印迹滤纸，8 x 13.5 厘米（货号 84784） | Western Blotting滤纸，8 x 10.5厘米（货号：88600） |
| 2.5 毫米 | Western Blotting滤纸，加厚型，7 x 8.4厘米（货号：88605） Blotting滤纸，厚度2.5毫米，7.5 x 8.4厘米（货号：LC2010） | Western Blotting滤纸，加厚型，8 x 13.5厘米（货号：88615） Blotting滤纸，厚度2.5毫米，8.6 x 13.5厘米（货号：LC2008） | Western Blotting滤纸，加厚型，8.5 x 9厘米（货号：88610） Western Blotting滤纸，加厚型，20 x 20厘米（货号：88620） |
订购蛋白质印迹（western blot）膜和滤纸产品
PVDF 卷材、预切片及膜/滤纸夹层
PVDF iBlot 3和Power Blotter转膜耗材包
低荧光PVDF卷材、预切片及膜/滤纸夹层
低荧光PVDF iBlot 3转膜耗材包
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Power Blotter—半干式转膜系统
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SureLock Tandem Midi Blot 模块
两个 SureLock Tandem Midi Blot 模块可同时放入创新型双用途 SureLock Tandem Midi 胶槽中，专为常温下轻松进行凝胶转膜而设计。
资源
产品详情
聚偏二氟乙烯（PVDF）膜非常适用于蛋白质免疫印迹（western blot）以及少量蛋白质的氨基酸分析和蛋白质测序（最低可达10皮摩尔）。此外，PVDF膜可以重复使用、剥离和重新探测，而不会降低灵敏度或增加背景信号。
PVDF膜具有高度疏水性，在浸入转移缓冲液之前必须先用甲醇或乙醇预湿。PVDF膜对蛋白质和核酸具有很高的结合亲和力，可用于western、Southern、northern及点杂交等应用；结合主要通过偶极和疏水相互作用实现。由于更强的疏水性，PVDF膜对吸附蛋白质的保留能力优于其他载体材料。此外，PVDF比硝酸纤维素更不易脆裂。
| Membrane Size | Mini Size (8 cm x 8 cm) | 常规尺寸（13厘米 x 8.3厘米） | ||
iBlot 2设备 | 原版iBlot设备 | iBlot 2设备 | 原版iBlot设备 | |
|---|---|---|---|---|
聚偏二氟乙烯（PVDF） | iBlot 2转膜耗材包，PVDF，小号（目录号：IB24002） | iBlot转膜耗材包，PVDF，小号（目录号：IB401002） | iBlot 2转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：IB24001） | iBlot转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：IB401031）（目录号：IB401001） |
iBlot 和 iBlot 2 转膜耗材包是一次性耗材垫片，内含集成的 PVDF 或硝酸纤维素转印膜，用于蛋白质的干式转印。每个转膜耗材包包含一个铜涂层电极以及适当的阴极和阳极缓冲液，这些缓冲液分布在凝胶基体中，以实现快速、可靠的蛋白质转移。
PVDF 膜
该叠层中的PVDF膜（孔径0.2微米，低荧光）相比硝酸纤维素具有较高的结合能力。PVDF膜已预活化，可直接使用，无需酒精等预处理。该膜兼容常用的检测方法，如染色、免疫检测、荧光或放射性标记。蛋白质通过疏水相互作用与膜结合。蛋白结合能力为240微克/平方厘米。
转膜耗材包尺寸
迷你尺寸（8厘米 x 8厘米）可用于所有Invitrogen预制和手工浇注的迷你胶（或其他类型的迷你胶）。常规尺寸（13厘米 x 8.3厘米）可用于所有Invitrogen中型胶（或其他类型的中型胶）、两个Invitrogen迷你胶（或其他类型的迷你胶），以及E-PAGE 48或96凝胶。
| 膜尺寸 | 迷你 | 常规（2个迷你或1个中型） | ||
| 转膜耗材包 | 带滤纸的膜 | 预组装堆叠 | 带滤纸的膜 | |
|---|---|---|---|---|
| 聚偏二氟乙烯（PVDF） | Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，小型（目录号：PB5240）（目录号：PB5210） | Power Blotter预切割膜和过滤器，PVDF小型（目录号：PB9220） | Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：PB5310） | Power Blotter 预切割膜和滤纸，PVDF，常规尺寸（目录号：PB9320） |
Invitrogen Power Blotter Select 转膜耗材包用于使用Power Blotter系统转移蛋白。它们是一次性、预组装的堆叠产品，配有集成的预活化PVDF或硝酸纤维素转膜，用于将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶进行干式转印。每个Power Blotter Select Transfer Stack包含滤纸、膜，以及适当的阴极和阳极缓冲液，这些都被整合到固体凝胶基质中，以实现快速、可靠的蛋白转移。
Select stack PVDF膜
PVDF膜（孔径0.45微米，低荧光）相比硝酸纤维素具有更高的结合能力。该膜兼容常用检测方法，如染色、免疫检测和荧光。蛋白通过疏水作用与膜结合。低荧光膜相比普通PVDF或硝酸纤维素膜具有更低的背景信号和更高的荧光探测灵敏度。
Invitrogen Power Blotter 预切割膜和滤纸专为使用 Power Blotter 系统进行蛋白转移而设计。预切割的膜和滤纸包括 20 张聚偏二氟乙烯（PVDF）或硝酸纤维素膜，以及 80 张吸水性印迹纸（厚度为 0.85 毫米）。Power Blotter 预切割膜和滤纸与 Power Blotter 一步转移缓冲液结合使用，可在不到 10 分钟内实现高效的半干式蛋白转移。
Western blotting 印迹滤纸是用于湿式或半干式、被动或电泳法将蛋白从聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）转移到 PVDF、硝酸纤维素或其他膜上的预切棉质片。印迹纸是组装各种类型蛋白或核酸凝胶到膜的转移方案时，转移夹层和盒组件中必不可少的组成部分。高质量 Western blotting 滤纸有标准厚度和加厚两种规格，均已预先裁剪，方便用于 mini 凝胶和 midi 凝胶。请选择适合特定凝胶尺寸及设备平台或盒组件所需厚度和尺寸的滤纸。
聚偏二氟乙烯（PVDF）膜非常适用于蛋白质免疫印迹（western blot）以及少量蛋白质的氨基酸分析和蛋白质测序（最低可达10皮摩尔）。此外，PVDF膜可以重复使用、剥离和重新探测，而不会降低灵敏度或增加背景信号。
PVDF膜具有高度疏水性，在浸入转移缓冲液之前必须先用甲醇或乙醇预湿。PVDF膜对蛋白质和核酸具有很高的结合亲和力，可用于western、Southern、northern及点杂交等应用；结合主要通过偶极和疏水相互作用实现。由于更强的疏水性，PVDF膜对吸附蛋白质的保留能力优于其他载体材料。此外，PVDF比硝酸纤维素更不易脆裂。
| Membrane Size | Mini Size (8 cm x 8 cm) | 常规尺寸（13厘米 x 8.3厘米） | ||
iBlot 2设备 | 原版iBlot设备 | iBlot 2设备 | 原版iBlot设备 | |
|---|---|---|---|---|
聚偏二氟乙烯（PVDF） | iBlot 2转膜耗材包，PVDF，小号（目录号：IB24002） | iBlot转膜耗材包，PVDF，小号（目录号：IB401002） | iBlot 2转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：IB24001） | iBlot转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：IB401031）（目录号：IB401001） |
iBlot 和 iBlot 2 转膜耗材包是一次性耗材垫片，内含集成的 PVDF 或硝酸纤维素转印膜，用于蛋白质的干式转印。每个转膜耗材包包含一个铜涂层电极以及适当的阴极和阳极缓冲液，这些缓冲液分布在凝胶基体中，以实现快速、可靠的蛋白质转移。
PVDF 膜
该叠层中的PVDF膜（孔径0.2微米，低荧光）相比硝酸纤维素具有较高的结合能力。PVDF膜已预活化，可直接使用，无需酒精等预处理。该膜兼容常用的检测方法，如染色、免疫检测、荧光或放射性标记。蛋白质通过疏水相互作用与膜结合。蛋白结合能力为240微克/平方厘米。
转膜耗材包尺寸
迷你尺寸（8厘米 x 8厘米）可用于所有Invitrogen预制和手工浇注的迷你胶（或其他类型的迷你胶）。常规尺寸（13厘米 x 8.3厘米）可用于所有Invitrogen中型胶（或其他类型的中型胶）、两个Invitrogen迷你胶（或其他类型的迷你胶），以及E-PAGE 48或96凝胶。
| 膜尺寸 | 迷你 | 常规（2个迷你或1个中型） | ||
| 转膜耗材包 | 带滤纸的膜 | 预组装堆叠 | 带滤纸的膜 | |
|---|---|---|---|---|
| 聚偏二氟乙烯（PVDF） | Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，小型（目录号：PB5240）（目录号：PB5210） | Power Blotter预切割膜和过滤器，PVDF小型（目录号：PB9220） | Power Blotter精选转膜耗材包，PVDF，常规尺寸（目录号：PB5310） | Power Blotter 预切割膜和滤纸，PVDF，常规尺寸（目录号：PB9320） |
Invitrogen Power Blotter Select 转膜耗材包用于使用Power Blotter系统转移蛋白。它们是一次性、预组装的堆叠产品，配有集成的预活化PVDF或硝酸纤维素转膜，用于将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶进行干式转印。每个Power Blotter Select Transfer Stack包含滤纸、膜，以及适当的阴极和阳极缓冲液，这些都被整合到固体凝胶基质中，以实现快速、可靠的蛋白转移。
Select stack PVDF膜
PVDF膜（孔径0.45微米，低荧光）相比硝酸纤维素具有更高的结合能力。该膜兼容常用检测方法，如染色、免疫检测和荧光。蛋白通过疏水作用与膜结合。低荧光膜相比普通PVDF或硝酸纤维素膜具有更低的背景信号和更高的荧光探测灵敏度。
Invitrogen Power Blotter 预切割膜和滤纸专为使用 Power Blotter 系统进行蛋白转移而设计。预切割的膜和滤纸包括 20 张聚偏二氟乙烯（PVDF）或硝酸纤维素膜，以及 80 张吸水性印迹纸（厚度为 0.85 毫米）。Power Blotter 预切割膜和滤纸与 Power Blotter 一步转移缓冲液结合使用，可在不到 10 分钟内实现高效的半干式蛋白转移。
Western blotting 印迹滤纸是用于湿式或半干式、被动或电泳法将蛋白从聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）转移到 PVDF、硝酸纤维素或其他膜上的预切棉质片。印迹纸是组装各种类型蛋白或核酸凝胶到膜的转移方案时，转移夹层和盒组件中必不可少的组成部分。高质量 Western blotting 滤纸有标准厚度和加厚两种规格，均已预先裁剪，方便用于 mini 凝胶和 midi 凝胶。请选择适合特定凝胶尺寸及设备平台或盒组件所需厚度和尺寸的滤纸。
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。