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Invitrogen™ Molecular Probes™ 及eBioscience荧光试剂是全球公认的获得出版级高品质荧光图像所需的必要关键工具之一,也是所有生命科学研究同行文献中引用率最高的试剂。

 三大精选主题

  • 细胞活性检测
  • 细胞周期检测
  • 细胞凋亡

主题一:细胞活性检测

可固定细胞活性流式试剂

从数据中排除死细胞可以使免疫细胞分群更为准确,如下图数据可见排除死细胞后,阳性细胞分群更明确。Invitrogen Molecular Probes LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂是一种有助于确认在细胞固定后对活性进行准确评估的可固定活性染料。

如左图若设门活细胞(图上蓝色细胞群,可明确区分出有表达因子的细胞群。若不把死细胞去除(图上红色细胞群)则无法明确

  • 灵活 — 三种包装规格,八个单通道荧光色,灵活满足实验的需求
  • 特异 — 活细胞和死细胞可被清晰的区分,即便是在固定后也可轻松排除影响结果准确性的死细胞
  • 简便性 — 兼容大部分流式抗体染料及免疫分型方案
可固定死活染料LIVE/DEAD Fixable BlueLIVE/DEAD Fixable VioletLIVE/DEAD Fixable AquaLIVE/DEAD Fixable YellowLIVE/DEAD Fixable GreenLIVE/DEAD Fixable RedLIVE/DEAD Fixable Far RedLIVE/DEAD Fixable Near-IR
测定基础LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
数据分析死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)UV405405405488488561633/635633/635
Ex/Em (nm)350/450416/451367/526400/575495/520595/615650/665750/775
货号80 反应L34961L34963L34965L34967L34969L34971L34973L34975
200 反应L23105L34955L34957L34959L23101L23102L10120L10119
400 反应L34962L34964L34966L34968L34970L34972L34974L34976

不可固定细胞活性流式试剂

Invitrogen SYTOX死细胞染色剂无法穿透完整的细胞膜且在与dsDNA结合后具有更强的荧光信号,因而成为我们最出色的死细胞染色剂(图 1)。 SYTOX死细胞染色剂在水相介质中不发荧光,因此在使用时仅需直接加入细胞中便可进行观察,并不需要洗涤步骤,但不能用于固定后细胞染色。该系列染色剂可提供多种颜色形式并兼容多种激光,具有高度灵活性。

SYTOX Blue 死细胞染色剂SYTOX Green 死细胞染色剂SYTOX Orange 死细胞染色剂SYTOX AADvanced 死细胞染色试剂盒SYTOX Red 死细胞染色剂SYTOX 死细胞试用装染色剂
读取死细胞具有高度的荧光;活细胞不会发生染色
激光(nm)405488488532488532561633/635多种
Ex/Em (nm)444/480504/523547/570546⁄647640/658多种
多重
可固定
样品类型活细胞
产品规格1,000 反应1,000 反应1,000 反应参见下文1,000 反应每种染色剂 50 个反应
货号S34857S34860S34861100 个反应 (S10349),S34859S34862
500 个反应 (S10274)

固定细胞活性显微成像试剂

通过细胞成像方法也可以简单直观的区分死活细胞,评估单个细胞或细胞群的活性,可对培养的细胞、3D球状体、精子、细菌、酵母等进行检测。

图示:LIVE/DEAD Cell Imaging Kit (R37601) 标记HeLa 3D培养球状体中活细胞(绿色)和死细胞(红色)的结果图 (A) 无处理对照 (B) 用100 nM niclosamide预处理后 (C) 用10 μM niclosamide预处理后。
货号产品名称规格推荐检测通道Ex/Em (nm)
R37601LIVE/DEAD™ Cell Imaging Kit (488/570) 即用型滴管包装1 kit/200 assaysFITC488/535
Texas Red570/602
L3224LIVE/DEAD™ Viability/Cytotoxicity Kit, for mammalian cells1 kit/1000 assaysFITC488/535
TRITC/RFP528/617
L7011LIVE/DEAD™ Sperm Viability Kit1 kit/200~1000 assaysFITC489/519
TRITC/RFP535/617
R37609ReadyProbes™ Cell Viability Imaging Kit, Blue/Green6 x 2.5 mL 滴瓶FITC504/523
DAPI360/460
R37610ReadyProbes™ Cell Viability Imaging Kit, Blue/Red6 x 2.5 mL 滴瓶TRITC/RFP535/617
DAPI360/460

更多细胞活性检测产品请查阅官网:/cellviability

主题二:细胞周期检测

细胞周期检测对于监控不正常生长的癌细胞是重要的指标,也同时代表了细胞发育的调节分化的进展。我们提供了一系列的荧光染料,供您对活细胞或固定细胞群进行G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞的周期分析。

细胞周期分析

G0:细胞阻留时期

G1:合成前期,大量酶生成

S:DNA开始复制

G2:有丝分裂准备期,大量蛋白生成

M:有丝分裂期

活细胞周期流式检测试剂-染色后的细胞可以分选继续培养或在染色后进行功能测定

 Hoechst 33342Vybrant DyeCycle VioletVybrant DyeCycle GreenVybrant DyeCycle OrangeVybrant DyeCycle Ruby
检测基本原理利用荧光染料区分G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞
数据分析使用细胞膜通透染料进行活细胞DNA含量分析,该染料在结合双链DNA后发出与DNA质量成比例的荧光信号
激发UV或350UV或405488488或532488或633/5
发射461437534563686
推荐滤光片450/50440/40530/30585/42695/40
产品规格10 mL200反应200反应200反应100 反应400反应
货号H3570V35003V35004V35005V10309V10273

固定细胞周期流式检测试剂-染色剂用于流式细胞术固定后非活细胞

 FxCycle VioletPI ReadyProbes试剂FxCycle PI/RNAse溶液FxCycle Far RedSYTOX AADvanced
检测基本原理利用荧光染料区分G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞
数据分析使用细胞膜通透染料进行DNA含量分析,细胞存活时,该染料在结合双链DNA后发出与DNA质量成比例的荧光信号。
激发405488或532488或532633488 或 532
发射光358/461617617660/20695/40
推荐滤片450/50575/24572/24660/20695/40
包含RNase  已包括  
产品规格1试剂盒1试剂盒100 mL1 试剂盒5 x 0.5 mL0.2 mL
货号F10347R37108F10797F10348S10274S10349

活细胞周期显微成像检测试剂-动态观察细胞周期和细胞分裂

货号产品名称规格推荐检测通道Ex/Em (nm)
P36238Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor (BacMam 2.0)2 x 200 µLGFP485/520
P362372 x 1000 µLRFP555/584

Premo™ FUCCI细胞周期指示剂是一种双色荧光传感器,用以观察活细胞中细胞周期过程和细胞分裂,可通过荧光显微镜、流式细胞仪或高内涵成像对单个细胞或一群细胞进行精确和灵敏的细胞周期分析,兼容固定和透化。两种指示剂geminin–GFP 和 Cdt1–RFP两相循环,呈现从红色(G1期)到黄色(G1/S期)再到绿色(G2/M期)的动态颜色变化(如左图)。

更多细胞周期检测产品请查阅官网:/cellcycle

主题三:细胞凋亡

细胞凋亡(细胞程序性死亡)是细胞正常发育过程中,由遗传控制的细胞消亡现象。细胞死亡的有序进程对于多细胞生物而言至关重要。凋亡—由遗传因素控制的去除细胞的过程—不仅可为生物体去除其不重要的细胞和组织,确保生物体正常生长和发育,还能通过破坏免疫系统中多余的细胞以及被病毒感染或者DNA 受损的细胞,从而减小对生物体的损害。凋亡调控异常与许多疾病状态有关,例如阿尔茨海默病、 中风以及癌症。

区别千损伤导致的细胞死亡(坏死),凋亡细胞的形态学特征为核染色质固缩、 细胞皱缩以及产生膜结合凋亡 小体,以及出现DNA 片段化和—些细胞蛋白的解离或降解。通过荧光探针,我们可以选择性的显示这些差异。 与细胞活性—样,无法通过任何单—指标来准确界定细胞彻底死亡,也没有单—的实验方法能够完全的显示凋亡,因此, 在研究凋亡事件及其时间关系时最好采用多参数的方法。

诱导后时间开始

结束

细胞功能改变

线粒体膜电位

线粒体转换孔开放

磷脂酰丝氨酸外翻

Caspase 活性

DNA 浓缩

质膜完整性

DNA 片段化

所用试剂

Mito Tracker™ Red
MitoProbe™ DIOC2(3) 试剂盒
MitoProbe™ JC01 试剂盒

Image-iT™ LIVE 线粒体
转换孔检测试剂盒
MitoProbe™ 转换孔检测试剂盒

Annexin V( 膜联蛋白V)

Caspase 检测试剂盒

Hoechst 染料

碘化丙啶
SYTOXTMGREEN 染料

APO-BrdU™ TUNEL 检测试剂盒
抗BrdU 抗体

  • 线粒体膜电位/线粒体转换孔开放
    • 线粒体膜电位/线粒体转换孔开放

      细胞凋亡早期阶段的显著特征是线粒体的破裂,包括膜电位和氧化-还原电位的改变。

      底下表格列出了不同方法与各种荧光染料通道的相关试剂。

       线粒体健康分析线粒体膜电位分析
      显微镜成像流式流式显微成像
      MitoSOX™ Red线粒体超氧化物指示剂 Rhod-2 AM (钙离子指示剂)Image-iT™ LIVE 线粒体转换孔检测试剂盒线粒体通透性转换孔分析JC-1JC-1TMREMitoTracker™ Orange
      指示剂MitoSOX™ RedRhod-2 AMHoechst 33342CalceinMitoTracker Red CMXRosCalcein AMJC-1JC-1TMRMMitoTracker Orange
      检测通道RFP/TRITCTRITCDAPIFITCTRITCFITCFITCTRITCTRITCTRITC
      Ex/Em (nm)510/580552/577350/461494/517579/599494/517515/529514/529552/576550/580
      规格10 x 50 µg20 x 50 µg1 kit (1,000 slides)100 反应5 mg5 mg25 mg20 x 50 μg
      货号M36008R1245MPI35103M3415365-0851-38T3168T669M7510
  • 磷脂酰丝氨酸外翻
    • 磷脂酰丝氨酸外翻

      Annexin V染色方法是最常用于流式细胞术检测细胞凋亡中期。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的细胞质表面。凋亡的中间,PS会从膜的内侧翻转到外侧,暴露于细胞外环境,可被检测到。强荧光Annexin V偶联物可为研究磷脂酰丝氨酸外化提供快速、可靠的检测方法。

      Annexin V 荧光通道包含的坏死染料包装/反应次数货号
      eFluor 4507AAD5088-8006-72
      20088-8006-74
      Pacific BlueSYTOX AADvanced50A35136
      Alexa Fluor 488 PI50V13241
      250V13245
      Alexa Fluor 488SYTOX Green50V13240
      FITCPI5088-8005-72
      20088-8005-74
      PerCP-eFluor 710不含5088-8008-72
      20088-8008-74
      PESYTOX Green50 V35112
      7AAD50 88-8102-72
      20088-8102-74
      PE-Cyanine7不含5088-8103-72
      APCSYTOX Green50V35114
      PI50 88-8007-72
      20088-8007-74
  • Caspase 活性检测
    • Caspase 活性检测

      Caspase酶激活是细胞凋亡早期的一个显著特征。该过程参与了蛋白质底物的剪切及后续的细胞分解。我们可提供一系列caspase活性分析工具,能轻松实时监测或瞬时捕捉到活细胞中的活化caspase。

      CellEvent™ Caspase-3/7 Green/Red 成像检测试剂特点

      • 优化的 caspase-3/7 底物用于细胞凋亡分析
      • 简单且无需清洗步骤有助于保护易损的凋亡细胞
      • 适用于活细胞荧光成像和甲醛固定的方法
       CellEvent™ Caspase-3/7 Green 检测试剂Image-iT™ LIVE Red Detection KitsImage-iT LIVE Green Detection Kits
      流式显微镜成像显微镜成像
      检测原理免洗,可连续检测caspase活性,荧光强度随活性增加而增强 洗涤后检测caspase活性标记信号,可区分凋亡细胞、活细胞和死细胞
      靶向的CaspaseCaspase-3/7 Poly-caspase Caspase-3/7 Poly-caspase Caspase-3/7
      推荐检测通道FITC FITC TRITC FITC
      Em/Ex (nm)502/530 502/530 550/595 488/530
      核染料SYTOX® AADvanced  不含 Hoechst 33342
      SYTOX Green
      Hoechst 33342
      PI
      样本活细胞染色且可兼容固定
      规格100 反应 100 µl 25 µl 1 Kit 1 Kit
      货号C10427C10423C10723R37111I35101I35102I35104I35106
  • 核染色质凝聚
    • 核染色质凝聚

      处于凋亡中的细胞表现出细胞核染色质凝聚的增强。 随着染色质的凝聚,细胞可渗透核酸染料发出超亮荧光,使得结合传统的死亡细胞染色就可以确认凋亡细胞。

      货号名称激光激发/发射光波长应用
      H1399Hoechst 33342UV350/461流式
      V35003Vybrant DyeCycle™ Violet405369/437
      Y3603YO-PRO-1碘化物488491/509
      R37605NucBlue™ Live ReadyProbes™即用型滴瓶装UV360/460成像
      R37106NucRed™ Live 647 ReadyProbes™即用型滴瓶装640638/686
      R37606NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™ 即用型滴瓶装UV360/460
      HeLa细胞荧光成像图片,采用NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™ 即用型试剂染核。
  • DNA片段化
    • DNA片段化

      细胞凋亡时出现的DNA片段化会产生DNA链断裂,推荐使用TUNEL技术 (末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 标记断裂的DNA片段,进行分析。

      Invitrogen™ Click-iT™ TUNEL 显微成像试剂盒

      分析试剂可标记DNA断裂检测细胞凋亡。与其他传统使用修饰核苷酸的检测方法相比,Click-iT TUNEL方法能够检测到更高比例的凋亡细胞。Click-iT 采用“点击化学”技术,通过使用叠氮和炔基两步小分子快速反应进行标记,可用于TUNEL 凋亡检测、细胞增殖、RNA合成、新蛋白合成、脂质过氧化反应等多种检测。

      Click-iT TUNEL 技术优势:

      • 可高效准确检测晚期凋亡阶段
      • 可与其他荧光标记进行多重分析检测
      • 灵敏度更高,标记基团小渗透性更好
      • 快速检测低至2小时内可完成
      货号名称包装应用
      C10245Click-iT TUNEL Alexa Fluor 488 Imaging Assay1 kit成像&HCS
      C10246Click-iT TUNEL Alexa Fluor 594 Imaging Assay1 kit
      C10247Click-iT TUNEL Alexa Fluor 647 Imaging Assay1 kit
      C10617Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 488 dye50 assays
      C10618Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 594 dye50 assays
      C10619Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 647 dye50 assays
      C10625Click-iT TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit50 assaysIHC
      利用Click-iT Plus TUNEL Alexa Fluor 647 染料(C10619)标记,对小鼠肠FFPE切片中表达GFP的上皮细胞进行凋亡染色。

      APO™-BrdU TUNEL 流式试剂盒

      该试剂盒包含标记和探测凋亡细胞 DNA 链断裂所需的所有材料。 DNA 链被核酸酶切割或产生切口时,大量 3’ 羟基端暴露出来。 在 APO-BrdU 分析中,通过 TUNEL 技术用 BrdUTP 和末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 标记这些末端。 待其掺入 DNA 后,即可用明亮和光稳定的绿色荧光 Alexa Fluor® 488 染料标记的抗 -BrdU 抗体检测 BrdU。

      货号名称激光激发/发射光波长应用
      A23210APO-BrdU™ TUNEL Assay Kit, with Alexa Fluor™ 488 Anti-BrdU488495/519流式