PCR 和实时荧光定量 PCR 是高灵敏且高特异性的技术,适用于需要快速和简单流程的实验应用。在这里让我们助您针对不同应用选择合适的试剂和 Applied Biosystems 仪器。
Sample--preparation
  • Dynabeads 磁珠和缓冲液
  • MagMAX 试剂盒
  • KingFisher 仪器
Reverse-transcription
  • 反转录酶
  • 一步法预混液
  • dNTP
Amplification
  • 预混液
  • DNA 聚合酶
  • dNTP
  • 引物和探针
  • Oligo
  • PCR 板、管、密封产品
  • 荧光染料
Run-and-analysis
  • PCR 仪
  • 实时荧光定量 PCR 仪

如果您的起始材料是 RNA,无论您是进行基因表达 分析、病毒检测、还是以 RNA 开始的任何应用,我们高质量的反转录酶和预混液都可以助您获得所需的结果。我们的许多酶也可以 可冻干酶 (lyo-ready) 的形式提供,其甘油含量低于 0.05%。

借助我们专有的体外蛋白改造技术,可向普通反转录酶中引入多个有利突变,使其具有增强的热稳定性、高抑制剂耐受性和高持续合成能力。这里是一些最常使用的反转录酶。

反转录酶选择表

特性SuperScript IV 反转录酶 Maxima 反转录酶 RevertAid 反转录酶 (M-MuLV)
最佳反应温度50°C50°C
42°C
RNase H 活性

是否提供 RNase H-形式的酶NAMaxima H Minus RT

RevertAid H 负 RT

反应时间10 分钟30 分钟60 分钟
抑制剂耐受能力+++++++

+

Lyo-ready

Lyo-ready 是一种不含甘油、可冻干的形式。

+ =差; + + =中等; +++=好; ++++ =推荐。

A15299

一步法预混液

 Applied Biosystems TaqPath 1-Step RT-qPCR Master Mix{ 可在一个反应中进行反转录和 qPCR 扩增,十分方便。它是一种通用型试剂 (GPR),与其它预混液相比,其具有增强的抗抑制剂能力 和可重复性。该产品在 ISO 13485 认证的工厂 中生产,采用 变更控制、文件控制和采购控制等措施。 此外,每批次产品 出厂前都经过质量控制检测。

如果您的起始材料是 DNA 或 cDNA,请选择我们的 Taq DNA 聚合酶,或者我们的基因分型或一步法基因表达预混液。这其中的许多产品也可以提供不含甘油的 可冻干(lyo-ready) 形式。您可以根据对热启动技术、扩增速度、PCR 抑制剂耐受能力及冻干兼容性的要求,从以下 PCR 酶产品清单中选择适合您实验应用的 Taq DNA 聚合酶。我们的酶可帮助您的分子检测产品具有高灵敏度、高准确性和可重复性。如果你需要更高的标准,确保阳性是真阳性,我们还提供使用一次性技术生产的 DNA-free 酶。

Taq DNA 聚合酶选择表

 Platinum II TaqPlatinum TaqAmplitaq GoldLibertyTaq野生型 Taq
热启动 PCR抗体修饰抗体修饰化学修饰专利配方
与 TaqMan 探针兼容
激活时间2 分钟2 分钟10 分钟0 分钟
0 分钟
延伸速度15–30 sec/kb30–60 sec/kb30–60 sec/kb30–60 sec/kb30–60 sec/kb
灵敏度++++++++++++
灵敏度++++++++++++
抑制剂耐受力++++++++
Lyo-ready根据需求
DNA-free 形式根据需求根据需求根据需求根据需求

Lyo-ready 是一种不含甘油的可冻干形式。

+ =差; + + =中等; +++=好; ++++ =推荐。

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预混液

 Taq Path 预混液针对实时荧光定量 PCR 提供了一个整体解决方案。其 包含缓冲液、dNTP、被动 参比染料、热稳定的热启动 DNA 聚合酶、以及其它组分,设计用于基于5'核酸酶 探针的实时定量 PCR ,旨在获得稳定的实验结果。只需加入样本和 Applied Biosystems TaqMan Assay 组分,即可 开始 您的实验。

对于基因分型和拷贝数变异检测,我们的Applied Biosystems TaqPath  ProAmp Master Mix 可提供准确的基因分型结果,即使在存在抑制剂的情况下。同时其还可配套提供 Applied Biosystems  ROX 或 Mustang Purple 染料,使其成为多重检测的理想选择。

对于 DNA 检测或一步法基因表达 分析,Applied Biosystems  TaqPath qPCR Master Mix可在宽动态范围内获得 可重复的线性 结果。

我们的 dNTP 配方旨在提供极大的便利和灵活性。标准核苷酸(dATP, dCTP, dGTP, dTTP 和 dUTP)以100mM溶液形式提供,还可以核苷酸混合物形式提供,混合物种每种核苷酸浓度最高可达100mM。   

TaqMan real-time PCR assays 在同一个反应管中包含经优化的引物和探针组。我们可提供一整套定制合成的寡核苷酸引物和探针,按照您的具体实验要求。 只需确定您感兴趣的靶标或具体序列,我们的团队即可为您进行设计。 除了定制寡核苷酸外,我们还提供用于 TaqMan Assays 的预设计引物和探针组,其由我们生物信息学团队开发设计。  

TaqMan 探针的3ʹ端包括一个小沟结合 (MGB) 部分,可提高探针的解链 温度 (Tm) 并稳定探针-靶标杂交体。 因此  MGB 探针  比传统探针短得多,从而为分子检测产品 的探针开发设计提供了灵活性。

TaqMan MGB 探针结合了非荧光淬灭剂 (NFQ) ,以 吸收(淬灭) 探针另一端的 荧光染料标记中的 信号。NFQ 的特性结合短片段的MGB探针,相比非 MGB NFQ 探针,其背景信号更低。 更低的背景信号意味着增强的数据灵敏度和精确度。 

DNaseI

Thermo Scientific DNase I —其为一种内切核酸酶,可在 RT-PCR 的准备过程中消化单链和双链 DNA。 其水解磷酸二酯键 ,生成带有5´ 磷酸基和 3' 羟基” 的混合脱氧单核苷酸和寡 脱氧核糖核苷酸。

Thermo Scientific dsDNase — 其为一种经基因工程改造的 shrimp DNase,旨在快速安全地从RNA样本中去除污染的 基因组 DNA。它是一种内切核酸酶,可切割 DNA 中的磷酸二酯键生成 带5ʹ磷酸基和3ʹ羟基末端的寡核苷酸 ,其对双链 DNA 的高特异性可确保 RNA 和单链 DNA 产物(例如cDNA和引物)不被裂解。 dsDNase 容易通过适度热处理(55°C)失活。这些特性使 dsDNase 成为反转录之前除去 gDNA  的首选。其极大地简化了实验流程,将基因组 DNA 消除和 cDNA 合成整合到同一个反应管中。

RNaseOUT

Invitrogen RNaseOUT Recombinant Ribonuclease Inhibitor —其为胰腺型 核糖核酸酶(如RNase A)高效非竞争性抑制剂,可 在多种实验应用中避免 RNA 被降解。 RNaseOUT 重组核糖核酸酶抑制剂是一种分子量约为52 kDa 的酸性蛋白,可抑制RNase A、RNase B 和 RNase C。

Thermo Scientific Uracil-DNA Glycosylase (UDG, UNG) —防止 PCR 产物残留污染。该 酶催化尿嘧啶和糖之间的N-糖基键水解,在 含尿嘧啶的单链或双链 DNA 中留下一个无嘧啶位点。该酶对 RNA 没有活性

当您想使用 Applied Biosystems 实时定量 PCR 仪进行检测时,您可利用我们遍布全球的庞大装机量。 如果您的客户没有仪器,或者需要额外的仪器来增加检测能力,您还可以利用我们的仪器放置和试剂租赁计划,为您的客户提供我们的仪器。作为一种选择,您甚至可以对我们的仪器进行 贴标: 将 Applied Biosystems 仪器整合集成到您的检测流程中,并在贴有您自己的标签的情况下将其交付给客户。您的客户还可免费获得我们的验证和IQ/OQ (安装资格/操作资格) 服务。我们提供一系列高质量的 qPCR 仪器。对于临床应用,我们建议使用 Applied Biosystems  QuantStudio 5、QuantStudio 7和7500Fast 仪器,这些仪器可用于科学研究用途 (RUO),且在某些地区已通过 CE-IVD 认证。    

 QuantStudio 5 systemQuantStudio 7 system7500 Fast system
 
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广泛使用的主力
仪器

可提供用于 IVD 的仪器吗?仅 CE-IVD在大多数地区可提供

在大多数地区可提供

面积 (W x D x H)27 x 50 x 40 厘米53 x 70 x 75 厘米34 x 45 x 49 厘米
光学系统 白色 LED白卤素灯

白卤素灯

模块固定模块:
96-well 0.2 mL
可换模块:
96-well 0.2 mL
96-well 0.1 mL
384-well TaqMan Array Card
固定模块:96-well 0.1 mL

仅供科研使用,不可用于临床诊断。