Image of SYTOX® Green Nucleic Acid Stain packaging

用于显微镜检查的死细胞指示剂

SYTOX Green 核酸染料是一种明亮，高亲和力的核酸染料，可轻易渗透细胞膜受损的细胞，但不会穿过活细胞的细胞膜，从而可作为细胞群中死细胞的有用指示剂。本方案适用于显微镜检测，不适用于流式细胞分析。

此方案可以用于：

  • 荧光显微镜检测中核酸 (细胞核) 的染色

此方案不能用 于：

  • 流式细胞分析

完成此方案需要以下材料：

实验方案

标记固定细胞

使用适合您样品的方案固定并通透化培养的细胞。

1.根据需要，在无磷酸盐缓冲液中洗涤细胞 1–3 次。

2.通过在无磷酸盐缓冲液中按 1:30000 (167 nm) 的比例稀释储备液，制备 SYTOX Green 染色溶液。
3. 添加足够的染色液以覆盖细胞。
4. 避光孵育 15-30 分钟。 
5. 移除染色液。
6. 在无磷酸盐缓冲液中洗涤细胞 2-3 次。
7. 对细胞进行成像。
光谱信息及存储条件
 SYTOX Green 
激发/发射 (nm)504/523
标准检测通道GFP
EVOS 光立方GFP
储存条件≤–20°C

 

 

 

关键注意事项：

  • 经温热至室温并在每次使用前将 DMSO 溶液短暂离心至小瓶底部。
  • 可在 10 nM 至 1 µM 范围内尝试多种染料浓度，以确定最佳浓度。
  • 通常，在不含磷酸盐的缓冲液中获得极佳结果，如 Hank's 平衡盐溶液 (货号：14025-092）。
  • 将所有核酸结合染料作为潜在突变原处理，并小心处理。

multicolor staining of BPAE cells
对 BPAE 细胞进行多色染色。使用 MitoTracker Red CM-H2XRos对 BPAE 细胞线粒体染色。然后将细胞固定、透化、经 RNase 处理，用 SYTOX Green 核酸染料染色，再成像。

常见问题FAQ

1. SYTOX Green 为什么可以标记死细胞？
SYTOX Green 可进入膜受损细胞，但不会进入活细胞，因此常用于区分死细胞。

2. SYTOX Green 显微镜染色的推荐浓度是多少？
该方案中推荐将染料按 1:30,000 稀释，工作浓度约为 167 nM。

3. SYTOX Green 染色需要孵育多久？
通常建议避光孵育 15–30 分钟。

4. 为什么建议使用无磷酸盐缓冲液？
使用无磷酸盐缓冲液有助于降低背景并改善染色效果。

5. SYTOX Green 的激发和发射波长是多少？
SYTOX Green 的激发/发射峰约为 504/523 nm，通常可配合 GFP 滤光片使用。

仅供科研使用，不可用于诊断目的。