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基于细胞膜完整性的活性检测

Invitrogen LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂能够对活细胞与死细胞进行流式细胞术区分。染料与细胞内和细胞外胺类共价结合，使染色结果在甲醛固定后保留下来。共有八种不同的荧光色可供选择。

此方案可以用于：

  • 使用流式细胞仪鉴定活细胞和死细胞

此方案不能用于：

  • 荧光显微镜检测

完成此方案需要以下材料：

方案

1.将染料小瓶解冻
2.通过向小瓶中加入 50 µL DMSO 来稀释 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂
3.使用无蛋白缓冲液，向流式细胞仪试管中加入 1 mL 的细胞
4.向细胞中加入 1 µL 稀释后的染色剂
5.将细胞和染色剂混匀
6.培养 30 分钟
7.清洗细胞
8.在流式细胞仪上进行分析

 

方案提示

  • 细胞浓度应为 1x104 至 1x106 个细胞/mL
  • 染色后需清洗
  • 细胞染色可在固定后保留下来，但无需固定
  • 染料采用一次性小瓶包装，使用后应丢弃

Histogram showing live and dead cells distinguished using the LIVE/DEAD fixable dead cell stain kit reagents
 利用 LIVE/DEAD 紫色可固定死细胞染色试剂盒对活细胞与死细胞进行流式细胞术区分。

发射光谱

LIVE/DEAD 染料激发光源Ex*Em*
蓝色荧光（货号：L23105）UV350450
紫色荧光活性染料（货号：L34955）405 nm416451
浅绿色荧光（货号：L34957）405 nm367526
黄色荧光（货号：L34959）405 nm400575
绿色荧光（货号：L23101）488 nm495520
红色荧光（货号：L23102）488 nm595615
远红色荧光（货号：L10120）633/635 nm650665
近红外光（货号：L10119）633/635 nm750775
包含所有八种染料的染色试剂盒（货号：L34960）参见各种染料的相关信息
* 近似荧光激发（Ex）和发射峰（Em），单位：nm。