DAPI 荧光成像实验方案

DAPI (4’,6-二脒基-2-苯基吲哚) 是一种常见的细胞核和染色体复染剂，在与 DNA AT 区结合时发出蓝色荧光。

订购DAPI 细胞核复染剂

制备溶液

1.向 DAPI 样品瓶的整个内容物中加入 2 mL 去离子水 (diH2O) 或二甲基甲酰胺 (DMF)，制备 14.3 mM (5 mg/mL) DAPI 储备液。备注：DAPI 在水中的溶解度较差，因此必要时可超声溶解。5 mg/mL DAPI 储备液可在 2–6°C 下储存长达 6 个月，或在 ≤–20°C 下储存更长时间。

2.向 100 μL PBS 中加入 2.1 µL 14.3 mM DAPI 储备液，制备 300 µM DAPI 中间稀释液

3.根据需要，将 300 µM DAPI 中间稀释液按 1:1,000 在 PBS 中稀释，制备 300 nM DAPI 染色液。

固定细胞标记

首先，使用适合您样品的方案固定并透化培养的细胞。

1.根据需要，用 PBS 洗涤细胞 1–3 次。

2.加入足足量的 300 nm DAPI 染色液以覆盖细胞。

3.避光孵育 1-5 分钟。

4.去除染料溶液。

5.用 PBS 洗涤细胞 2-3 次。

6.对细胞进行成像

黑腹果蝇 胚胎染色。野生型 (Canton-S) 黑腹果蝇 胚胎表现出微管染色（绿色荧光）、齿带染色（红色荧光）和核染色（蓝色荧光 DAPI）。